| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 引言 | 第10-22页 |
| ·立题背景及目的 | 第10-12页 |
| ·本文涉及的三种病原菌简介 | 第12-17页 |
| ·沙门氏菌 | 第12-14页 |
| ·金黄色葡萄球菌 | 第14-16页 |
| ·小肠结肠炎耶尔森氏菌 | 第16-17页 |
| ·食源性致病菌的检测方法 | 第17-21页 |
| ·传统检测方法 | 第17-18页 |
| ·快速的检测方法 | 第18-21页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-32页 |
| ·试验材料 | 第22-24页 |
| ·试验菌株 | 第22页 |
| ·仪器与设备 | 第22-23页 |
| ·主要培养基 | 第23页 |
| ·样品与生化试剂 | 第23-24页 |
| ·试验方法 | 第24-32页 |
| ·多重PCR 靶基因确定及其引物设计 | 第24页 |
| ·初步建立单重PCR 反应体系 | 第24-25页 |
| ·正交反应体系初步确定多重PCR 的反应体系 | 第25-26页 |
| ·多重PCR 退火温度的优化 | 第26页 |
| ·多重PCR 引物添加量的优化 | 第26页 |
| ·多重PCR Mg～(2+) 浓度的优化 | 第26页 |
| ·多重PCR dNTPs 浓度的优化 | 第26页 |
| ·多重PCR Taq 酶添加量的优化 | 第26页 |
| ·多重PCR 反应特异性试验 | 第26-28页 |
| ·多重PCR 的灵敏度 | 第28页 |
| ·人工污染灭菌奶 | 第28-29页 |
| ·人工污染灭菌奶三种病原菌的目的基因提取方法比较 | 第29-31页 |
| ·人工污染灭菌奶的检出限 | 第31页 |
| ·实际样品检测 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-46页 |
| ·L16（44）正交初步确定反应体系结果 | 第32页 |
| ·多重PCR 反应体系的优化结果 | 第32-36页 |
| ·退火温度的优化结果 | 第32-33页 |
| ·引物添加量的优化结果 | 第33-34页 |
| ·Mg~(2+)（25mmol/L）浓度的优化结果 | 第34页 |
| ·dNTPs（2.5 mmol/L）浓度的优化结果 | 第34-35页 |
| ·Taq 酶添加量的优化结果 | 第35-36页 |
| ·特异性试验结果 | 第36-39页 |
| ·多重 PCR 的灵敏度 | 第39-43页 |
| ·多重PCR 的单重灵敏度 | 第39-42页 |
| ·多重 PCR 同时检测三种病原菌的灵敏度 | 第42-43页 |
| ·人工污染样品中模板 DNA 提取的方法比较 | 第43-44页 |
| ·人工污染样品确定检出限 | 第44页 |
| ·实际样品检测 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-50页 |
| ·多重PCR 反应参数优化 | 第46-50页 |
| ·靶基因的选择及引物的设计 | 第46页 |
| ·退火温度和延伸时间的选择 | 第46-47页 |
| ·引物浓度（10 μmol/L）添加量的选择 | 第47页 |
| ·dNTPs 及Mg～(2+) 添加量的确定 | 第47页 |
| ·Taq DNA 聚合酶添加量的确定 | 第47-48页 |
| ·DNA 模板提取方法的比较 | 第48页 |
| ·多重 PCR 污染问题，原因，注意事项 | 第48-49页 |
| ·基因组检测灵敏度和纯菌检测灵敏度之间的差异 | 第49-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 作者简介 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |