摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第1章 文献综述 | 第11-21页 |
1.1 PM_(2.5)及鹰嘴豆芽素A概述 | 第11-17页 |
1.1.1 雾霾 | 第11页 |
1.1.2 PM_(2.5) | 第11-16页 |
1.1.2.1 PM_(2.5)定义 | 第11-12页 |
1.1.2.2 PM_(2.5)成分及危害 | 第12-13页 |
1.1.2.3 PM_(2.5)来源解析 | 第13页 |
1.1.2.4 PM_(2.5)对健康影响 | 第13-15页 |
1.1.2.5 PM_(2.5)对呼吸系统相关疾病的影响 | 第15页 |
1.1.2.6 PM_(2.5)的致肺损伤机制 | 第15-16页 |
1.1.3 鹰嘴豆芽素A | 第16-17页 |
1.1.3.1 鹰嘴豆 | 第16页 |
1.1.3.2 植物黄酮 | 第16页 |
1.1.3.3 鹰嘴豆芽素A | 第16-17页 |
1.2 研究目的及意义 | 第17-18页 |
1.3 本研究主要内容及路线 | 第18-21页 |
第2章 PM_(2.5)暴露模型的建立 | 第21-25页 |
2.1 材料 | 第21-22页 |
2.1.1 实验材料 | 第21页 |
2.1.2 实验仪器设备 | 第21-22页 |
2.1.3 实验试剂 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-25页 |
2.2.1 PM_(2.5)的采样和处理 | 第22页 |
2.2.2 大鼠模型建立 | 第22-23页 |
2.2.2.1 实验动物分组 | 第22-23页 |
2.2.2.2 PM_(2.5)染毒与BCA灌胃处理 | 第23页 |
2.2.3 标本采集及处理 | 第23-25页 |
2.2.3.1 血清(BS)的制备 | 第23页 |
2.2.3.2 肺泡灌洗液(BALF)的提取 | 第23页 |
2.2.3.3 肺组织(LT)的收集 | 第23-25页 |
第3章 生物标志及预防与治疗靶点的筛选 | 第25-53页 |
3.1 材料 | 第25-28页 |
3.1.1 实验材料 | 第25页 |
3.1.2 实验仪器设备 | 第25-26页 |
3.1.3 实验试剂 | 第26-28页 |
3.2 实验方法 | 第28-35页 |
3.2.1 肺组织全蛋白的制备 | 第28-29页 |
3.2.2 蛋白的还原烷基化 | 第29-30页 |
3.2.3 蛋白的酶解、除盐和标记 | 第30页 |
3.2.4 标记肽段的HPLC预分离 | 第30-31页 |
3.2.5 液质联用分析 | 第31-32页 |
3.2.6 蛋白定量信息分析 | 第32-34页 |
3.2.6.1 质谱原始数据格式的转换 | 第32-33页 |
3.2.6.2 定性定量计算 | 第33页 |
3.2.6.3 质谱数据的质量控制 | 第33-34页 |
3.2.6.4 确定差异蛋白的筛选方式(四种模式) | 第34页 |
3.2.7 生物信息分析 | 第34-35页 |
3.2.7.1 GO的注释与功能分析 | 第34页 |
3.2.7.2 KEGG的注释与功能分析 | 第34页 |
3.2.7.3 差异蛋白的显著性富集分析 | 第34-35页 |
3.2.7.4 STRING的注释与功能分析 | 第35页 |
3.2.8 统计方法 | 第35页 |
3.3 结果与讨论 | 第35-51页 |
3.3.1 质谱定性定量结果及质谱数据的质量控制 | 第35-39页 |
3.3.1.1 肽段中氨基酸数目的分布及分析 | 第35-36页 |
3.3.1.2 蛋白的分子量分布 | 第36-37页 |
3.3.1.3 蛋白的覆盖度分布 | 第37页 |
3.3.1.4 蛋白覆盖度与分子量的关系 | 第37页 |
3.3.1.5 蛋白对应肽段数量的分析 | 第37-39页 |
3.3.1.6 质谱仪的质量精度分布 | 第39页 |
3.3.2 蛋白定量结果 | 第39-41页 |
3.3.2.1 蛋白定性定量通量统计 | 第39页 |
3.3.2.2 蛋白定量数据的分布 | 第39-40页 |
3.3.2.3 上下调蛋白的筛选 | 第40-41页 |
3.3.3 差异蛋白生物信息学分析 | 第41-51页 |
3.3.3.1 差异蛋白生物过程及功能分析 | 第44-46页 |
3.3.3.2 差异蛋白互作网络的研究 | 第46-49页 |
3.3.3.3 通路的研究 | 第49-51页 |
3.4 本章小结 | 第51-53页 |
第4章 蛋白免疫印证法验证生物标志 | 第53-63页 |
4.1 材料 | 第53-57页 |
4.1.1 实验材料 | 第53页 |
4.1.2 实验仪器设备 | 第53-54页 |
4.1.3 试剂 | 第54-55页 |
4.1.4 抗体信息 | 第55页 |
4.1.5 常用试剂的配制 | 第55-57页 |
4.2 实验方法 | 第57-60页 |
4.2.1 PM_(2.5)对AEC-II细胞活性的影响 | 第57-58页 |
4.2.1.1 细胞复苏 | 第57页 |
4.2.1.2 细胞传代 | 第57-58页 |
4.2.1.3 细胞培养 | 第58页 |
4.2.1.4 MTT实验 | 第58页 |
4.2.1.5 细胞冻存 | 第58页 |
4.2.2 蛋白表达含量的测定 | 第58-60页 |
4.2.2.1 细胞蛋白的提取 | 第59页 |
4.2.2.2 蛋白浓度测定 | 第59页 |
4.2.2.3 上样 | 第59页 |
4.2.2.4 电泳 | 第59页 |
4.2.2.5 转膜 | 第59页 |
4.2.2.6 免疫反应 | 第59-60页 |
4.2.2.7 显色反应 | 第60页 |
4.2.2.8 压片及图像分析 | 第60页 |
4.2.3 统计学分析 | 第60页 |
4.3 结果与讨论 | 第60-62页 |
4.3.1 PM_(2.5)对人肺AEC-II细胞活性的影响 | 第60-61页 |
4.3.2 生物标志蛋白的Western-blot验证 | 第61-62页 |
4.4 本章小结 | 第62-63页 |
第5章 BCA缓解PM_(2.5)致肺损伤作用 | 第63-73页 |
5.1 材料 | 第63-65页 |
5.1.1 实验材料 | 第63页 |
5.1.2 实验仪器设备 | 第63-64页 |
5.1.3 实验试剂 | 第64-65页 |
5.2 实验方法 | 第65-66页 |
5.2.1 组织病理学检测 | 第65页 |
5.2.2 指标测定 | 第65-66页 |
5.2.2.1 抗氧化酶系统指标测定 | 第65页 |
5.2.2.2 氧化应激指标测定 | 第65-66页 |
5.2.2.3 炎症指标的测定 | 第66页 |
5.2.3 统计方法 | 第66页 |
5.3 结果与讨论 | 第66-72页 |
5.3.1 组织病理学检测 | 第66-67页 |
5.3.2 抗氧化酶系统 | 第67-69页 |
5.3.3 氧化应激系统 | 第69-70页 |
5.3.4 炎症指标 | 第70-72页 |
5.4 本章小结 | 第72-73页 |
第6章 结论与展望 | 第73-75页 |
6.1 结论 | 第73-74页 |
6.2 展望 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-87页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第87-89页 |
附录 | 第89-91页 |
致谢 | 第91-93页 |