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产β-木糖苷酶Enterobacter cloacae LY-62的筛选分离、发酵优化及其木糖苷酶基因的克隆表达

摘要第5-6页
abstract第6-7页
第一章 绪论第11-22页
    1.1 可再生资源半纤维素第11-12页
    1.2 木糖苷酶的研究进展第12-19页
        1.2.1 木聚糖酶解第12页
        1.2.2 木聚糖酶和β-木糖苷酶的分类第12-14页
        1.2.3 β-木糖苷酶的来源第14页
        1.2.4 β-木糖苷酶的酶学性质第14-16页
        1.2.5 β-木糖苷酶的结构特点第16-17页
        1.2.6 β-木糖苷酶的催化机理第17-19页
    1.3 β-木糖苷酶的应用第19-20页
    1.4 课题研究目的和内容第20-22页
第二章 β-木糖苷酶产生菌的分离筛选和种属鉴定第22-42页
    2.1 引言第22页
    2.2 材料第22-24页
        2.2.1 土壤来源第22页
        2.2.2 主要培养基第22-23页
        2.2.3 主要试剂和相关溶液第23-24页
    2.3 实验方法第24-30页
        2.3.1 富集培养及筛选分离第24页
        2.3.2 菌种的复筛第24-25页
        2.3.3 筛选菌株的发酵产酶第25页
        2.3.4 筛选产酶最优菌的产酶积累曲线第25页
        2.3.5 β-木糖苷酶酶活性测定方法第25-26页
        2.3.6 Bradford(G-250)法测定蛋白质浓度第26-27页
        2.3.7 克隆实验第27-29页
        2.3.8 16S rDNA序列分析及构建进化树第29页
        2.3.9 形态观察第29页
        2.3.10 菌株的生理生化鉴定第29-30页
    2.4 结果与讨论第30-41页
        2.4.1 标准曲线的绘制第30-31页
        2.4.2 菌种的分离纯化和产酶优势菌的筛选第31-34页
        2.4.3 16S rDNA克隆及生物进化关系分析第34-37页
        2.4.4 形态学特征第37-39页
        2.4.5 生理生化实验结果第39-41页
    2.5 本章小结第41-42页
第三章 Enterobacter cloacae LY-62 产β-木糖苷酶条件的初步优化第42-52页
    3.1 引言第42-43页
    3.2 材料第43页
    3.3 实验方法第43-45页
        3.3.1 发酵产酶培养第43页
        3.3.2 β-木糖苷酶酶活性测定方法第43页
        3.3.3 Bradford(G-250)法测定蛋白质浓度第43页
        3.3.4 碳源种类和碳源浓度的优化实验第43页
        3.3.5 氮源种类和氮源浓度的优化实验第43-44页
        3.3.6 发酵培养基起始pH的优化实验第44页
        3.3.7 发酵培养温度的优化实验第44页
        3.3.8 优化发酵条件下的产酶积累曲线第44页
        3.3.9 优化发酵条件下的生长曲线测定第44-45页
    3.4 结果与讨论第45-51页
        3.4.1 标准曲线的绘制第45页
        3.4.2 碳源对Enterobacter cloacae LY-62 产β-木糖苷酶的影响第45-46页
        3.4.3 氮源对Enterobacter cloacae LY-62 产酶的影响第46-47页
        3.4.4 培养基起始pH值对Enterobacter cloacae LY-62 产酶的影响第47-48页
        3.4.5 发酵温度对Enterobacter cloacae LY-62 产酶的影响第48-49页
        3.4.6 条件优化后菌株LY-62 的产酶进程和生长曲线第49-51页
    3.5 本章小结第51-52页
第四章 Enterobacter cloacae LY-62 的β-木糖苷酶基因的克隆表达及生物信息学分析第52-78页
    4.1 引言第52页
    4.2 材料第52页
    4.3 实验方法第52-58页
        4.3.1 基因克隆的引物设计及扩增β-木糖苷酶片段第52-54页
        4.3.2 基因的克隆实验第54页
        4.3.3 β-木糖苷酶基因序列分析第54页
        4.3.4 β-木糖苷酶基因序列的生物信息学分析第54-55页
        4.3.5 β-木糖苷酶基因的表达及目的蛋白的纯化第55-56页
        4.3.6 SDS-PAGE电泳第56页
        4.3.7 β-木糖苷酶的酶学性质测定第56-58页
    4.4 结果与讨论第58-75页
        4.4.1 PCR特异扩增β-木糖苷酶基因第58-59页
        4.4.2 菌株LY-62 的β-木糖苷酶基因序列分析第59-60页
        4.4.3 β-木糖苷酶生物信息学分析第60-70页
        4.4.4 β-木糖苷酶基因的表达和目的蛋白的纯化第70-72页
        4.4.5 β-木糖苷酶的的酶学性质第72-75页
    4.5 本章小结第75-78页
结果与展望第78-80页
    1、创新点第78页
    2、主要结论第78-79页
    3、展望第79-80页
参考文献第80-85页
附录第85-91页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第91-92页
致谢第92-93页
附件第93页

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