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多杀菌素高产菌株的选育及发酵工艺的优化

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
第一章 文献综述第9-22页
   ·生物农药与多杀菌素第9页
   ·多杀菌素的理化性质及其生物学特性第9-12页
     ·多杀菌素的分子结构和理化性质第9-11页
     ·多杀菌素杀虫活性与作用机制第11-12页
   ·多杀菌素的国内外研究进展第12-16页
     ·多杀菌素产生菌及其生物学特征第12-13页
     ·多杀菌素的生物合成途径第13-16页
   ·高产菌株的选育第16-18页
     ·常规理化诱变及理性筛选高产菌株第16-17页
     ·通过基因改造提高多杀菌素产量第17-18页
   ·多杀菌素产生菌的发酵生产和调控第18-20页
     ·刺糖多孢菌的发酵生产第18-19页
     ·多杀菌素的发酵调控第19-20页
     ·添加前体物质的调控第20页
   ·本文研究目标和思路第20-22页
第二章 材料与方法第22-31页
   ·实验材料第22-23页
     ·菌种第22页
     ·培养基第22页
     ·多杀菌素的标准品第22页
     ·实验试剂与仪器设备第22-23页
   ·实验方法第23-26页
     ·菌种保藏第23-24页
     ·斜面培养第24页
     ·菌种的纯化第24页
     ·种子培养第24页
     ·摇瓶发酵培养第24页
     ·pH 值的测定第24页
     ·还原糖的测定第24-25页
     ·菌体干重的测定第25页
     ·发酵液样品的提取第25-26页
   ·多杀菌素的 HPLC 法的建立第26-28页
     ·色谱条件第26页
     ·标准品的配制第26页
     ·标准曲线的绘制第26-27页
     ·流动相的选择第27页
     ·提取试剂和比例的选择第27-28页
   ·实验结果与分析第28-30页
     ·流动相的选择第28-29页
     ·提取方法的确定第29-30页
   ·小结第30-31页
第三章 多杀菌素高产菌株的选育第31-42页
   ·引言第31页
   ·筛选脂肪酶高活性菌株的原理第31-32页
   ·材料与方法第32-33页
     ·菌株第32页
     ·培养基第32页
     ·配制溶液第32-33页
     ·培养条件第33页
   ·多杀菌素高产菌株的选育第33-35页
     ·单孢子悬液的制备第33页
     ·抗性筛选剂的最小抑制浓度第33页
     ·UV 诱变筛选甘氨酸抗性突变株第33-34页
     ·亚硝酸钠诱变筛选菜籽油抗性突变株第34页
     ·抗性突变株的筛选流程第34-35页
   ·实验结果与讨论第35-41页
     ·UV 诱变的致死率第35-36页
     ·甘氨酸的最小抑制浓度第36页
     ·S.spinosa UV-32 对亚硝酸钠的耐受性第36-37页
     ·S.spinosa UV-32 的菜籽油最小抑制浓度第37页
     ·诱变后刺糖多孢菌的菌落形态变化第37-38页
     ·高产菌株 S.spinosa 4/26 生化特性的研究第38-39页
     ·快速筛选方法的建立第39-41页
   ·小结第41-42页
第四章 多杀菌素高产菌株分批发酵工艺的优化第42-62页
   ·引言第42页
   ·材料与方法第42页
   ·斜面培养基的筛选第42-44页
   ·种子培养基的确定第44-45页
   ·发酵培养基的优化第45-51页
     ·发酵培养基的初步筛选第46页
     ·初始发酵培养基的确定第46-48页
     ·微量金属元素对多杀菌素合成的影响第48-50页
     ·甲基化试剂对多杀菌素合成的影响第50-51页
   ·培养条件的优化第51-55页
     ·种龄对多杀菌素合成的影响第51页
     ·接种量对多杀菌素合成的影响第51-52页
     ·溶氧对多杀菌素合成的影响第52-53页
     ·摇瓶模拟剪切力对多杀菌素合成的影响第53-54页
     ·初始 pH 对多杀菌素发酵产量的影响第54-55页
   ·前体物质对多杀菌素合成的影响第55-60页
     ·2C、3C 盐、酯、酸对多杀菌素合成的影响第56-57页
     ·氨基酸对多杀菌素合成的影响第57-58页
     ·短链醇对多杀菌素产量的影响第58-60页
   ·小结第60-62页
第五章 杀菌素补料分批发酵罐实验第62-71页
   ·前沿第62页
   ·菌株和培养条件第62页
   ·结果与讨论第62-67页
     ·基础发酵培养基中添加不同油脂对多杀菌素产量的影响第62-63页
     ·混合油脂的配比和添加时间对多杀菌素产量的影响第63-64页
     ·补料对发酵产量的影响第64-66页
     ·补料分批发酵实验第66-67页
   ·刺糖多孢菌补料分批发酵动力学的初步研究第67-69页
     ·动力学模型的构建第67-68页
     ·模型的验证和拟合第68-69页
   ·多杀菌素 5 L 发酵罐实验第69-70页
     ·培养方法第69页
     ·分析方法第69页
     ·发酵过程有关参数的变化第69-70页
   ·小结第70-71页
第六章 结论与展望第71-73页
   ·结论第71-72页
   ·展望第72-73页
参考文献第73-81页
发表论文和参加科研情况说明第81-82页
致谢第82页

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