| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-22页 |
| ·核黄素的理化性质、功能和用途 | 第8-9页 |
| ·核黄素的理化性质 | 第8页 |
| ·核黄素的功能与用途 | 第8-9页 |
| ·核黄素的工业化生产 | 第9页 |
| ·枯草芽孢杆菌核黄素合成途径及其代谢调节机制 | 第9-14页 |
| ·枯草芽孢杆菌简介 | 第9页 |
| ·核黄素的合成途径 | 第9-12页 |
| ·前体物 5-磷酸核酮糖的合成以及代谢调节机制 | 第12-13页 |
| ·产核黄素枯草芽孢杆菌工程菌的研究进展 | 第13-14页 |
| ·基因组重排育种 | 第14-18页 |
| ·基因组重排的技术原理 | 第15页 |
| ·基因组重排育种的优势 | 第15-16页 |
| ·基因组重排技术的应用 | 第16-18页 |
| ·微生物发酵过程优化策略 | 第18-20页 |
| ·统计学方法优化发酵工艺 | 第18-19页 |
| ·间歇补料发酵工艺 | 第19-20页 |
| ·选题背景及研究思路 | 第20-22页 |
| ·选题背景 | 第20页 |
| ·研究内容与技术路线 | 第20-22页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第22-37页 |
| ·实验材料 | 第22-26页 |
| ·菌种和质粒 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·主要溶液 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-37页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌质粒 DNA 的提取 | 第27页 |
| ·PCR | 第27-29页 |
| ·DNA 片段的回收和纯化 | 第29-30页 |
| ·酶切体系 | 第30-31页 |
| ·连接体系 | 第31页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
| ·枯草芽孢杆菌的 Spizizen 转化 | 第31-32页 |
| ·枯草芽孢杆菌基因组 DNA 的提取 | 第32页 |
| ·原生质体融合 | 第32-33页 |
| ·融合子的筛选 | 第33页 |
| ·菌体生长特性的考察 | 第33-34页 |
| ·发酵罐发酵 | 第34页 |
| ·发酵液中核黄素和残糖的测定 | 第34页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第34-35页 |
| ·G6PD 和 6PGD 酶活的测定 | 第35-36页 |
| ·引物的设计和基因测序 | 第36-37页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第37-62页 |
| ·B.subtilis RH33 的代谢工程改造 | 第37-42页 |
| ·基础操作质粒 pCU-SGZ 的构建 | 第37-41页 |
| ·B.subtilis RH33-SGZ 菌株的构建 | 第41-42页 |
| ·菌株 B.subtilis X42 的筛选 | 第42-43页 |
| ·基因组重排 | 第43-46页 |
| ·亲株生长曲线的测定 | 第43-44页 |
| ·融合子的筛选 | 第44-46页 |
| ·稳定性试验 | 第46页 |
| ·主要生化指标的检测 | 第46-51页 |
| ·菌株形态 | 第46-47页 |
| ·生长曲线对比 | 第47-48页 |
| ·发酵液 HPLC 分析 | 第48-49页 |
| ·G6PD 和 6PGD 酶活的检测 | 第49-50页 |
| ·外源突变基因的 RT-PCR 分析 | 第50-51页 |
| ·摇瓶发酵优化 | 第51-58页 |
| ·Plackett-Burman 实验 | 第51-54页 |
| ·中心组合设计及响应面方法 | 第54-57页 |
| ·模型预测与验证试验 | 第57-58页 |
| ·发酵罐发酵 | 第58-62页 |
| ·发酵罐分批发酵 | 第58-59页 |
| ·流加发酵工艺研究 | 第59-62页 |
| 第四章 结论与展望 | 第62-64页 |
| ·实验主要结论 | 第62页 |
| ·展望 | 第62-64页 |
| 附表和附图 | 第64-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |