| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 中文文摘 | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 绪论 | 第12-24页 |
| 1 课题背景 | 第12-15页 |
| 2 宏基因组研究 | 第15-21页 |
| ·总DNA的提取和纯化 | 第16-18页 |
| ·构建宏基因组文库 | 第18页 |
| ·宏基因组文库的筛选 | 第18-21页 |
| 3. 高温大曲微生物菌群结构多样性的研究 | 第21-22页 |
| ·ARDRA分析大曲的微生物多样性研究 | 第21-22页 |
| ·PCR-SSCP技术分析高温大曲不同部位的微生物情况 | 第22页 |
| 4 本论文研究的意义和内容 | 第22-24页 |
| 第一章 宏基因组文库的构建 | 第24-34页 |
| 第一节 前言 | 第24页 |
| 第二节 材料和方法 | 第24-28页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-28页 |
| 第三节 实验结果 | 第28-32页 |
| ·高温大曲总DNA的初步提取 | 第28-29页 |
| ·DNA的纯化 | 第29-31页 |
| ·宏基因组文库的构建 | 第31-32页 |
| ·宏基因组文库插入片段的多样性分析 | 第32页 |
| 第四节 讨论 | 第32-34页 |
| 第二章 宏基因组文库产纤维素酶基因的筛选及酶学性质分析 | 第34-42页 |
| 第一节 前言 | 第34页 |
| 第二节 材料和方法 | 第34-36页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-36页 |
| 第三节 实验结果 | 第36-40页 |
| ·产纤维素酶克隆子筛选 | 第36-38页 |
| ·产纤维素酶阳性克隆子酶学性质分析 | 第38-40页 |
| 第四节 讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 大曲宏基因组文库产纤维素酶基因的亚克隆 | 第42-52页 |
| 第一节 前言 | 第42页 |
| 第二节 材料和方法 | 第42-43页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-43页 |
| 第三节 实验结果 | 第43-49页 |
| ·制备连接所需载体 | 第44页 |
| ·质粒酶切 | 第44-45页 |
| ·重组质粒验证 | 第45-46页 |
| ·亚克隆阳性克隆验证 | 第46-47页 |
| ·基因序列分析 | 第47-49页 |
| 第四节 讨论 | 第49-52页 |
| 第四章 培养法和非培养法分析大曲的微生物多样性 | 第52-64页 |
| 第一节 前言 | 第52页 |
| 第二节 材料和方法 | 第52-55页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·高温大曲16s rDNA文库的构建 | 第52-54页 |
| ·ARDRA分析 | 第54-55页 |
| ·标准多样性指数的计算 | 第55页 |
| ·克隆子16S rDNA的测序和系统发育分析 | 第55页 |
| 第三节 实验结果 | 第55-63页 |
| ·PCR模板DNA的制备 | 第55-57页 |
| ·16S rDNA的PCR扩增及胶回收 | 第57-58页 |
| ·16S rDNA文库插入片段验证 | 第58-59页 |
| ·ARDRA分析 | 第59页 |
| ·两种文库的各指数比较 | 第59-60页 |
| ·16S rDNA非培养法文库的克隆子测序及系统发育进化树构建 | 第60-63页 |
| 第四节 讨论 | 第63-64页 |
| 第五章 高温大曲不同部位的微生物群落结构的PCR-SSCP分析 | 第64-72页 |
| 第一节 前言 | 第64页 |
| 第二节 材料和方法 | 第64-66页 |
| ·材料 | 第64-65页 |
| ·实验方法 | 第65-66页 |
| 第三节 实验结果 | 第66-70页 |
| ·大曲不同部位的PCR扩增 | 第67页 |
| ·SSCP电泳优化 | 第67-68页 |
| ·PCR-SSCP结果 | 第68-70页 |
| ·高温大曲的微生物群落结构PCR-SSCP分析 | 第70页 |
| 第四节 讨论 | 第70-72页 |
| 第六章 结论 | 第72-74页 |
| 1 高温大曲宏基因组文库的构建 | 第72页 |
| 2 高温大曲宏基因组文库中产纤维素酶基因片段的筛选 | 第72页 |
| 3 高温大曲宏基因组文库产纤维素酶基因的亚克隆 | 第72页 |
| 4 高温大曲微生物菌群结构的ARDRA分析 | 第72-73页 |
| 5 高温大曲不同部位的微生物群落结构的PCR-SSCP分析 | 第73-74页 |
| 附录 | 第74-114页 |
| 参考文献 | 第114-124页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第124-126页 |
| 致谢 | 第126-128页 |
| 个人简历 | 第128-129页 |
