| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| 1.1 番茄红素的概述 | 第9-12页 |
| 1.1.1 番茄红素的结构 | 第9页 |
| 1.1.2 番茄红素的理化性质 | 第9-10页 |
| 1.1.3 番茄红素的生理功能 | 第10-12页 |
| 1.2 番茄红素的制备方法 | 第12-13页 |
| 1.2.1 化学合成法 | 第12页 |
| 1.2.2 天然提取法 | 第12-13页 |
| 1.2.3 微生物制备法 | 第13页 |
| 1.3 番茄红素的生物合成途径 | 第13-14页 |
| 1.4 微生物在番茄红素生物合成中的应用 | 第14-15页 |
| 1.4.1 大肠杆菌合成番茄红素 | 第14-15页 |
| 1.4.2 谷氨酸棒状杆菌合成番茄红素 | 第15页 |
| 1.5 代谢途径多模块的调节提高番茄红素产量 | 第15-16页 |
| 1.6 番茄红素前体物质的平衡代谢 | 第16页 |
| 1.7 系统模型分析提高番茄红素产量 | 第16-17页 |
| 1.8 微生物产番茄红素的研究近况 | 第17页 |
| 1.9 本课题研究背景,内容及研究意义 | 第17-19页 |
| 1.9.1 研究背景 | 第17页 |
| 1.9.2 研究内容及意义 | 第17-19页 |
| 2 材料和方法 | 第19-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第19页 |
| 2.1.2 试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第20-22页 |
| 2.1.4 培养基 | 第22页 |
| 2.1.5 主要溶液 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-34页 |
| 2.2.1 菌株活化与保藏 | 第23页 |
| 2.2.2 菌体浓度与浓度干重曲线的测定 | 第23-24页 |
| 2.2.3 番茄红素的提取与检测 | 第24页 |
| 2.2.4 DNS法检测发酵液中糖浓度 | 第24-25页 |
| 2.2.5 E.coli K12f-pACLYC重组菌总RNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.6 E.coli K12f-pACLYC重组菌转录组测序及基因表达模式分析 | 第26-27页 |
| 2.2.7 E.coli K12f-pACLYC重组菌产番茄红素代谢通路关键基因Quantitativereal-time PCR验证 | 第27-28页 |
| 2.2.8 谷氨酸棒状杆菌感受态的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.9 含有pEC-XK99E-crtBI和pEC-XK99E-crtEBI重组谷氨酸棒状杆菌的构建 | 第29-34页 |
| 3 结果与讨论 | 第34-50页 |
| 3.1 不同碳源对E.coli K12f-pACLYC重组大肠杆菌生长及产番茄红素的影响 | 第34-35页 |
| 3.2 E.coli K12f-pACLYC利用果糖和葡糖糖产番茄红素的对比 | 第35页 |
| 3.3 E.coli K12f-pACLYC重组菌总RNA的提取,cDNA文库的质量控制及测序数据产出 | 第35-37页 |
| 3.3.1 E.coli K12f-pACLYC重组菌总RNA的提取 | 第35-36页 |
| 3.3.2 cDNA文库的的质量测定及测序数据产出结果 | 第36-37页 |
| 3.4 E.coli K12f-pACLYC重组菌转录组测序全局分析 | 第37-40页 |
| 3.4.1 T02相对T01的GO富集分析 | 第37-39页 |
| 3.4.2 T02相对T01差异表达基因的COG数据库注释分析 | 第39页 |
| 3.4.3 T02相对T01差异表达基因KEGG数据库注释分析 | 第39-40页 |
| 3.4.4 E.coli K12f-pACLYC重组菌转录组测序全局分析 | 第40页 |
| 3.5 E.coli K12f-pACLYC重组菌产番茄红素相关代谢通路差异基因表达模式分析 | 第40-44页 |
| 3.5.1 碳源转运和糖酵解途径差异基因表达模式分析 | 第40-42页 |
| 3.5.2 三羧酸(TCA)循环差异基因表达模式分析 | 第42-44页 |
| 3.5.3 氧化磷酸化途径差异基因表达模式分析 | 第44页 |
| 3.6 E.coli K12f-pACLYC重组菌产番茄红素代谢通路基因的Quantitative real-timePCR验证 | 第44-45页 |
| 3.7 产番茄红素谷氨酸棒状杆菌的构建 | 第45-50页 |
| 3.7.1 谷氨酸棒状杆菌产番茄红素途径KEGG分析 | 第45-46页 |
| 3.7.2 构建含有crtB,crtI基因的pEC-XK99E重组表达载体 | 第46-47页 |
| 3.7.3 含pEC-XK99E-crtBI表达载体谷氨酸棒状杆重组菌番茄红素检测及分析 | 第47-48页 |
| 3.7.4 构建含有crtE,crtB,crtI基因的pEC-XK99E重组表达载体 | 第48-49页 |
| 3.7.5 产番茄红素谷氨酸棒状杆菌重组菌的产量分析 | 第49-50页 |
| 4 结论 | 第50-51页 |
| 5 展望 | 第51-52页 |
| 6 参考文献 | 第52-59页 |
| 7 攻读硕士期间发表的论文情况 | 第59-60页 |
| 8 致谢 | 第60页 |
