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乳酸杆菌表面蛋白的黏附性及对肠上皮细胞的保护作用研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第1章 绪论第10-20页
    1.1 课题研究背景及目的意义第10页
    1.2 乳酸杆菌表面蛋白第10-16页
        1.2.1 乳酸杆菌表面蛋白的结构及组成第11-13页
        1.2.2 表面蛋白的分离提纯方法第13-15页
        1.2.3 表面蛋白的基因克隆反映出的多样性第15-16页
    1.3 表面蛋白的益生功能第16-18页
        1.3.1 表面蛋白对致病菌黏附的抑制作用第16-17页
        1.3.2 表面蛋白对细胞的黏附作用第17页
        1.3.3 表面蛋白对病毒的抑制作用第17-18页
        1.3.4 表面蛋白对消化酶的耐受性第18页
    1.4 国内外文献综述的简析第18-19页
    1.5 本课题主要研究内容第19页
    1.6 技术路线第19-20页
第2章 材料和方法第20-32页
    2.1 材料及仪器第20-23页
        2.1.1 材料与试剂第20-21页
        2.1.2 实验仪器第21-22页
        2.1.3 培养基第22-23页
        2.1.4 菌种和细胞第23页
    2.2 乳酸杆菌特性第23页
        2.2.1 菌落计数第23页
        2.2.2 制片观察第23页
    2.3 不同条件下乳酸杆菌表面蛋白的表达研究第23-26页
        2.3.1 培养条件对表面蛋白表达量的影响第23-24页
        2.3.2 SDS-PAGE 电泳测定表面蛋白分子量第24-25页
        2.3.3 表面蛋白的蛋白质总含量的测定第25页
        2.3.4 表面蛋白耐受胃肠道环境的研究第25页
        2.3.5 表面蛋白的纯化第25-26页
        2.3.6 表面蛋白的鉴定第26页
    2.4 乳酸杆菌表面蛋白对上皮细胞的黏附作用研究第26-30页
        2.4.1 表面蛋白的杀菌性第26页
        2.4.2 HT-29 细胞的复苏第26-27页
        2.4.3 HT-29 细胞的传代第27页
        2.4.4 HT-29 细胞的冻存第27页
        2.4.5 乳酸杆菌表面蛋白的黏附作用第27-28页
        2.4.6 原子力显微镜分析表面蛋白的黏附作用力第28-29页
        2.4.7 乳酸杆菌表面蛋白对 S. sonnei 的黏附抑制作用的研究第29-30页
    2.5 表面蛋白对肠上皮细胞紧密连接蛋白的保护作用研究第30-31页
        2.5.1 Hoechst 33258 染色第30页
        2.5.2 免疫荧光组化法分析 ZO-1 和 Occludin 蛋白表达部位的变化第30-31页
    2.6 数据处理及绘图第31-32页
第3章 不同条件下乳酸杆菌表面蛋白的表达研究第32-44页
    3.1 乳酸杆菌特性第32-33页
    3.2 不同条件下乳酸杆菌表面蛋白的表达研究第33-36页
        3.2.1 蛋白质含量的测定第33-34页
        3.2.2 培养条件对表面蛋白表达量的影响第34-36页
    3.3 表面蛋白耐受胃肠道环境的研究第36-37页
    3.4 表面蛋白的纯化第37-40页
    3.5 表面蛋白的鉴定第40-43页
    3.6 本章小结第43-44页
第4章 乳酸杆菌表面蛋白对上皮细胞的黏附作用研究第44-56页
    4.1 表面蛋白的杀菌性第44-45页
    4.2 HT-29 形态第45页
    4.3 乳酸杆菌表面蛋白对上皮细胞的黏附作用研究第45-51页
        4.3.1 乳酸杆菌表面蛋白的黏附作用第45-47页
        4.3.2 原子力显微镜(AFM)分析表面蛋白的黏附作用力第47-51页
    4.4 乳酸杆菌表面蛋白对 S. sonnei 的黏附抑制作用的研究第51-54页
        4.4.1 不同浓度 M5-L 表面蛋白抑制 S. sonnei 黏附到上皮细胞的研究第51-52页
        4.4.2 不同浓度 Q8-L 表面蛋白抑制 S. sonnei 黏附到上皮细胞的研究第52-54页
    4.5 本章小结第54-56页
第5章 表面蛋白对肠上皮细胞紧密连接蛋白的保护作用研究第56-64页
    5.1 Hoechst 33258 染色第56-58页
    5.2 免疫荧光组化法分析 ZO-1 和 Occludin 蛋白表达部位的变化第58-62页
        5.2.1 一抗浓度的选择第58页
        5.2.2 Occludin 蛋白的表达变化第58-60页
        5.2.3 ZO-1 蛋白的表达变化第60-62页
    5.3 本章小结第62-64页
结论第64-65页
参考文献第65-73页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第73-75页
致谢第75页

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