摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 绪论 | 第10-20页 |
1.1 课题研究背景及目的意义 | 第10页 |
1.2 乳酸杆菌表面蛋白 | 第10-16页 |
1.2.1 乳酸杆菌表面蛋白的结构及组成 | 第11-13页 |
1.2.2 表面蛋白的分离提纯方法 | 第13-15页 |
1.2.3 表面蛋白的基因克隆反映出的多样性 | 第15-16页 |
1.3 表面蛋白的益生功能 | 第16-18页 |
1.3.1 表面蛋白对致病菌黏附的抑制作用 | 第16-17页 |
1.3.2 表面蛋白对细胞的黏附作用 | 第17页 |
1.3.3 表面蛋白对病毒的抑制作用 | 第17-18页 |
1.3.4 表面蛋白对消化酶的耐受性 | 第18页 |
1.4 国内外文献综述的简析 | 第18-19页 |
1.5 本课题主要研究内容 | 第19页 |
1.6 技术路线 | 第19-20页 |
第2章 材料和方法 | 第20-32页 |
2.1 材料及仪器 | 第20-23页 |
2.1.1 材料与试剂 | 第20-21页 |
2.1.2 实验仪器 | 第21-22页 |
2.1.3 培养基 | 第22-23页 |
2.1.4 菌种和细胞 | 第23页 |
2.2 乳酸杆菌特性 | 第23页 |
2.2.1 菌落计数 | 第23页 |
2.2.2 制片观察 | 第23页 |
2.3 不同条件下乳酸杆菌表面蛋白的表达研究 | 第23-26页 |
2.3.1 培养条件对表面蛋白表达量的影响 | 第23-24页 |
2.3.2 SDS-PAGE 电泳测定表面蛋白分子量 | 第24-25页 |
2.3.3 表面蛋白的蛋白质总含量的测定 | 第25页 |
2.3.4 表面蛋白耐受胃肠道环境的研究 | 第25页 |
2.3.5 表面蛋白的纯化 | 第25-26页 |
2.3.6 表面蛋白的鉴定 | 第26页 |
2.4 乳酸杆菌表面蛋白对上皮细胞的黏附作用研究 | 第26-30页 |
2.4.1 表面蛋白的杀菌性 | 第26页 |
2.4.2 HT-29 细胞的复苏 | 第26-27页 |
2.4.3 HT-29 细胞的传代 | 第27页 |
2.4.4 HT-29 细胞的冻存 | 第27页 |
2.4.5 乳酸杆菌表面蛋白的黏附作用 | 第27-28页 |
2.4.6 原子力显微镜分析表面蛋白的黏附作用力 | 第28-29页 |
2.4.7 乳酸杆菌表面蛋白对 S. sonnei 的黏附抑制作用的研究 | 第29-30页 |
2.5 表面蛋白对肠上皮细胞紧密连接蛋白的保护作用研究 | 第30-31页 |
2.5.1 Hoechst 33258 染色 | 第30页 |
2.5.2 免疫荧光组化法分析 ZO-1 和 Occludin 蛋白表达部位的变化 | 第30-31页 |
2.6 数据处理及绘图 | 第31-32页 |
第3章 不同条件下乳酸杆菌表面蛋白的表达研究 | 第32-44页 |
3.1 乳酸杆菌特性 | 第32-33页 |
3.2 不同条件下乳酸杆菌表面蛋白的表达研究 | 第33-36页 |
3.2.1 蛋白质含量的测定 | 第33-34页 |
3.2.2 培养条件对表面蛋白表达量的影响 | 第34-36页 |
3.3 表面蛋白耐受胃肠道环境的研究 | 第36-37页 |
3.4 表面蛋白的纯化 | 第37-40页 |
3.5 表面蛋白的鉴定 | 第40-43页 |
3.6 本章小结 | 第43-44页 |
第4章 乳酸杆菌表面蛋白对上皮细胞的黏附作用研究 | 第44-56页 |
4.1 表面蛋白的杀菌性 | 第44-45页 |
4.2 HT-29 形态 | 第45页 |
4.3 乳酸杆菌表面蛋白对上皮细胞的黏附作用研究 | 第45-51页 |
4.3.1 乳酸杆菌表面蛋白的黏附作用 | 第45-47页 |
4.3.2 原子力显微镜(AFM)分析表面蛋白的黏附作用力 | 第47-51页 |
4.4 乳酸杆菌表面蛋白对 S. sonnei 的黏附抑制作用的研究 | 第51-54页 |
4.4.1 不同浓度 M5-L 表面蛋白抑制 S. sonnei 黏附到上皮细胞的研究 | 第51-52页 |
4.4.2 不同浓度 Q8-L 表面蛋白抑制 S. sonnei 黏附到上皮细胞的研究 | 第52-54页 |
4.5 本章小结 | 第54-56页 |
第5章 表面蛋白对肠上皮细胞紧密连接蛋白的保护作用研究 | 第56-64页 |
5.1 Hoechst 33258 染色 | 第56-58页 |
5.2 免疫荧光组化法分析 ZO-1 和 Occludin 蛋白表达部位的变化 | 第58-62页 |
5.2.1 一抗浓度的选择 | 第58页 |
5.2.2 Occludin 蛋白的表达变化 | 第58-60页 |
5.2.3 ZO-1 蛋白的表达变化 | 第60-62页 |
5.3 本章小结 | 第62-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-73页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第73-75页 |
致谢 | 第75页 |