| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-19页 |
| ·环糊精概述 | 第9-10页 |
| ·环糊精的组成与结构 | 第9-10页 |
| ·环糊精的功能与应用 | 第10页 |
| ·环糊精葡萄糖基转移酶（CGT 酶）概述 | 第10-13页 |
| ·CGT 酶的功能及其在工业中的应用 | 第10-11页 |
| ·CGT 酶结构的研究进展 | 第11-12页 |
| ·CGT 酶的催化机理 | 第12-13页 |
| ·CGT 酶产物特异性的研究进展 | 第13-16页 |
| ·产物特异性对环糊精生产的重要意义 | 第13-14页 |
| ·产物特异性的研究现状 | 第14-16页 |
| ·蛋白质晶体学原理与方法 | 第16-18页 |
| ·X 射线晶体学基本原理 | 第16-17页 |
| ·蛋白质晶体学的研究方法 | 第17-18页 |
| ·立题依据及意义 | 第18页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第19-28页 |
| ·菌种和质粒 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·菌体培养方法 | 第19-20页 |
| ·培养基 | 第19-20页 |
| ·种子培养 | 第20页 |
| ·摇瓶发酵 | 第20页 |
| ·分子生物学操作 | 第20-23页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第20页 |
| ·重叠PCR | 第20-21页 |
| ·质粒DNA 的酶切验证 | 第21页 |
| ·DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第21页 |
| ·目的基因与载体的连接 | 第21-22页 |
| ·胶回收目的片段 | 第22页 |
| ·E. coli 化学感受态细胞的制备 | 第22页 |
| ·热激转化 | 第22-23页 |
| ·分析方法 | 第23-26页 |
| ·α-环化活力的测定 | 第23页 |
| ·β-环糊精形成活力的测定 | 第23页 |
| ·γ-环糊精形成活力的测定 | 第23页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测表达产物 | 第23-24页 |
| ·环糊精浓度的测定 | 第24页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第24-25页 |
| ·重组CGT 酶的纯化 | 第25-26页 |
| ·晶体结构解析 | 第26-28页 |
| ·晶体生长与数据收集 | 第26-27页 |
| ·晶体结构解析与分析 | 第27-28页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第28-44页 |
| ·γ-CGT 酶的克隆与表达 | 第28-32页 |
| ·γ-CGT 酶的克隆表达 | 第28-30页 |
| ·重组γ-CGT 酶的胞外表达 | 第30-31页 |
| ·重组γ-CGT 酶的纯化 | 第31-32页 |
| ·亚位点-7 处的突变对γ-CGT 酶产物特异性的影响 | 第32-37页 |
| ·γ-CGT 酶产物特异性位点分析 | 第32-34页 |
| ·突变体的克隆表达 | 第34-35页 |
| ·突变体的最适温度和最适pH | 第35-36页 |
| ·突变体的产物特异性 | 第36-37页 |
| ·γ-CGT 酶晶体的培养及其晶体结构的解析 | 第37-44页 |
| ·γ-CGT 酶晶体的培养 | 第37-39页 |
| ·γ-CGT 酶晶体衍射数据的收集和数据处理 | 第39-40页 |
| ·γ-CGT 酶晶体结构的解析 | 第40页 |
| ·B. clarkii 7364 γ-CGT 酶整体结构 | 第40-41页 |
| ·亚位点-7 处氨基酸对γ-CGT 酶产物特异性影响的作用机理分析 | 第41-44页 |
| 第四章 结论与展望 | 第44-46页 |
| ·结论 | 第44页 |
| ·展望 | 第44-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第53页 |
