| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-14页 |
| 1.1 γ-氨基丁酸概述 | 第7-8页 |
| 1.1.1 GABA的理化性质 | 第7-8页 |
| 1.1.2 GABA的生理功能及应用 | 第8页 |
| 1.2 GABA的制备 | 第8-9页 |
| 1.3 谷氨酸棒杆菌和L-谷氨酸的生物合成 | 第9-12页 |
| 1.3.1 谷氨酸棒杆菌的简介 | 第9-10页 |
| 1.3.2 L-谷氨酸的生物合成 | 第10-12页 |
| 1.4 重组谷氨酸棒杆菌发酵生产GABA的研究现状 | 第12页 |
| 1.5 立题背景与意义 | 第12-13页 |
| 1.6 本论文研究内容 | 第13-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-17页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第14页 |
| 2.1.2 主要引物 | 第14-15页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第15-16页 |
| 2.1.4 主要培养基 | 第16-17页 |
| 2.1.5 实验试剂、工具酶和试剂盒 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-24页 |
| 2.2.1 分子实验操作 | 第17-18页 |
| 2.2.2 重组菌株的构建 | 第18-22页 |
| 2.2.3 谷氨酸棒杆菌SH工程菌的上罐发酵 | 第22页 |
| 2.2.4 发酵过程中OD562、残糖和氨基酸含量测定 | 第22页 |
| 2.2.5 重组菌中PEPC、MDH、GAD的酶活分析 | 第22-23页 |
| 2.2.6 基因转录水平分析 | 第23-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-40页 |
| 3.1 ppc过表达对GABA发酵的影响 | 第24-27页 |
| 3.1.1 ppc过表达质粒和过表达菌株的构建 | 第24-25页 |
| 3.1.2 过表达ppc对菌体生长状况的影响 | 第25页 |
| 3.1.3 过表达ppc对GABA产量的影响 | 第25-26页 |
| 3.1.4 过表达ppc对PEPC和GAD酶活的影响 | 第26-27页 |
| 3.2 mdh敲除对GABA发酵的影响 | 第27-32页 |
| 3.2.1 mdh敲除和回补菌的构建 | 第27-29页 |
| 3.2.2 敲除mdh对菌体生长状况的影响 | 第29-30页 |
| 3.2.3 敲除mdh对GABA产量的影响 | 第30-31页 |
| 3.2.4 敲除mdh对MDH和GAD酶活的影响 | 第31-32页 |
| 3.3 mdh敲除且过表达ppc对GABA发酵的影响 | 第32-34页 |
| 3.3.1 mdh敲除且过表达ppc菌株的构建 | 第32页 |
| 3.3.2 mdh敲除且过表达ppc对菌体生长状况的影响 | 第32-33页 |
| 3.3.3 mdh敲除且过表达ppc对GABA产量的影响 | 第33-34页 |
| 3.3.4 mdh敲除且过表达ppc对MDH、PEPC和GAD酶活的影响 | 第34页 |
| 3.4 染色体上敲入gadB2对GABA发酵的影响 | 第34-40页 |
| 3.4.1 gadB2敲入菌株的构建 | 第34-35页 |
| 3.4.2 gadB2表达菌株的构建 | 第35-36页 |
| 3.4.3 gadB2敲入对菌体生长状况的影响 | 第36-37页 |
| 3.4.4 gadB2敲入对GABA产量的影响 | 第37-40页 |
| 主要结论与展望 | 第40-42页 |
| 主要结论 | 第40页 |
| 展望 | 第40-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47页 |
