| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| CHAPTER 1 INTRODUCTION | 第17-30页 |
| 1.1. GENERAL INTRODUCTION | 第17-19页 |
| 1.2. POTATO TUBER COPOSITION | 第19-20页 |
| 1.3. POTATO PROTEIN | 第20-22页 |
| 1.4. CHEMISTRY AND STRUCTURE OF PATATIN | 第22-23页 |
| 1.5. BIOLOGICAL POTENTIALS OF PATATIN | 第23-25页 |
| 1.5.1. Patatin’s Enzymatic Behaviour | 第23页 |
| 1.5.2. Larvicidal Activities of Patatin | 第23-24页 |
| 1.5.3. Antioxidant potential of Patatin | 第24页 |
| 1.5.4. Anticancer Activities of Patatin | 第24-25页 |
| 1.6. CANCER PREVALENCE | 第25-27页 |
| 1.6.1. Colorectal Cancer | 第25页 |
| 1.6.2. Types of Colorectal cancer | 第25-26页 |
| 1.6.3. Causes of Colorectal cancer | 第26页 |
| 1.6.4. Colorectal Prevention Measures | 第26-27页 |
| 1.6.5. Cell Lines | 第27页 |
| 1.7. USES OF PATATIN IN FOOD INDUSTRY | 第27-28页 |
| 1.8. INDUSTRIAL BY-PRODUCT AS A SOURCE OF POTATO PROTEIN | 第28页 |
| 1.9. PROTEIN MODIFICATION | 第28-30页 |
| 1.9.1. High hydrostatic pressure (HHP) | 第29-30页 |
| CHAPTER 2 PATATIN EXTRACTION, PURIFICATION AND STRUCTURE DETERMINATION | 第30-45页 |
| 2.1. INTRODUCTION | 第31-36页 |
| 2.1.1. Materials and methods | 第31页 |
| 2.1.2. Raw materials and chemical reagents | 第31-32页 |
| 2.1.3. Patatin Extraction and purification | 第32-33页 |
| 2.1.3.1. Extraction of potato fruit juice | 第32页 |
| 2.1.3.2. Ammonium sulfate precipitation | 第32页 |
| 2.1.3.3. Ultrafiltration | 第32页 |
| 2.1.3.4. Purification | 第32-33页 |
| 2.1.4. Protein quantification | 第33页 |
| 2.1.5. Molecular weight SDS-PAGE | 第33页 |
| 2.1.6. Molecular weight distribution by HPSEC | 第33-34页 |
| 2.1.7. LC-MS/MS analysis | 第34页 |
| 2.1.8. Bioinformatics analysis | 第34-35页 |
| 2.1.9. Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) of patatin | 第35页 |
| 2.1.10. Differential scanning calorimetry (DSC) | 第35页 |
| 2.1.11. Circular dichroism (CD) | 第35-36页 |
| 2.2. RESULTS AND DISCUSSION | 第36-43页 |
| 2.2.1. Purified patatin | 第36-37页 |
| 2.2.2. Dialysis | 第37页 |
| 2.2.3. Patatin yield and purity | 第37页 |
| 2.2.4. MW determination by SDS-PAGE and HPSEC | 第37-38页 |
| 2.2.5. Structure elucidation of patatin | 第38-40页 |
| 2.2.6. Sequencing | 第40-42页 |
| 2.2.7. Heat profile | 第42-43页 |
| 2.3. CONCLUSION | 第43-45页 |
| CHAPTER 3 HIGH HYDROSTATIC PRESSURE INDUCED POTATO PATATIN’S STRUCTURAL MODIFICATIONS | 第45-59页 |
| 3.1. INTRODUCTION | 第46-47页 |
| 3.2. MATERIAL AND METHODS | 第47-50页 |
| 3.2.1. Chemicals and Reagents | 第47页 |
| 3.2.2. High-Pressure Treatment of Patatin Samples | 第47页 |
| 3.2.3. Patatin MW Determination | 第47-48页 |
| 3.2.4. Monosaccharide content of patatin | 第48页 |
| 3.2.5. Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) of patatin | 第48页 |
| 3.2.6. Differential scanning calorimetry (DSC) | 第48-49页 |
| 3.2.7. Circular dichroism (CD) | 第49页 |
| 3.2.8. Surface hydrophobicity (Ho) | 第49-50页 |
| 3.2.9. Determination of free sulfhydryl groups | 第50页 |
| 3.2.10. Statistical analysis | 第50页 |
| 3.3. RESULTS AND DISCUSSION | 第50-58页 |
| 3.3.1. Effects of HHP on MW distribution of patatin | 第50-51页 |
| 3.3.2. Monosaccharide content | 第51-52页 |
| 3.3.3. FTIR analysis | 第52-53页 |
| 3.3.4. DSC | 第53-54页 |
| 3.3.5. CD | 第54-55页 |
| 3.3.6. Ho | 第55-57页 |
| 3.3.7. Free-SH | 第57-58页 |
| 3.4. CONCLUSION | 第58-59页 |
| CHAPTER 4 HIGH HYDROSTATIC PRESSURE INDUCED PATATIN AND ITS ANTIOXIDANT AND IRON CHELATING POTENTIAL | 第59-68页 |
| 4.1 INTRODUCTION | 第60-61页 |
| 4.2 MATERIAL AND METHODS | 第61-63页 |
| 4.2.1. Chemicals and reagents | 第61页 |
| 4.2.2. DPPHradicalscavenging activity assay | 第61页 |
| 4.2.3. Oxygenradical absorbance capacity (ORAC) assay | 第61-62页 |
| 4.2.4. Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP) | 第62页 |
| 4.2.5. Ferrous ion-chelating activity | 第62-63页 |
| 4.2.6. Statistical analysis | 第63页 |
| 4.3 RESULTS AND DISCUSSION | 第63-67页 |
| 4.3.1. DPPHradicalscavenging activity | 第63-64页 |
| 4.3.2. ORAC | 第64-65页 |
| 4.3.3. Iron-chelating activity | 第65-66页 |
| 4.3.4. FRAP | 第66-67页 |
| 4.4. CONCLUSION | 第67-68页 |
| CHAPTER 5 HIGH HYDROSTATIC PRESSURE INDUCED POTATO PATATIN APOPTOSIS LIKE CELL DEATH IN HT-29 CEL LINES | 第68-90页 |
| 5.1. INTRODUCTION | 第69-70页 |
| 5.2. METHODOLOGY | 第70-79页 |
| 5.2.1. Cultures and Chemical Reagents | 第70页 |
| 5.2.2. HHP Treatment | 第70-71页 |
| 5.2.3. Cell lines and cultural conditions | 第71页 |
| 5.2.4. Surface Charge (Zeta Potential) | 第71-72页 |
| 5.2.5. MTT cell proliferation assay | 第72-73页 |
| 5.2.6. Acridine Orange/Ethidium Bromide (AO/Et Br) Staining Apoptosis | 第73-74页 |
| 5.2.7. Annexin V-FITC/PI (propidium iodide) assay | 第74-75页 |
| 5.2.8. Cell Cycle Assay | 第75-76页 |
| 5.2.9. DNA ladder assay | 第76-77页 |
| 5.2.9.1. DNA electrophoresis step | 第77页 |
| 5.2.10. Neutral red uptake (NRU) autophagic assay | 第77-78页 |
| 5.2.11. Statistical Analysis | 第78-79页 |
| 5.3. RESULTS AND DISCUSSION | 第79-90页 |
| 5.3.1. Zeta Potential | 第79-80页 |
| 5.3.2. Anti-proliferative activity by MTT assay | 第80-81页 |
| 5.3.3. Annexin V-FITC/PI double staining assay | 第81-82页 |
| 5.3.4. Cell Cycle Assay | 第82-84页 |
| 5.3.5. Acridine Orange and Ethidium Bromide (AO/Et Br) Dual stain | 第84-86页 |
| 5.3.6. Autophagic assay by Neutral Red | 第86-87页 |
| 5.3.7. DNA Laddering | 第87-88页 |
| 5.3.8. Conclusion | 第88-90页 |
| CHAPTER 6 OVERALL CONCLUSION AND RECOMMENDATION | 第90-93页 |
| 6.1. CONCLUSION | 第90-91页 |
| 6.2. RECOMMENDATIONS | 第91-93页 |
| BIBLIOGRAPHY | 第93-105页 |
| ACKNOWLEDGEMENT | 第105-106页 |
| Curriculum Vitae | 第106-107页 |
| PUBLICATIONS | 第107页 |
