| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-26页 |
| 1.1 研究的目的与意义 | 第14-15页 |
| 1.2 金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的研究 | 第15-18页 |
| 1.2.1 SEB简介 | 第15页 |
| 1.2.2 SEB的结构及理化性质 | 第15-16页 |
| 1.2.3 作用机制及危害 | 第16页 |
| 1.2.4 目前现有的检测手段 | 第16-18页 |
| 1.3 生物条形码(bio-barcode)概述 | 第18-21页 |
| 1.3.1 生物条形码的定义 | 第18页 |
| 1.3.2 生物条形码的检测原理 | 第18-19页 |
| 1.3.3 生物条形码的检测手段 | 第19-21页 |
| 1.4 核酸等温扩增技术 | 第21-24页 |
| 1.4.1 滚环扩增技术(RCA) | 第21-22页 |
| 1.4.2 催化发卡自主装技术(CHA) | 第22-23页 |
| 1.4.3 链置换扩增技术(SDA) | 第23页 |
| 1.4.4 杂交链式反应(HCR) | 第23-24页 |
| 1.5 本文的主要研究内容 | 第24-26页 |
| 第2章 双抗夹心ELISA检测SEB方法的建立及应用 | 第26-34页 |
| 2.1 引言 | 第26页 |
| 2.2 实验仪器与材料 | 第26-27页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第26页 |
| 2.2.2 实验试剂与材料 | 第26-27页 |
| 2.2.3 主要溶液的配制 | 第27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-29页 |
| 2.3.1 实验条件的优化 | 第27-28页 |
| 2.3.2 双抗夹心ELISA方法的建立 | 第28-29页 |
| 2.3.3 标准曲线的绘制 | 第29页 |
| 2.3.4 食品样品的检测及加标回收率 | 第29页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第29-33页 |
| 2.4.1 实验条件的优化 | 第29-31页 |
| 2.4.2 双抗夹心ELISA方法标准曲线的建立 | 第31-32页 |
| 2.4.3 实际样品的检测及加标回收率的测定 | 第32-33页 |
| 2.5 本章小结 | 第33-34页 |
| 第3章 基于免疫PCR生物条形码检测SEB方法的建立及应用 | 第34-52页 |
| 3.1 引言 | 第34-35页 |
| 3.2 实验仪器与试剂 | 第35-37页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第35-36页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第36页 |
| 3.2.3 主要溶液的配制 | 第36页 |
| 3.2.4 寡核苷酸的序列 | 第36-37页 |
| 3.3 实验方法 | 第37-41页 |
| 3.3.1 AuNPs探针的制备 | 第37页 |
| 3.3.2 Mey氏稳定化实验确定羊抗SEB抗体的添加量 | 第37页 |
| 3.3.3 AuNPs探针的修饰 | 第37-38页 |
| 3.3.4 MMPs探针的制备 | 第38-39页 |
| 3.3.5 MMPs上抗SEB单克隆抗体偶联率的测定 | 第39-40页 |
| 3.3.6 双抗夹心生物条形码方法的基本步骤 | 第40-41页 |
| 3.3.7 标准曲线的建立 | 第41页 |
| 3.3.8 实际样品的检测及加标回收率的测定 | 第41页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第41-50页 |
| 3.4.1 AuNPs探针的修饰与表征 | 第41-42页 |
| 3.4.2 羊抗SEB多克隆抗体最优添加量的确定 | 第42-43页 |
| 3.4.3 MMPs抗体偶联率的测定 | 第43-44页 |
| 3.4.4 实验条件的优化 | 第44-47页 |
| 3.4.5 标准曲线的建立 | 第47-48页 |
| 3.4.6 特异性及稳定性实验 | 第48-49页 |
| 3.4.7 实际样品的检测及加标回收率的测定 | 第49-50页 |
| 3.5 本章小结 | 第50-52页 |
| 第4章 基于核酸适配体-杂交链式反应荧光检测牛奶中SEB的方法建立及应用 | 第52-67页 |
| 4.1 引言 | 第52-53页 |
| 4.2 实验仪器与试剂 | 第53-55页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第53-54页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第54页 |
| 4.2.3 主要缓冲溶液的配制 | 第54页 |
| 4.2.4 HCR序列设计 | 第54-55页 |
| 4.3 实验方法 | 第55-57页 |
| 4.3.1 NUPACK序列模拟验证 | 第55-56页 |
| 4.3.2 琼脂糖及非变性聚丙烯酰胺(PAGE)电泳实验 | 第56页 |
| 4.3.3 实验方法的建立 | 第56页 |
| 4.3.4 基于核酸适配体“分子开关”的传统荧光检测方法 | 第56-57页 |
| 4.3.5 牛奶样品中的检测及加标回收率的测定 | 第57页 |
| 4.3.6 数据处理与分析 | 第57页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第57-66页 |
| 4.4.1 NUPACK验证设计序列的合理性 | 第57-58页 |
| 4.4.2 电泳实验的表征 | 第58-60页 |
| 4.4.3 杂交链式反应的动力学模拟 | 第60页 |
| 4.4.4 实验条件的优化 | 第60-63页 |
| 4.4.5 标准曲线的建立 | 第63-65页 |
| 4.4.6 特异性实验结果 | 第65页 |
| 4.4.7 实际样品的检测及加标回收率的测定 | 第65-66页 |
| 4.5 本章小结 | 第66-67页 |
| 第5章 结论 | 第67-69页 |
| 5.1 全文总结 | 第67页 |
| 5.2 展望 | 第67-68页 |
| 5.3 创新点 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 附录 | 第77-82页 |
| 导师简介 | 第82-83页 |
| 作者简介及科研成果 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
