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L-阿拉伯糖异构酶的克隆表达及酶学性质研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
1 前言第8-18页
   ·稀少糖第8-9页
   ·D-塔格糖第9-12页
     ·D-塔格糖来源及其理化性质第9页
     ·D-塔格糖的生理学功能第9-10页
     ·D-塔格糖的生产方法第10-12页
   ·L-阿拉伯糖异构酶第12-16页
     ·L-阿拉伯糖异构酶的结构第13页
     ·L-阿拉伯糖异构酶的微生物来源第13页
     ·L-阿拉伯糖异构酶与D-塔格糖的生产第13-16页
   ·本课题的研究目的及意义第16-17页
     ·稀少糖的市场前景第16页
     ·嗜热L-AI的研究价值第16-17页
   ·论文研究的主要内容第17-18页
2 材料与方法第18-33页
   ·实验材料与仪器第18-20页
     ·环境样品第18页
     ·菌种及载体第18-19页
     ·试剂药品第19-20页
     ·主要仪器设备第20页
   ·实验方法第20-33页
     ·培养基的选择及制备第20-22页
     ·菌种的分离和保藏第22页
     ·产D-塔格糖菌株的初步筛选第22页
     ·L-AI酶活检测第22-23页
     ·L-AI保守序列扩增第23-24页
     ·产D-塔格糖菌株的形态及生理生化特性鉴定第24-25页
     ·产D-塔格糖菌株16S rDNA序列测定第25页
     ·产D-塔格糖菌株L-AI保守序列分析第25-28页
     ·产D-塔格糖菌株编码L-AI蛋白基因的克隆第28页
     ·产D-塔格糖菌株编码L-AI蛋白基因的表达、纯化第28-31页
     ·L-AI的酶学性质研究第31-32页
     ·D-半乳糖转化率的测定第32-33页
3 结果与讨论第33-57页
   ·产塔格糖嗜热菌株筛选第33-36页
     ·菌株的初步筛选分离第33-34页
     ·产D-塔格糖菌株的复筛结果第34-36页
   ·No.6菌株的菌种鉴定第36-39页
     ·No.6菌株细胞形态及生理生化特性第36-37页
     ·No.6菌株碳源利用实验第37-38页
     ·菌株16S rDNA的序列测定及系统发育分析第38-39页
   ·No.6菌株保守序列的基因克隆及序列分析第39-41页
   ·No.6菌编码L-AI基因的克隆表达第41-47页
     ·No.6菌L-AI基因的克隆第41-42页
     ·表达载体的构建和鉴定第42-43页
     ·A.flavithermus的L-AI序列登录GenBank第43-44页
     ·AFAI基因同源性比对第44页
     ·AFAI酶的诱导表达第44-45页
     ·AFAI酶活检测第45-46页
     ·产物TLC分析第46-47页
   ·AFAI蛋白纯化及酶学性质研究第47-55页
     ·AFAI蛋白纯化第47页
     ·AFAI酶学性质第47-55页
   ·LAI催化产D-塔格糖条件研究第55-57页
     ·加酶量对转化率的影响第55页
     ·底物浓度对转化率的影响第55-56页
     ·转化时间的确定第56-57页
4 结论第57-58页
   ·产塔格糖嗜热菌株筛选与鉴定第57页
   ·L-AI的克隆以及在大肠杆菌中的表达第57页
   ·L-AI的纯化第57页
   ·L-AI的酶学性质分析第57页
   ·L-AI催化产D-塔格糖条件研究第57-58页
5 展望第58-59页
6 参考文献第59-66页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第66-67页
8 致谢第67页

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