| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-24页 |
| ·链霉菌及抗生素生物合成基因简介 | 第11页 |
| ·抗生素生物合成基因簇克隆方法 | 第11-16页 |
| ·阻断突变株互补克隆法 | 第12页 |
| ·鸟枪克隆法 | 第12-13页 |
| ·基因异源表达法 | 第13页 |
| ·由蛋白质分离反推编码 DNA 的反向遗传法 | 第13-14页 |
| ·抗性基因连锁克隆法 | 第14页 |
| ·据同源基因克隆法 | 第14-15页 |
| ·直接测序获得目标抗生素生物合成基因簇法 | 第15-16页 |
| ·直接合成目标生物合成基因簇法 | 第16页 |
| ·聚酮化合物及其组合生物合成简介 | 第16-18页 |
| ·链霉菌遗传转化体系的建立研究 | 第18-21页 |
| ·链霉菌内源质粒 | 第18页 |
| ·链霉菌突变体构建研究 | 第18页 |
| ·外源基因转导至链霉菌的方法 | 第18-21页 |
| ·武夷菌素研究现状 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第22-24页 |
| 第二章 Streptomyces ahygroscopicus var. wuyiensis CK-15 遗传转化体系建立 | 第24-41页 |
| ·材料 | 第24-27页 |
| ·菌株 | 第24页 |
| ·质粒 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·试剂及缓冲液 | 第25-26页 |
| ·仪器 | 第26页 |
| ·实验用引物序列 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-32页 |
| ·内源质粒检测 | 第27页 |
| ·抗生素敏感性检测 | 第27页 |
| ·遗传转化体系探索 | 第27-29页 |
| ·转化子检测方法 | 第29-30页 |
| ·Streptomyces ahygroscopicus var. wuyiensis CK-15 wysB 基因突变体构建 | 第30-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-39页 |
| ·内源质粒检测 | 第32页 |
| ·抗生素敏感性检测 | 第32-33页 |
| ·遗传转化体系探索与建立 | 第33-36页 |
| ·接合转移转化子的检测 | 第36-37页 |
| ·Streptomyces ahygroscopicus var. wuyiensis CK-15 wysB 基因突变体构建 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 武夷菌素生物合成基因簇的克隆 | 第41-52页 |
| ·材料与方法 | 第41-42页 |
| ·菌株、酶及试剂 | 第41页 |
| ·培养基 | 第41-42页 |
| ·仪器 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-46页 |
| ·Streptomyces ahygroscopicus var. wuyiensis CK-15 基因组的制备 | 第42页 |
| ·文库特异性引物的设计 | 第42-46页 |
| ·基因组文库筛选 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-51页 |
| ·Streptomyces ahygroscopicus var.wuyiensis CK-15 基因组的提取 | 第46页 |
| ·文库特异性引物筛选 | 第46-47页 |
| ·基因组文库筛选 | 第47-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| 第四章 武夷菌素生物合成基因簇序列分析 | 第52-65页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·菌株与质粒 | 第52页 |
| ·培养基 | 第52页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·仪器 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-53页 |
| ·3E11、6E11 阳性克隆质粒的 Fosmid 质粒的制备 | 第52-53页 |
| ·Fosmid 文库构建及大规模测序 | 第53页 |
| ·对测序结果进行生物信息学分析 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-63页 |
| ·阳性克隆插入片段测序结果分析 | 第53-54页 |
| ·基因功能推测及分析 | 第54-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 第五章 全文结论与展望 | 第65-66页 |
| ·本研究得到的结论 | 第65页 |
| ·下一步工作展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 作者简历 | 第74页 |
