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动物源性食品中违禁促生长激素的免疫快速检测技术研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
缩略词表第7-14页
第一章 绪论第14-30页
   ·立题依据第14页
   ·β-激动剂莱克多巴胺和沙丁胺醇的概述第14-18页
     ·莱克多巴胺第15-16页
     ·沙丁胺醇第16-18页
   ·莱克多巴胺和沙丁胺醇检测方法第18-21页
     ·仪器检测方法第18-19页
     ·免疫化学检测方法第19-21页
   ·雄性激素睾酮、甲基睾酮和去甲基睾酮的概述第21-24页
     ·睾酮第22-23页
     ·甲基睾酮第23页
     ·去甲基睾酮第23-24页
   ·雄性激素的检测方法第24-29页
     ·仪器检测方法第24-27页
     ·免疫化学检测方法第27-29页
   ·本课题的主要研究内容第29-30页
第二章 抗基质干扰的高灵敏莱克多巴胺单克隆抗体筛选第30-49页
   ·引言第30页
   ·试剂与仪器第30-32页
     ·实验试剂第30-31页
     ·实验动物第31页
     ·实验仪器第31页
     ·缓冲溶液第31-32页
     ·培养基第32页
   ·实验方法第32-38页
     ·半抗原的合成第32-33页
     ·免疫原和包被原的合成与鉴定第33页
     ·免疫流程第33-34页
     ·血清效价和抑制测定第34-35页
     ·杂交瘤细胞株的建立第35-37页
     ·单克隆抗体制备与纯化第37-38页
     ·单克隆抗体的鉴定第38页
     ·基质干扰筛选法在大分子单抗制备中应用第38页
   ·结果与分析第38-45页
     ·半抗原的合成和鉴定第38-39页
     ·偶联抗原的紫外鉴定第39-41页
     ·偶联抗原的电泳鉴定第41页
     ·小鼠血清鉴定第41-42页
     ·细胞株的筛选第42页
     ·单克隆抗体的特性鉴定第42-43页
     ·基质干扰筛选法在大分子单抗制备中应用第43-45页
   ·讨论第45-48页
     ·半抗原设计和纯度第45-46页
     ·抗原的偶联反应第46-47页
     ·抗体产生和筛选第47页
     ·基质干扰问题第47-48页
     ·抗体纯化第48页
   ·本章小结第48-49页
第三章 莱克多巴胺酶联免疫检测方法建立及胶体金试纸条的制备第49-61页
   ·引言第49页
   ·材料和仪器第49页
     ·实验试剂第49页
     ·实验仪器第49页
   ·实验步骤第49-53页
     ·ic-ELISA方法的条件优化第49-51页
     ·灵敏度的测定第51页
     ·交叉反应第51页
     ·猪尿样本的添加回收率测定第51页
     ·莱克多巴胺胶体金试纸条的制备第51-53页
   ·结果与分析第53-57页
     ·ic-ELISA方法的条件优化第53-55页
     ·灵敏度的测定第55页
     ·抗体交叉反应的结果第55-56页
     ·猪尿样的添加回收率测定第56-57页
   ·金标试纸条的制备第57-59页
     ·金纳米粒子的表征第57页
     ·金纳米粒子标记抗体条件的确定第57页
     ·包被原浓度的确定第57-58页
     ·金标试纸条检测限的测定第58-59页
   ·本章小结第59-61页
第四章 高灵敏沙丁胺醇单克隆抗体制备和酶联免疫检测方法的建立第61-77页
   ·引言第61页
   ·试剂与仪器第61-62页
     ·试验试剂第61页
     ·试验动物第61页
     ·试验仪器第61-62页
   ·试验方法第62-65页
     ·半抗原的合成和鉴定第62-63页
     ·抗原的合成和鉴定第63页
     ·免疫程序第63-64页
     ·血清效价和抑制测定第64页
     ·单克隆抗体的制备和特性鉴定第64页
     ·单克隆抗体的性能测定第64页
     ·ic-ELISA方法的条件优化第64页
     ·灵敏度的测定第64页
     ·交叉反应第64-65页
     ·猪尿样本的添加回收率测定第65页
   ·结果与分析第65-75页
     ·半抗原的合成和鉴定第65-66页
     ·抗原的合成和鉴定第66-68页
     ·小鼠血清的鉴定第68-69页
     ·细胞株的筛选第69页
     ·单克隆抗体的特性第69-71页
     ·ELISA方法的条件优化第71-72页
     ·单克隆抗体灵敏度的测定第72-73页
     ·单克隆抗体的交叉反应第73-75页
     ·猪尿中沙丁胺醇的添加回收实验第75页
   ·本章小结第75-77页
第五章 睾酮单克隆抗体的制备和ELISA检测方法的建立第77-90页
   ·引言第77页
   ·实验材料第77-78页
     ·药品与试剂第77页
     ·实验动物和细胞第77-78页
     ·主要仪器与设备第78页
     ·主要溶液第78页
   ·实验方法第78-79页
     ·睾酮半抗原的设计与合成第78页
     ·人工抗原的合成与鉴定第78-79页
     ·单克隆抗体的制备第79页
     ·间接竞争ELISA方法的建立和优化第79页
     ·交叉反应率的测定第79页
     ·实际样品添加回收率的测定第79页
   ·结果与分析第79-88页
     ·半抗原的合成与结构鉴定第79-80页
     ·偶联抗原的鉴定第80-82页
     ·小鼠血清的检测第82-83页
     ·胞株的筛选第83-84页
     ·单克隆抗体的特性鉴定第84-85页
     ·间接竞争ELISA的优化第85-86页
     ·灵敏度的测定第86页
     ·交叉反应率的测定第86-88页
     ·实际样品添加回收实验第88页
   ·本章小结第88-90页
第六章 甲基睾酮单克隆抗体的制备和ELISA检测方法的建立第90-100页
   ·引言第90页
   ·实验材料第90-91页
     ·药品与试剂第90页
     ·实验动物和细胞第90页
     ·主要仪器与设备第90页
     ·主要溶液第90-91页
   ·实验方法第91-92页
     ·甲基睾酮半抗原的设计与合成第91页
     ·人工抗原的合成与鉴定第91页
     ·单克隆抗体的制备第91页
     ·间接竞争ELISA方法的建立和优化第91页
     ·交叉反应率的测定第91-92页
     ·实际样品添加回收率的测定第92页
   ·结果与分析第92-99页
     ·甲基睾酮肟化反应合成与鉴定第92-93页
     ·人工抗原的合成与鉴定第93页
     ·小鼠血清的检测第93-95页
     ·细胞株的筛选第95页
     ·单克隆抗体特性鉴定第95-96页
     ·间接竞争ELISA的优化第96-97页
     ·灵敏度测定第97页
     ·交叉反应率的测定第97-99页
     ·实际样品添加回收实验第99页
   ·本章小结第99-100页
第七章 19-去甲基睾酮单克隆抗体的制备和ELISA检测方法的建立第100-111页
   ·引言第100页
   ·实验材料第100-101页
     ·药品与试剂第100页
     ·实验动物和细胞第100页
     ·主要仪器与设备第100-101页
     ·主要溶液第101页
   ·实验方法第101-102页
     ·19-去甲基睾酮半抗原的设计与合成第101页
     ·人工抗原的合成与鉴定第101页
     ·单克隆抗体的制备第101-102页
     ·间接竞争ELISA方法的建立和优化第102页
     ·交叉反应率的测定第102页
     ·实际样品添加回收率的测定第102页
   ·结果与分析第102-109页
     ·19-去甲基睾酮肟化反应合成与鉴定第102-103页
     ·人工抗原的合成与鉴定第103-104页
     ·小鼠血清的检测第104-105页
     ·细胞株的筛选第105页
     ·单克隆抗体特性鉴定第105-106页
     ·间接竞争ELISA的优化第106-107页
     ·灵敏度测定第107-108页
     ·交叉反应率的测定第108-109页
     ·实际样品的添加回收实验第109页
   ·本章小结第109-111页
主要结论第111-112页
论文创新点第112-113页
致谢第113-114页
参考文献第114-120页
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文与专利第120页

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