| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-15页 |
| ·过氧化氢酶概述 | 第9-10页 |
| ·过氧化氢酶的来源 | 第9页 |
| ·过氧化氢酶的结构、功能及性质 | 第9-10页 |
| ·过氧化氢酶的应用 | 第10页 |
| ·过氧化氢酶基因工程的研究进展 | 第10-13页 |
| ·CAT 的国内外研究现状 | 第11页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第11-12页 |
| ·发酵过程优化的策略 | 第12-13页 |
| ·立题依据及意义 | 第13页 |
| ·本论文的主要研究内容 | 第13-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-23页 |
| ·菌株与质粒 | 第15页 |
| ·试剂与仪器 | 第15-16页 |
| ·主要试剂 | 第15-16页 |
| ·主要仪器 | 第16页 |
| ·培养基 | 第16页 |
| ·DNA 操作 | 第16-21页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第16-17页 |
| ·PCR 扩增 | 第17页 |
| ·PCR 产物回收 | 第17-18页 |
| ·pET-20b(+)质粒提取 | 第18-19页 |
| ·酶切及柱回收 | 第19页 |
| ·载体连接 | 第19-20页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第20页 |
| ·转化大肠杆菌感受态细胞 | 第20页 |
| ·转化子的筛选与鉴定 | 第20-21页 |
| ·重组大肠杆菌的培养及表达 | 第21页 |
| ·分析方法 | 第21-23页 |
| ·酶液的制备 | 第21页 |
| ·过氧化氢酶活性的测定 | 第21-22页 |
| ·菌体浓度的测定 | 第22页 |
| ·SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第22页 |
| ·甘油的测定 | 第22页 |
| ·质粒稳定性测定 | 第22-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-41页 |
| ·枯草芽孢杆菌CAT 基因在大肠杆菌中的克隆及表达 | 第23-27页 |
| ·重组质粒pET-20b(+)/katA 的构建 | 第23-24页 |
| ·重组E. coli BL21(DE3)（pET-20b(+) | 第24-25页 |
| ·重组E. coli BL21(DE3)（pET-20b(+)/katA）CAT 的分泌表达 | 第25-27页 |
| ·质粒稳定性验证 | 第27页 |
| ·重组E. coli BL21(DE3)（pET-20b(+)/katA）的摇瓶发酵条件优化 | 第27-34页 |
| ·碳源对菌体生长及产酶的影响 | 第27-29页 |
| ·氮源对菌体生长及产酶的影响 | 第29-31页 |
| ·温度对菌体生长及产酶的影响 | 第31-32页 |
| ·初始pH 对菌体生长及产酶的影响 | 第32页 |
| ·正交试验设计进一步优化摇瓶发酵条件 | 第32-34页 |
| ·摇瓶优化后的发酵曲线 | 第34页 |
| ·重组E. coli BL21(DE3)（pET-20b(+)/katA）3 L 发酵罐的发酵优化 | 第34-41页 |
| ·初始甘油浓度对重组菌发酵生产过氧化氢酶的影响 | 第34-36页 |
| ·搅拌转速对重组菌发酵生产过氧化氢酶的影响 | 第36-37页 |
| ·碳源补料对重组菌发酵生产过氧化氢酶的影响 | 第37-41页 |
| 第四章 结论与展望 | 第41-43页 |
| ·结论 | 第41页 |
| ·展望 | 第41-43页 |
| 致谢 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51页 |
