致谢 | 第4-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-16页 |
1.1 冷冻食品 | 第9-10页 |
1.1.1 冷冻食品简介 | 第9页 |
1.1.2 国内外速冻食品的发展 | 第9页 |
1.1.3 冷冻食品中的致病微生物污染 | 第9-10页 |
1.2 冷冻食品中金黄色葡萄球菌 | 第10-11页 |
1.2.1 金黄色葡萄球菌简介 | 第10-11页 |
1.2.2 金黄色葡萄球菌在冷冻食品中的危害 | 第11页 |
1.3 亚致死致病菌 | 第11-12页 |
1.3.1 亚致死致病菌 | 第11页 |
1.3.2 亚致死损伤致病菌的特征和修复 | 第11页 |
1.3.3 冷冻致亚致死损伤金黄色葡萄球菌 | 第11-12页 |
1.4 蛋白质组学相关技术 | 第12-14页 |
1.4.1 蛋白质分离技术 | 第12-13页 |
1.4.1.1 二维凝胶电泳分离技术 | 第12-13页 |
1.4.1.2 基于色谱的分离技术 | 第13页 |
1.4.1.3 高效液相色谱分离技术 | 第13页 |
1.4.2 蛋白质鉴定技术 | 第13-14页 |
1.4.2.1 传统的蛋白质鉴定技术 | 第13页 |
1.4.2.2 基于质谱的蛋白质组学定量技术 | 第13-14页 |
1.4.3 高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)实现蛋白质样品分离与鉴定一体化 | 第14页 |
1.5 比较蛋白质组学在致病微生物中的应用 | 第14页 |
1.6 研究的意义和主要内容 | 第14-16页 |
1.6.1 研究的意义 | 第14-15页 |
1.6.2 研究的主要内容 | 第15-16页 |
第二章 冷冻致亚致死损伤金黄色葡萄球菌修复启动时间及其修复启动过程中生理指标变化 | 第16-25页 |
2.1 前言 | 第16页 |
2.2 材料与方法 | 第16-19页 |
2.2.1 材料与试剂 | 第16-17页 |
2.2.2 仪器设备 | 第17页 |
2.2.3 实验方法 | 第17-19页 |
2.2.3.1 金黄色葡萄球菌的培养及其冷冻处理 | 第17页 |
2.2.3.2 冷冻致亚致死损伤的金黄色葡萄球菌修复规律 | 第17页 |
2.2.3.3 总RNA的提取及msrR、fhuC、cytB基因的转录表达量测定 | 第17-18页 |
2.2.3.4 修复过程中金黄色葡萄球菌细胞内核酸物质泄漏量的测定 | 第18页 |
2.2.3.5 冷冻亚致死修复启动过程中细胞超微结构变化 | 第18页 |
2.2.3.6 活性氧(ROS)测定 | 第18-19页 |
2.2.3.7 超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 | 第19页 |
2.2.3.8 数据分析 | 第19页 |
2.3 结果和讨论 | 第19-23页 |
2.3.1 冷冻致亚致死损伤的金黄色葡萄球菌活性修复规律 | 第19-20页 |
2.3.2 冷冻致亚致死损伤的金黄色葡萄球菌修复过程中ROS含量及SOD活性变化 | 第20-21页 |
2.3.3 冷冻致亚致死损伤的金黄色葡萄球菌修复相关基因msrR、fhuC、cytB相对表达量 | 第21-22页 |
2.3.4 冷冻致亚致死损伤的金黄色葡萄球菌修复过程中细胞超微结构变化 | 第22-23页 |
2.3.5 冷冻致亚致死损伤的金黄色葡萄球菌修复过程中细胞内紫外吸收物质泄漏量的变化 | 第23页 |
2.4 小结 | 第23-25页 |
第三章 采用高效液相色谱-质谱联用技术比较研究冷冻致亚致死金黄色葡萄球菌修复启动过程中的差异蛋白质组 | 第25-40页 |
3.1 前言 | 第25-26页 |
3.2 材料和方法 | 第26-28页 |
3.2.1 主要材料与试剂 | 第26页 |
3.2.2 主要仪器与设备 | 第26-27页 |
3.2.3 实验方法 | 第27-28页 |
3.2.3.1 金黄色葡萄球菌培养及其冷冻处理 | 第27页 |
3.2.3.2 金黄色葡萄球菌亚致死损伤细胞数目测定 | 第27页 |
3.2.3.3 金黄色葡萄球菌细胞总蛋白提取与纯化 | 第27页 |
3.2.3.4 蛋白质肽段HPLC-MS分离与质谱测定 | 第27-28页 |
3.2.3.5 数据搜索,蛋白质鉴定与定量 | 第28页 |
3.3 结果与讨论 | 第28-39页 |
3.3.1 冷冻亚致死金黄色葡萄球菌修复启动过程中蛋白质组差异分析 | 第28-35页 |
3.3.2 冷冻亚致死金黄色葡萄球菌修复启动过程中的表达上调蛋白 | 第35-37页 |
3.3.2.1 细胞膜转运酶活性相关蛋白 | 第35-36页 |
3.3.2.2 细胞转录调控相关蛋白 | 第36页 |
3.3.2.3 细胞氧化还原酶活性蛋白 | 第36页 |
3.3.2.4 细胞壁合成相关蛋白 | 第36-37页 |
3.3.2.5 细胞粘着性蛋白 | 第37页 |
3.3.2.6 细胞核糖体结合蛋白 | 第37页 |
3.3.3 冷冻亚致死金黄色葡萄球菌修复启动过程中的表达下调蛋白 | 第37-39页 |
3.3.3.1 细胞转运酶活性蛋白 | 第37-38页 |
3.3.3.2 细胞核酸结合蛋白 | 第38页 |
3.3.3.3 细胞代谢相关的蛋白 | 第38页 |
3.3.3.4 细胞毒力相关蛋白 | 第38-39页 |
3.3.4 差异蛋白质组中各种蛋白质在细胞中的定位 | 第39页 |
3.4 小结 | 第39-40页 |
第四章 结论与展望 | 第40-42页 |
4.1 全文总结 | 第40页 |
4.2 创新点 | 第40-41页 |
4.3 工作展望 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-52页 |
ABSTRACT | 第52-53页 |