| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 文献综述与立题依据 | 第12-22页 |
| 1.1 立题背景 | 第12-13页 |
| 1.2 Cystatins超家族的概述 | 第13-15页 |
| 1.2.1 Cystatins的发现 | 第13页 |
| 1.2.2 Cystatins超家族的分类 | 第13-14页 |
| 1.2.3 Cystatin的结构 | 第14页 |
| 1.2.4 Cystatin的抑制机制 | 第14-15页 |
| 1.3 Cystatin(家族Ⅱ)的纯化鉴定研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3.1 其他动物来源Cystatin | 第15-16页 |
| 1.3.2 鱼类Cystatin的纯化鉴定研究现状 | 第16-17页 |
| 1.4 Cystatin(家族Ⅱ)的生理活性和功能 | 第17-19页 |
| 1.4.1 Cystatin在免疫调节方面的作用 | 第17-18页 |
| 1.4.2 Cystatin与肿瘤之间的关系 | 第18页 |
| 1.4.3 Cystatin在细胞凋亡中的作用 | 第18-19页 |
| 1.4.4 Cystatin对骨生长的调节 | 第19页 |
| 1.4.5 Cystatins与Cathepsin的关系及在胚胎发育中作用 | 第19页 |
| 1.5 Cystatins的抑菌作用 | 第19-22页 |
| 1.5.1 抑制细菌生长 | 第19-20页 |
| 1.5.2 抑制真菌的生长 | 第20页 |
| 1.5.3 Cystatin的可能抑菌机制 | 第20-21页 |
| 1.5.4 鱼类Cystatin的抑菌作用及在水产品保鲜中的应用 | 第21-22页 |
| 1.6 研究目的意义及主要研究内容 | 第22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-40页 |
| 2.1 材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第22-24页 |
| 2.1.3 主要实验试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.4 培养基的配制 | 第25页 |
| 2.2 方法 | 第25-40页 |
| 2.2.1 鲢鱼卵小分子Cystatins抑制活性测定 | 第25-27页 |
| 2.2.2 蛋白浓度的测定 | 第27页 |
| 2.2.3 鲢鱼卵小分子Cystatins的纯化 | 第27-28页 |
| 2.2.4 鲢鱼卵小分子Cystatins的理化性质鉴定 | 第28-34页 |
| 2.2.5 鲢鱼卵小分子Cystatin-Ⅱ的基本生物学活性特性鉴定 | 第34-35页 |
| 2.2.6 Cystatins对冷藏鲢鱼肉片中优势腐败菌的抑制作用 | 第35-40页 |
| 3. 结果与分析 | 第40-57页 |
| 3.1 荧光标品AMC的标准曲线 | 第40-41页 |
| 3.2 鲢鱼卵小分子Cystatins的Octyl Sepharose 4 Fast Flow层析纯化 | 第41页 |
| 3.3 鲢鱼卵小分子CPIs抑制条带的电泳鉴定方法选择 | 第41-44页 |
| 3.3.1 鲢鱼卵小分子CPIs浓缩粗提液抑制活性测定 | 第41页 |
| 3.3.2 小分子CPIs明胶-底物-SDS-PAGE反相酶谱鉴定CPIs法 | 第41-42页 |
| 3.3.3 小分子CPIs的Native-PAGE反相酶谱电泳鉴定法 | 第42-43页 |
| 3.3.4 小分子CPIs与Papain反应后的SDS-PAGE电泳鉴定 | 第43-44页 |
| 3.4 小分子CPIs的Tricine-SDS-PAGE及抑制条带电泳鉴定 | 第44-46页 |
| 3.4.1 鲢鱼卵小分子CPIs的Tricine-SDS-PAGE | 第44-45页 |
| 3.4.2 鲢鱼卵小分子CPIs抑制条带的电泳鉴定 | 第45-46页 |
| 3.5 电洗脱回收Cystatin-Ⅰ及Cystatin-Ⅲ | 第46-47页 |
| 3.6 鲢鱼卵Cystatins的C18 RP-HPLC分析 | 第47-49页 |
| 3.7 Cystatin-Ⅳ在RP-HPLC上保留时间的变化 | 第49-50页 |
| 3.8 鲢鱼卵Cystatin-Ⅱ热稳定性、pH稳定性及抑制常数测定 | 第50-52页 |
| 3.8.1 Cystatin-Ⅱ热稳定性的测定 | 第50页 |
| 3.8.2 Cystatin-Ⅱ pH稳定性的测定 | 第50-51页 |
| 3.8.3 Cystatin-Ⅱ抑制常数Ki | 第51-52页 |
| 3.9 纯化Cystatin-Ⅱ对4℃冷藏鲢鱼肉片中优势腐败菌的抑制作用 | 第52-57页 |
| 3.9.1 4℃冷藏鲢鱼肉片中优势腐败菌的形态特征 | 第52页 |
| 3.9.2 4℃冷藏鲢鱼肉片中优势腐败菌J-4的初步生化鉴定 | 第52-53页 |
| 3.9.3 16 S rDNA序列分析 | 第53-54页 |
| 3.9.4 纯化Cystatin-Ⅱ对优势腐败菌的抑制作用 | 第54-57页 |
| 4. 讨论 | 第57-63页 |
| 4.1 关于Cystatins三种反相酶谱电泳方法的确定 | 第57-58页 |
| 4.2 关于Trincine-SDS-PAGE在小分子CPIs鉴定中的使用 | 第58页 |
| 4.3 关于鲢鱼卵Cystatins性质鉴定 | 第58-60页 |
| 4.3.1 关于鲢鱼卵Cystatins分子量和纯度 | 第58-59页 |
| 4.3.2 关于鲢鱼卵Cystatin-Ⅱ稳定性及抑制常数Ki | 第59-60页 |
| 4.4 关于鲢鱼卵Cystatin-Ⅳ在Tricine-SDS-PAGE和RP-HPLC上转变现象 | 第60-61页 |
| 4.5 关于4℃冷藏腐败肉中假单胞菌的分离鉴定 | 第61页 |
| 4.6 关于鲢鱼卵Cystatin-Ⅱ抑制假单胞菌生长 | 第61-63页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读硕士期间发表学术论文 | 第73-74页 |
| 附录 | 第74页 |
