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桃果实蛋白质S-亚硝基化作用及SPR检测亚硝基硫醇方法的研究

符号说明第1-5页
目录第5-9页
中文摘要第9-10页
ABSTRACT第10-11页
1 引言第11-29页
   ·一氧化氮第11-13页
     ·一氧化氮活性分子第11页
     ·NO 产生途径第11-12页
     ·NO 的生物学作用第12-13页
   ·蛋白质 S-亚硝基化修饰第13-21页
     ·S-亚硝基化修饰概念第13-14页
     ·S-亚硝基化的反应过程第14-16页
       ·直接亚硝基化作用第14-15页
       ·转亚硝基化作用第15-16页
     ·S-亚硝基化修饰的特异性第16-17页
     ·蛋白质 S-亚硝基化的生理意义第17-18页
     ·蛋白质 S-亚硝基化的检测方法第18-21页
       ·传统检测方法第18-19页
       ·经典生物素标记检测(Biotin Switch Method)第19-20页
       ·新型检测方法第20-21页
   ·表面等离子体共振技术(SPR)第21-28页
     ·SPR 发展概述第21-22页
     ·SPR 的基本原理第22-23页
     ·SPR 传感器组成第23页
     ·SPR 传感器芯片第23-24页
     ·SPR 传感器特点第24-25页
     ·SPR 传感器应用第25-26页
       ·SPR 在生命科学中的应用第25-26页
       ·SPR 在医药研发中的应用第26页
     ·傅立叶变换表面等离子共振技术(FT-SPR)第26-28页
   ·论文研究内容及意义第28-29页
2 材料方法第29-38页
   ·仪器和试剂第29-30页
     ·实验仪器第29页
     ·实验试剂第29-30页
   ·溶液制备第30-32页
     ·样品处理第30页
     ·溶液配制第30-32页
     ·仪器参数设置第32页
   ·实验方法第32-38页
     ·山梨醇脱氢酶 S-亚硝基化研究第32-34页
       ·山梨醇脱氢酶的提取及活性测定第32-33页
       ·SDH 蛋白质浓度的测定第33页
       ·亚硝基谷胱甘肽(GSNO)的合成及纯度检测第33-34页
       ·GSNO 处理前后 SDH 亚硝基化修饰分析第34页
       ·GSNO 处理前后 SDH 活性变化分析第34页
       ·FT-SPR 检测 BSA 亚硝基化修饰第34-38页
       ·金片的洗涤第34页
       ·金片的衍生第34-35页
       ·金片的厚度变化分析第35页
       ·衍生金片对特定蛋白 BSA 的检测第35-38页
         ·缓冲溶液的选择第35-36页
         ·pH 对巯基烷酸与亲和素结合的影响第36页
         ·离子强度对分子间相互作用的影响第36页
         ·亲和素浓度对结合的影响第36页
         ·生物素(Biotin)与牛血清白蛋白(BSA)动力学反应检测第36-37页
         ·生物传感器对不同浓度 BSA 底物检测线性曲线第37页
         ·BSA 亚硝基化反应前后 SPR 信号变化检测第37-38页
3 结果与讨论第38-51页
   ·亚硝基化修饰对 SDH 活性的影响第38-43页
     ·桃果实提取 SDH 活性变化规律第38-39页
     ·SDH 亚硝基化现象检测第39-40页
     ·GSNO 处理 SDH 后活性的变化第40-41页
     ·SDH 亚硝基化作用位点的确定第41-42页
     ·GSNO/GSH 体系调节 SDH 活性模型第42-43页
   ·FT-SPR 检测蛋白质亚硝基化修饰第43-51页
     ·亚硝基化谷胱甘肽(GSNO)合成与表征第43-44页
     ·自组装分子生物层(SAM)的建立第44-45页
     ·pH 对亲和素-生物素结合金表面的影响第45-47页
     ·离子强度对亲和素固定的影响第47-48页
     ·温度对生物传感器与底物相互作用的影响第48-49页
     ·物传感器对不同浓度 BSA 底物检测线性曲线第49-50页
     ·未封闭、封闭 BSA 的 SPR 响应信号第50-51页
4 结论第51页
本论文的创新点第51-52页
参考文献第52-57页
致谢第57-58页
攻读硕士期间发表的论文第58页

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