| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 缩略语 | 第10-15页 |
| 第1章 前言 | 第15-38页 |
| 1.1 桔霉素免疫分析技术研究进展 | 第15-21页 |
| 1.1.1 桔霉素概述 | 第15-17页 |
| 1.1.2 桔霉素免疫分析技术 | 第17-20页 |
| 1.1.3 桔霉素免疫分析的发展趋势 | 第20-21页 |
| 1.2 绿色免疫分析技术研究进展 | 第21-36页 |
| 1.2.1 绿色免疫分析概述 | 第21-22页 |
| 1.2.2 噬菌体随机多肽展示技术 | 第22-23页 |
| 1.2.3 噬菌体随机多肽展示技术在抗原表位模拟中的应用 | 第23-24页 |
| 1.2.4 抗独特型抗体 | 第24-28页 |
| 1.2.5 纳米抗体 | 第28-35页 |
| 1.2.6 抗独特型纳米抗体 | 第35-36页 |
| 1.3 主要研究内容和意义 | 第36-38页 |
| 1.3.1 研究内容 | 第36页 |
| 1.3.2 研究意义 | 第36-38页 |
| 第2章 抗独特型纳米抗体替代抗原的绿色免疫分析研究 | 第38-70页 |
| 2.1 材料、仪器与试剂 | 第38-41页 |
| 2.1.1 主要材料 | 第38页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第38-39页 |
| 2.1.3 主要溶液和培养基 | 第39-41页 |
| 2.2 方法与步骤 | 第41-49页 |
| 2.2.1 羊驼天然纳米抗体基因文库噬菌粒的救援与滴度测定 | 第41页 |
| 2.2.2 抗独特型纳米抗体的淘选与鉴定 | 第41-43页 |
| 2.2.3 桔霉素Phage-ELISA(P-EILSA)的建立 | 第43-44页 |
| 2.2.4 桔霉素P-ELISA的验证 | 第44页 |
| 2.2.5 抗独特型纳米抗体的表达与纯化 | 第44-47页 |
| 2.2.6 抗独特型纳米抗体替代CIT包被抗原V-ELISA的建立 | 第47页 |
| 2.2.7 V-ELISA在实际样品检测的应用 | 第47-48页 |
| 2.2.8 抗独特型纳米抗体及CIT抗原与单克隆抗体 4G6的亲和力 | 第48-49页 |
| 2.3 结果与分析 | 第49-66页 |
| 2.3.1 抗独特型纳米抗体的亲和淘选 | 第49页 |
| 2.3.2 阳性克隆的鉴定 | 第49-50页 |
| 2.3.3 桔霉素phage-EISA(P-ELISA)的建立 | 第50-57页 |
| 2.3.4 抗独特型纳米抗体的表达和纯化 | 第57-59页 |
| 2.3.5 抗独特型纳米抗体替代包被抗原ELISA（V-ELISA）的建立 | 第59-65页 |
| 2.3.6 亲和力分析 | 第65-66页 |
| 2.4 讨论 | 第66-69页 |
| 2.4.1 抗独特型纳米抗体的制备 | 第66页 |
| 2.4.2 纳米抗体的原核表达 | 第66-67页 |
| 2.4.3 基于抗独特型纳米抗体的CIT免疫分析方法 | 第67-68页 |
| 2.4.4 抗独特型纳米抗体在小分子半抗原模拟研究中的优势 | 第68-69页 |
| 2.5 小结 | 第69-70页 |
| 第3章 抗独特型纳米抗体替代CIT标准物的绿色无毒免疫分析研究 | 第70-97页 |
| 3.1 材料、仪器和试剂 | 第70-71页 |
| 3.1.1 主要材料与试剂 | 第70页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第70页 |
| 3.1.3 主要溶液和培养基 | 第70-71页 |
| 3.1.4 PCR引物 | 第71页 |
| 3.2 方法与步骤 | 第71-78页 |
| 3.2.1 骆驼天然纳米抗体文库的构建 | 第71-76页 |
| 3.2.2 抗独特型纳米抗体的淘选与鉴定 | 第76页 |
| 3.2.3 抗独特型纳米抗体的表达纯化 | 第76-77页 |
| 3.2.4 抗独特型纳米抗体的验证 | 第77页 |
| 3.2.5 抗独特型纳米抗体与CIT单抗结合动力学分析 | 第77页 |
| 3.2.6 抗独特型纳米抗体的热稳定性 | 第77页 |
| 3.2.7 CIT无毒ELISA的建立 | 第77-78页 |
| 3.2.8 实际样品检测的应用 | 第78页 |
| 3.3 结果与分析 | 第78-92页 |
| 3.3.1 骆驼天然纳米抗体文库的构建及鉴定 | 第78-81页 |
| 3.3.2 抗独特型纳米抗体的亲和淘选 | 第81-82页 |
| 3.3.3 阳性克隆的鉴定 | 第82-84页 |
| 3.3.4 阳性克隆P-ELISA检测CIT竞争标准曲线的建立 | 第84页 |
| 3.3.5 抗独特型纳米抗体的性质鉴定 | 第84-86页 |
| 3.3.6 抗独特型纳米抗体与CIT单抗亲和力的分析 | 第86-88页 |
| 3.3.7 抗独特型纳米抗体C1的热稳定性 | 第88页 |
| 3.3.8 CIT无毒绿色免疫分析方法的建立 | 第88-91页 |
| 3.3.9 方法在实际样品检测的应用 | 第91-92页 |
| 3.4 讨论 | 第92-96页 |
| 3.4.1 纳米抗体基因文库的构建 | 第92-93页 |
| 3.4.2 抗独特型纳米抗体的应用 | 第93-94页 |
| 3.4.3 抗原抗体亲和力与竞争免疫分析方法灵敏度的关系 | 第94页 |
| 3.4.4 纳米抗体亲和力的改造 | 第94-96页 |
| 3.5 小结 | 第96-97页 |
| 第4章 结论与展望 | 第97-100页 |
| 4.1 结论 | 第97-98页 |
| 4.2 展望 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-112页 |
| 附录A 氨基酸基本信息表 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 攻读博士学位期间的研究成果 | 第114页 |
