| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-30页 |
| 1.1 蜡样芽孢杆菌的生物学特性 | 第12-13页 |
| 1.1.1 形态特点 | 第13页 |
| 1.1.2 培养特性 | 第13页 |
| 1.2 蜡样芽孢杆菌的危害 | 第13-14页 |
| 1.3 蜡样芽孢杆菌产生毒素的类型 | 第14-16页 |
| 1.3.1 腹泻型毒素 | 第14-16页 |
| 1.3.2 呕吐型毒素 | 第16页 |
| 1.4 蜡样芽孢杆菌在食品及环境中的分布 | 第16-19页 |
| 1.4.1 蜡样芽孢杆菌在食品和环境中的污染情况 | 第16-18页 |
| 1.4.2 蜡样芽孢杆菌毒力基因的分布情况 | 第18-19页 |
| 1.5 食品中蜡样芽孢杆菌的鉴定方法研究 | 第19-22页 |
| 1.5.1 传统生化检测方法 | 第19-21页 |
| 1.5.2 分子鉴定 | 第21-22页 |
| 1.6 蜡样芽孢杆菌的分型方法 | 第22-27页 |
| 1.6.1 表型分型方法 | 第23页 |
| 1.6.2 分子分型 | 第23-27页 |
| 1.7 本课题研究的意义和主要内容 | 第27-30页 |
| 1.7.1 本课题研究的意义 | 第27页 |
| 1.7.2 本课题研究的主要内容 | 第27-28页 |
| 1.7.3 技术路线图 | 第28页 |
| 1.7.4 课题资助 | 第28-30页 |
| 第二章 全国食品中蜡样芽孢杆菌的污染调查和分布规律 | 第30-42页 |
| 2.1 试验材料与仪器 | 第30-31页 |
| 2.1.1 材料 | 第30页 |
| 2.1.2 培养基及试剂 | 第30-31页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第31页 |
| 2.2 调查方案 | 第31-33页 |
| 2.2.1 样品地点的选择 | 第31页 |
| 2.2.2 样品种类 | 第31-32页 |
| 2.2.3 样品采集方法 | 第32-33页 |
| 2.3 检测方法 | 第33-35页 |
| 2.3.1 检测流程 | 第33页 |
| 2.3.2 操作步骤 | 第33-35页 |
| 2.4 结果与分析 | 第35-39页 |
| 2.4.1 总体污染情况 | 第35页 |
| 2.4.2 不同食品的污染情况 | 第35-36页 |
| 2.4.3 不同城市的Bc检出情况 | 第36-37页 |
| 2.4.4 不同采样场所Bc的污染情况 | 第37-38页 |
| 2.4.5 蜡样芽孢杆菌在样品中的污染水平分布情况 | 第38页 |
| 2.4.6 定性与定量方法比较 | 第38-39页 |
| 2.5 讨论 | 第39-42页 |
| 第三章 广东省分离菌株的部分毒力基因鉴定 | 第42-54页 |
| 3.1 试验材料与仪器 | 第42-45页 |
| 3.1.1 材料 | 第42页 |
| 3.1.2 试剂 | 第42-43页 |
| 3.1.3 菌株 | 第43-45页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第45页 |
| 3.1.5 溶液配制 | 第45页 |
| 3.2 试验方法 | 第45-46页 |
| 3.2.1 溶血活性的检测 | 第45页 |
| 3.2.2 模板DNA的制备 | 第45-46页 |
| 3.2.3 毒力相关基因的检测 | 第46页 |
| 3.4 结果 | 第46-52页 |
| 3.4.1 血平板溶血结果 | 第46页 |
| 3.4.2 毒力相关基因PCR产物电泳检测结果 | 第46-47页 |
| 3.4.3 毒力相关基因在分离株中分布情况 | 第47-51页 |
| 3.4.4 Bc和Bt分离株中各毒力相关基因的分布情况 | 第51页 |
| 3.4.5 Bc和Bt分离株根据毒力基因检出情况组成的不同型别 | 第51-52页 |
| 3.5 讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 蜡样芽孢杆菌ERIC-PCR分子分型反应体系的建立及优化 | 第54-66页 |
| 4.1 试验材料与仪器 | 第54-55页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第54页 |
| 4.1.2 菌株 | 第54-55页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第55页 |
| 4.2 试验方法 | 第55-57页 |
| 4.2.1 模版DNA的制备 | 第55页 |
| 4.2.2 ERIC-PCR单因素试验设计与PCR扩增 | 第55页 |
| 4.2.3 退火温度的优化 | 第55-56页 |
| 4.2.4 ERIC-PCR正交实验设计 | 第56页 |
| 4.2.5 优化体系的稳定性验证 | 第56-57页 |
| 4.3 结果与分析 | 第57-64页 |
| 4.3.1 单因素试验结果 | 第57-60页 |
| 4.3.2 退火温度对ERIC-PCR扩增的影响 | 第60-61页 |
| 4.3.3 ERIC-PCR反应体系的正交试验优化 | 第61-64页 |
| 4.4 讨论 | 第64-66页 |
| 第五章 蜡状芽孢杆菌ERIC-PCR分子分型方法初步应用 | 第66-72页 |
| 5.1 试验材料与仪器 | 第66-67页 |
| 5.1.1 材料与试剂 | 第66页 |
| 5.1.2 菌株 | 第66-67页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第67页 |
| 5.2 试验方法 | 第67-68页 |
| 5.2.1 模板DNA的制备 | 第67页 |
| 5.2.2 ERIC-PCR反应体系与PCR扩增程序 | 第67-68页 |
| 5.2.3 Bc分离菌株ERIC-PCR指纹图谱构建与分析 | 第68页 |
| 5.3 结果分析 | 第68-71页 |
| 5.4 讨论 | 第71-72页 |
| 第六章 结论与展望 | 第72-76页 |
| 6.1 本研究得出的主要结论和创新点 | 第72-74页 |
| 6.1.1 主要结论 | 第72-73页 |
| 6.1.2 创新点 | 第73-74页 |
| 6.2 展望 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-86页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第86-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
