| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-27页 |
| ·木糖醇简介 | 第12-17页 |
| ·木糖醇的理化性质 | 第12-15页 |
| ·木糖醇的应用 | 第15-17页 |
| ·木糖醇的生产 | 第17-24页 |
| ·固液萃取法 | 第17-18页 |
| ·化学加氢法 | 第18页 |
| ·生物转化法 | 第18-24页 |
| ·木糖醇生产研究中存在的问题 | 第24-25页 |
| ·本文选题背景及研究思路 | 第25-27页 |
| ·选题背景 | 第25-26页 |
| ·研究内容以及思路 | 第26-27页 |
| 第二章 木糖还原酶基因的克隆与表达及辅酶NADPH再生体系的构建 | 第27-49页 |
| ·引言 | 第27页 |
| ·实验材料 | 第27-32页 |
| ·质粒和菌种 | 第27-29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·药品与试剂 | 第29-31页 |
| ·培养基 | 第31-32页 |
| ·引物 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-40页 |
| ·xr、gnd、zwf基因的获得 | 第32-34页 |
| ·pET30a-xr、pCDFDuet-gnd、pCDFDuet-zwf、pCDFDuet-gnd-zwf表达载体的构建 | 第34-38页 |
| ·重组载体pET30a-xr、pCDFDuet-gnd、pCDFDuet-zwf、pCDFDuet-gnd-zwf的表达 | 第38-39页 |
| ·重组酶活性的检测 | 第39-40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-47页 |
| ·目的基因的分子克隆 | 第40-41页 |
| ·阳性转化子的菌落PCR验证 | 第41-43页 |
| ·重组质粒的酶切验证 | 第43-46页 |
| ·重组质粒的表达 | 第46-47页 |
| ·重组酶活性的验证 | 第47页 |
| ·本章小结 | 第47-49页 |
| 第三章 用RED/ET重组系统敲除大肠杆菌XYLB基因 | 第49-58页 |
| ·引言 | 第49-50页 |
| ·实验材料 | 第50-52页 |
| ·质粒与菌种 | 第50-52页 |
| ·主要实验仪器 | 第52页 |
| ·药品与试剂 | 第52页 |
| ·培养基 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-54页 |
| ·引物设计与合成 | 第52-53页 |
| ·带同源臂Cm基因的克隆及Red重组功能的诱导和感受态细胞的制备 | 第53页 |
| ·电转化和FLP位点专一性重组 | 第53-54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-57页 |
| ·带同源臂Cm基因的克隆 | 第54-55页 |
| ·电转化和FLP位点专一性重组后检测图谱 | 第55-57页 |
| ·本章小结 | 第57-58页 |
| 第四章 基因工程菌发酵生产木糖醇工艺的优化 | 第58-72页 |
| ·引言 | 第58页 |
| ·实验材料 | 第58-60页 |
| ·菌种 | 第58页 |
| ·试剂 | 第58-59页 |
| ·培养基配制 | 第59页 |
| ·试剂配制 | 第59-60页 |
| ·实验方法 | 第60-65页 |
| ·总糖的测定 | 第60-62页 |
| ·木糖醇的测定 | 第62-63页 |
| ·菌体干重的测定 | 第63页 |
| ·蛋白质浓度标准曲线 | 第63页 |
| ·木糖还原酶粗酶液的制备 | 第63页 |
| ·酶活的测定 | 第63-64页 |
| ·培养条件的优化 | 第64-65页 |
| ·5L发酵罐发酵生产木糖醇 | 第65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-71页 |
| ·种龄对发酵生产木糖醇的影响 | 第65-66页 |
| ·初糖浓度对发酵生产木糖醇的影响 | 第66-67页 |
| ·温度对发酵生产木糖醇的影响 | 第67页 |
| ·pH对发酵生产木糖醇的影响 | 第67-68页 |
| ·接种量对发酵生产木糖醇的影响 | 第68-69页 |
| ·优化正交实验表 | 第69页 |
| ·5L发酵罐发酵结果 | 第69-71页 |
| ·本章小结 | 第71-72页 |
| 第五章 结论与展望 | 第72-74页 |
| ·结论 | 第72页 |
| ·展望 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
| 附录 | 第79-82页 |
| 作者简介 | 第82页 |
