| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 縮写词 | 第8-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-35页 |
| ·天然免疫 | 第15-16页 |
| ·天然免疫和获得性免疫 | 第15页 |
| ·病原微生物模式识别受体 | 第15-16页 |
| ·无脊椎动物的天然免疫 | 第16页 |
| ·NF-KB信号通路 | 第16-24页 |
| ·NF--B信号通路的介绍 | 第16-20页 |
| ·果蝇中的NF-KB信号通路 | 第20-22页 |
| ·NF-KB信号通路的进化和保守性 | 第22页 |
| ·线虫TLR／NF-KB信号通路 | 第22-23页 |
| ·研究刺参NF--KB信号通路的意义 | 第23-24页 |
| ·溶菌酶及其在机体免疫中的作用 | 第24-28页 |
| ·溶菌酶的种类 | 第24页 |
| ·水产动物溶菌酶的研究进展 | 第24页 |
| ·水产动物溶菌酶的生物学功能及其作用机理 | 第24-27页 |
| ·水产动物溶菌酶的应用及重组溶菌酶的开发 | 第27-28页 |
| ·NF-KB信号通路对溶菌酶的影响 | 第28页 |
| ·刺参免疫系统的研究 | 第28-32页 |
| ·研究刺参免疫系统的重要性 | 第28-29页 |
| ·以刺参为模型研究天然免疫的优势 | 第29页 |
| ·刺参天然免疫系统的特点 | 第29-32页 |
| ·多糖类物质免疫调节机制的研究现状 | 第32-33页 |
| ·论文的研究意义和主要工作 | 第33-35页 |
| 2 刺参Ah-rel、Aj-p105和Aj-lysozyme基因的克隆与分析 | 第35-66页 |
| ·前言 | 第35页 |
| ·试验材料与设备 | 第35-39页 |
| ·试验动物 | 第35页 |
| ·细胞、菌株及载体 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35-36页 |
| ·主要试剂配制 | 第36-37页 |
| ·主要试验仪器 | 第37-38页 |
| ·试验中用到的引物序列 | 第38-39页 |
| ·试验方法 | 第39-50页 |
| ·RNA提取和cDNA合成 | 第39-41页 |
| ·Aj-rel基因的克隆 | 第41-46页 |
| ·Aj-p105基因的克隆 | 第46-49页 |
| ·Aj-lysozyme基因的克隆 | 第49-50页 |
| ·序列分析 | 第50页 |
| ·试验结果 | 第50-62页 |
| ·刺参Aj-Rel基因的克隆及分析 | 第50-56页 |
| ·刺参Aj-p105基因的克隆及分析 | 第56-62页 |
| ·刺参Aj-lysozyme基因的克隆 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| ·小结 | 第64-66页 |
| 3 刺参Aj-rel和Aj-p105重组蛋白的表达、纯化、抗体制备及相互作用的研究 | 第66-87页 |
| ·前言 | 第66页 |
| ·试验材料 | 第66-71页 |
| ·菌株和质粒 | 第66页 |
| ·主要试剂及配制 | 第66-70页 |
| ·引物设计与合成 | 第70页 |
| ·主要试验仪器 | 第70-71页 |
| ·试验方法 | 第71-76页 |
| ·重组表达质粒pET-32a(+)-rel的构建 | 第71-72页 |
| ·重组表达质粒pET-32a(+)-Aj-p105的构建 | 第72-73页 |
| ·重组蛋白的表达与鉴定 | 第73-74页 |
| ·重组蛋白的纯化与抗体制备 | 第74-75页 |
| ·Western Blot检测Aj-rel和Aj-p105 | 第75页 |
| ·免疫共沉淀检测Aj-rel和Aj-p105的相互作用 | 第75-76页 |
| ·试验结果 | 第76-84页 |
| ·Aj-rel的重组表达、蛋白纯化、抗体制备 | 第76-79页 |
| ·Aj-p105的重组表达、蛋白纯化、抗体制备 | 第79-83页 |
| ·Western B10t检测Aj-rel和Aj-p105 | 第83页 |
| ·Aj-rel和Aj-p105相互作用的研究 | 第83-84页 |
| ·讨论 | 第84-85页 |
| ·小结 | 第85-87页 |
| 4 刺参溶菌酶基因的表达、纯化及抑菌作用的研究 | 第87-107页 |
| ·前言 | 第87页 |
| ·试验材料与设备 | 第87-90页 |
| ·菌株和质粒 | 第87页 |
| ·酶与试剂 | 第87-88页 |
| ·溶液配制 | 第88-89页 |
| ·仪器设备 | 第89页 |
| ·引物设计与合成 | 第89-90页 |
| ·实验方法 | 第90-95页 |
| ·胞外表达质粒pPIC9K-Aj-lys的构建及鉴定 | 第90页 |
| ·Aj-lysozyme转化毕赤酵母细胞及转化子筛选 | 第90-92页 |
| ·Aj-lysozyme在酵母菌株中的表达、分析及表达条件的优化 | 第92-94页 |
| ·重组Aj-lysozyme的纯化 | 第94-95页 |
| ·重组Aj-lysozyme抑菌作用的研究 | 第95页 |
| ·实验结果 | 第95-105页 |
| ·胞外表达质粒的构建及鉴定 | 第95-97页 |
| ·转化毕赤酵母细胞及转化子筛选 | 第97-99页 |
| ·pPIC9K-Aj-lys在酵母菌株中的表达、分析及表达条件的优化 | 第99-102页 |
| ·重组刺参溶菌酶的纯化 | 第102-104页 |
| ·重组刺参溶菌酶抑菌作用的研究 | 第104-105页 |
| ·讨论 | 第105-106页 |
| ·结论 | 第106-107页 |
| 5 LPS刺激对刺参Aj-rel、Aj-p105和Aj-lysozyme表达的影响 | 第107-116页 |
| ·前言 | 第107页 |
| ·试验材料 | 第107-109页 |
| ·主要试剂及配制 | 第107-108页 |
| ·主要仪器 | 第108-109页 |
| ·引物设计与合成 | 第109页 |
| ·试验方法 | 第109-111页 |
| ·刺参的感染与体腔细胞RNA的提取 | 第109页 |
| ·LPS刺激后Aj-rel、Aj-p105和Aj-lysozyme的mRNA表达规律 | 第109-110页 |
| ·LPS刺激后Aj-rel、Aj-p105和Aj-lysozyme的蛋白表达规律 | 第110-111页 |
| ·试验结果 | 第111-113页 |
| ·LPS刺激后Aj-Rel、Aj-p105和Aj-lysozyme的mRNA表达模式 | 第111-112页 |
| ·LPS刺激后Aj-Rel、Aj-p105和Aj-lysozyme的蛋白表达模式 | 第112-113页 |
| ·讨论 | 第113-115页 |
| ·小结 | 第115-116页 |
| 6 结论与展望 | 第116-118页 |
| ·结论 | 第116页 |
| ·展望 | 第116-118页 |
| 创新点摘要 | 第118-119页 |
| 参考文献 | 第119-129页 |
| 附录A Aj-rel系统进化树构建中用到的NF-KB蛋白 | 第129-130页 |
| 附表B Aj-p105系统进化树构建中用到的NF-KB蛋白 | 第130-131页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第131-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
| 作者简介 | 第133-134页 |
