| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| ·乳糖酶简介 | 第10-11页 |
| ·不同来源乳糖酶的酶学性质差异 | 第11-14页 |
| ·细菌来源的乳糖酶 | 第12-13页 |
| ·霉菌来源的乳糖酶 | 第13页 |
| ·酵母来源的乳糖酶 | 第13-14页 |
| ·乳糖酶的国内外研究现状及进展 | 第14页 |
| ·乳糖酶的应用现状 | 第14-18页 |
| ·乳糖酶在食品工业的应用 | 第14-15页 |
| ·乳糖酶在环境保护中的应用 | 第15-17页 |
| ·乳糖酶在医药工业和分析方面的应用 | 第17-18页 |
| ·低温酶的研究进展及在生物技术方面的应用前景 | 第18-19页 |
| ·微生物研究的价值 | 第19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 产冷活性β-半乳糖苷酶菌株的分离、筛选及鉴定 | 第20-33页 |
| ·材料与方法 | 第20-23页 |
| ·样品与菌株 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·主要实验仪器 | 第21页 |
| ·主要溶液的配制 | 第21-23页 |
| ·实验方法 | 第23-26页 |
| ·菌种的筛选及纯化 | 第23页 |
| ·乳糖酶活力测定 | 第23-24页 |
| ·本实验所用到的分子生物学方法 | 第24-25页 |
| ·菌株的鉴定 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-32页 |
| ·高β-半乳糖苷酶酶活的低温菌株的分离和筛选 | 第26页 |
| ·菌种鉴定 | 第26-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 菌株 Serratia proteamaculans sp.L3 生长及其乳糖酶最佳产酶条件的研究 | 第33-43页 |
| ·实验材料 | 第33-35页 |
| ·菌株 | 第33页 |
| ·实验试剂 | 第33页 |
| ·实验仪器 | 第33-34页 |
| ·主要溶液的配制 | 第34页 |
| ·培养基的配制 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-37页 |
| ·菌株 Serratia proteamaculans sp.L3 生长量的测定 | 第35页 |
| ·菌株 Serratia proteamaculans sp.L3 生长及产酶的最佳条件研究 | 第35-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-41页 |
| ·菌株 Serratia proteamaculans sp.L3 生长曲线的测定 | 第37页 |
| ·不同碳源对菌株 Serratia proteamaculans sp.L3 生长和产酶性能的影响 | 第37-38页 |
| ·氮源对菌株 Serratia proteamaculans sp.L3 生长和产酶性能的影响 | 第38-39页 |
| ·金属离子对菌株 Serratia proteamaculans sp.L3 生长和产酶性能的影响 | 第39页 |
| ·温度对菌株 Serratia proteamaculans sp.L3 生长的影响 | 第39-40页 |
| ·pH 对菌株 Serratia proteamaculans sp.L3 生长的影响 | 第40-41页 |
| ·NaCl 浓度对菌株 Serratia proteamaculans sp.L3 生长的影响 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 菌株L3 产酶条件的优化 | 第43-55页 |
| ·Plackett-Burman 实验 | 第44-46页 |
| ·Plackett-Burman 实验设计原理 | 第44-45页 |
| ·Plackett-Burman 实验设计结果与分析 | 第45-46页 |
| ·响应面法优化 | 第46-53页 |
| ·中心组合设计原理 | 第46-47页 |
| ·响应面法优化实验设计与结果分析 | 第47-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 低温菌L3 乳糖酶的特性研究 | 第55-61页 |
| ·材料与方法 | 第55-56页 |
| ·粗酶液的制备 | 第55页 |
| ·酶活力的测定 | 第55-56页 |
| ·酶的最适反应pH 值 | 第56页 |
| ·酶的pH 稳定性 | 第56页 |
| ·酶的最适反应温度 | 第56页 |
| ·酶的热稳定性 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-59页 |
| ·酶活性的定位 | 第56-57页 |
| ·温度对乳糖酶活性的影响 | 第57页 |
| ·乳糖酶的热稳定性 | 第57-58页 |
| ·pH 值对乳糖酶活性的影响 | 第58-59页 |
| ·乳糖酶pH 稳定性 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 第六章 β-半乳糖苷酶基因组文库的构建及筛选 | 第61-69页 |
| ·材料与方法 | 第61-65页 |
| ·菌株 | 第61页 |
| ·质粒 | 第61页 |
| ·培养基 | 第61页 |
| ·酶和试剂 | 第61-62页 |
| ·菌株 Serratia proteamaculans sp.L3 基因组 DNA 的提取 | 第62页 |
| ·pUC19 质粒提取，限制酶酶切反应、转化 | 第62页 |
| ·酶切产物的回收按照 EZNA Gel Extraction kit 试剂盒说明书进行纯化 | 第62页 |
| ·克隆载体去磷酸化 | 第62-63页 |
| ·Klenow 大片段酶末端半补齐反应 | 第63页 |
| ·含有插入片段基因的重做质粒的构建 | 第63-64页 |
| ·质粒P△LacZ 的构建 | 第64页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第64-65页 |
| ·测序与序列分析 | 第65页 |
| ·技术路线 | 第65-66页 |
| ·结果与分析 | 第66-68页 |
| ·菌株L3 基因组DNA 的提取和不完全酶切 | 第66页 |
| ·质粒P△LacZ 构建结果 | 第66-67页 |
| ·载体的制备 | 第67页 |
| ·连接、转化以及转化子的检验 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-69页 |
| 总结 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 已发表论文 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
