摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第9-20页 |
1.1 过氧化氢酶简介 | 第9-12页 |
1.1.1 过氧化氢酶的分类 | 第9-10页 |
1.1.2 产过氧化氢酶的微生物 | 第10-11页 |
1.1.3 过氧化氢酶应用 | 第11-12页 |
1.2 过氧化氢酶的研究概况 | 第12-15页 |
1.2.1 过氧化氢酶研究进展 | 第12-13页 |
1.2.2 嗜高温酶的概况 | 第13-15页 |
1.3 过氧化氢酶的分离纯化 | 第15-18页 |
1.4 论文选题依据及研究意义 | 第18页 |
1.5 论文主要研究内容及创新点 | 第18-20页 |
1.5.1 论文主要研究内容 | 第18-19页 |
1.5.2 论文主要创新点及特色 | 第19-20页 |
第二章 产酶菌株的筛选与鉴定 | 第20-27页 |
2.1 前言 | 第20页 |
2.2 材料 | 第20-22页 |
2.2.1 实验材料 | 第20页 |
2.2.2 培养基 | 第20-21页 |
2.2.3 仪器和试剂 | 第21-22页 |
2.2.3.1 主要仪器 | 第21页 |
2.2.3.2 主要试剂 | 第21-22页 |
2.3 方法 | 第22-23页 |
2.3.1 产过氧化氢酶菌株的筛选方法 | 第22页 |
2.3.1.1 初筛 | 第22页 |
2.3.1.2 复筛 | 第22页 |
2.3.2 菌种鉴定 | 第22-23页 |
2.3.2.1 形态学特征 | 第22页 |
2.3.2.2 16S rRNA基因序列扩增与系统发育树的构建 | 第22-23页 |
2.3.3 粗酶液的制备 | 第23页 |
2.3.4 酶活测定 | 第23页 |
2.4 结果与分析 | 第23-25页 |
2.4.1 过氧化氢酶高产菌株的筛选 | 第23-24页 |
2.4.2 菌株鉴定 | 第24-25页 |
2.4.2.1 形态学观察 | 第24页 |
2.4.2.2 16S rRNA基因序列及系统发育树分析 | 第24-25页 |
2.5 本章小结与讨论 | 第25-27页 |
第三章 过氧化氢酶发酵条件优化 | 第27-38页 |
3.1 前言 | 第27页 |
3.2 材料 | 第27-28页 |
3.2.1 菌株 | 第27页 |
3.2.2 培养基 | 第27-28页 |
3.2.3 仪器与试剂 | 第28页 |
3.2.3.1 主要仪器 | 第28页 |
3.2.3.2 主要试剂 | 第28页 |
3.3 方法 | 第28-29页 |
3.3.1 氮源优化 | 第28页 |
3.3.2 碳源优化 | 第28-29页 |
3.3.3 无机盐优化 | 第29页 |
3.3.4 正交试验 | 第29页 |
3.3.5 培养条件优化 | 第29页 |
3.3.6 酶活测定 | 第29页 |
3.3.7 菌体浓度的测定 | 第29页 |
3.4 结果分析 | 第29-36页 |
3.4.1 氮源优化 | 第29-30页 |
3.4.2 碳源优化 | 第30-31页 |
3.4.3 无机盐优化 | 第31页 |
3.4.4 正交试验 | 第31-33页 |
3.4.5 发酵培养条件优化 | 第33-36页 |
3.4.5.1 发酵温度对菌体FZSF03产酶的影响 | 第33页 |
3.4.5.2 初始pH对菌体FZSF03产酶的影响 | 第33-34页 |
3.4.5.3 接种量对菌体FZSF03产酶的影响 | 第34-35页 |
3.4.5.4 装液量对菌株FZSF03产酶的影响 | 第35页 |
3.4.5.5 菌株FZSF03的生长曲线及产酶曲线 | 第35-36页 |
3.5 本章小结与讨论 | 第36-38页 |
第四章 过氧化氢酶的分离纯化及酶学性质研究 | 第38-51页 |
4.1 前言 | 第38页 |
4.2 材料 | 第38-40页 |
4.2.1 试剂 | 第38页 |
4.2.2 仪器 | 第38-39页 |
4.2.3 常用缓冲液及试剂配制 | 第39-40页 |
4.3 方法 | 第40-43页 |
4.3.1 过氧化氢酶的分离纯化 | 第40-42页 |
4.3.1.1 粗酶液制备 | 第40页 |
4.3.1.2 DEAE-Sepharose~(TM) Fast Flow弱阴离子交换柱层析 | 第40-41页 |
4.3.1.3 Sephadex G-150凝胶柱层析 | 第41页 |
4.3.1.4 疏水层析 | 第41-42页 |
4.3.2 蛋白质含量测定 | 第42页 |
4.3.3 质谱鉴定 | 第42-43页 |
4.3.4 酶学性质研究 | 第43页 |
4.3.4.1 温度对酶催化活性稳定性的影响 | 第43页 |
4.3.4.2 pH对酶催化活性稳定性的影响 | 第43页 |
4.3.4.3 K_m值及V_(max)测定 | 第43页 |
4.4 结果与分析 | 第43-49页 |
4.4.1 过氧化氢酶的分离纯化 | 第43-45页 |
4.4.2 质谱鉴定 | 第45-46页 |
4.4.3 CAT酶学性质研究 | 第46-49页 |
4.4.3.1 温度对CAT活性的影响 | 第46-47页 |
4.4.3.2 pH对CAT活性的影响 | 第47-48页 |
4.4.3.3 动力学参数K_m及V_(max)的测定 | 第48-49页 |
4.5 本章小结与讨论 | 第49-51页 |
结论与展望 | 第51-53页 |
结论 | 第51-52页 |
展望 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
附录1 | 第60-61页 |
附录2 | 第61-63页 |
附录3 | 第63-65页 |
个人简历 | 第65页 |