中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-15页 |
第1章 绪论 | 第15-29页 |
·甘露聚糖及β-甘露聚糖酶的研究概况 | 第15-24页 |
·甘露聚糖酶简介 | 第15页 |
·β-甘露聚糖酶简介 | 第15-17页 |
·β-甘露聚糖酶的结构和作用机制 | 第17-20页 |
·β-甘露聚糖酶的分子生物学研究 | 第20-21页 |
·β-甘露聚糖酶的应用前景 | 第21-23页 |
·魔芋甘露低聚糖的应用 | 第23-24页 |
·研究的目的和意义 | 第24页 |
·研究内容 | 第24-26页 |
参考文献 | 第26-29页 |
第2章 β-甘露聚糖酶产生菌的分离筛选及菌株的初步鉴定 | 第29-45页 |
·材料与方法 | 第29-35页 |
·分离源 | 第29页 |
·主要试剂及仪器 | 第29-30页 |
·培养基 | 第30页 |
·产β-甘露聚糖酶菌株的富集培养和分离筛选 | 第30-31页 |
·菌株酶活力的测定 | 第31-32页 |
·酶学性质筛选 | 第32-33页 |
·β-甘露聚糖酶菌株的初步鉴定 | 第33-35页 |
·实验结果与分析 | 第35-42页 |
·D-甘露糖含量标准曲线的绘制 | 第35-36页 |
·β-甘露聚糖酶菌株产生菌的富集、分离与筛选 | 第36-37页 |
·酶学性质筛选 | 第37-38页 |
·产β-甘露聚糖酶菌株的初步鉴定 | 第38-42页 |
·本章小结 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-45页 |
第3章 β-甘露聚糖酶产生菌CD-3、CD-6发酵条件优化研究 | 第45-60页 |
·材料与方法 | 第45-48页 |
·菌种 | 第45页 |
·主要试剂及仪器 | 第45页 |
·培养基 | 第45-46页 |
·菌株的发酵及酶液的制备 | 第46页 |
·B-甘露聚糖酶活力测定 | 第46页 |
·菌株发酵产酶条件的优化 | 第46-48页 |
·结果与分析 | 第48-58页 |
·最佳碳源及其单因子分析 | 第48-50页 |
·最佳氮源及其单因子分析 | 第50-51页 |
·添加其他金属离子及表面活性剂对菌株发酵产酶的影响 | 第51页 |
·不同初始PH对菌株产酶的影响 | 第51-53页 |
·接种量对菌株产酶的影响 | 第53-54页 |
·装液量对菌株产酶的影响 | 第54页 |
·不同发酵温度、发酵时间对菌株产酶的影响 | 第54-56页 |
·正交实验优化产酶条件 | 第56-58页 |
·本章小结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-60页 |
第4章 六株芽孢杆菌属来源的β-甘露聚糖酶基因克隆与其氨基酸序 | 第60-79页 |
·实验材料 | 第60-61页 |
·菌株来源 | 第60页 |
·主要仪器和设备 | 第60-61页 |
·主要的生化和分子生物学试剂 | 第61页 |
·实验方法 | 第61-65页 |
·菌株的液体发酵 | 第61页 |
·细菌总DNA的提取(CTAB法) | 第61-62页 |
·PCR扩增β-甘露聚糖酶基因 | 第62-64页 |
·PCR产物与T载体的连接转化 | 第64页 |
·试剂盒提取重组质粒 | 第64-65页 |
·重组质粒的测序及序列分析 | 第65页 |
·结果分析 | 第65-76页 |
·基因组DNA的提取 | 第65页 |
·β-甘露聚糖酶基因及序列分析 | 第65-69页 |
·β-甘露聚糖酶氨基酸序列对比分析 | 第69-72页 |
·蛋白结构的分析及同源模建 | 第72-76页 |
·本章小结 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-79页 |
第5章 酶学特性及动力学研究 | 第79-94页 |
·实验材料 | 第79-80页 |
·菌种 | 第79页 |
·主要试剂及仪器 | 第79-80页 |
·培养基 | 第80页 |
·菌株的发酵及酶液的制备 | 第80页 |
·β-甘露聚糖酶活力测定及定义 | 第80页 |
·实验方法 | 第80-83页 |
·菌株产β-甘露聚糖酶酶学特性 | 第80-81页 |
·酶的底物亲和性及动力学比较研究 | 第81-82页 |
·β-甘露聚糖酶比活力测定 | 第82页 |
·等电点测定 | 第82-83页 |
·结果与分析 | 第83-91页 |
·酶反应的最适温度及温度耐受性 | 第83-85页 |
·酶反应的最适pH与pH耐受性 | 第85-86页 |
·金属离子对酶稳定性的影响 | 第86页 |
·酶的底物亲和性及动力学比较研究 | 第86-89页 |
·比活力的测定 | 第89-90页 |
·等电点的测定 | 第90-91页 |
·讨论 | 第91页 |
·本章小结 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-94页 |
第6章 魔芋低聚糖的酶法制备工艺初步研究 | 第94-105页 |
·实验材料 | 第94-95页 |
·酶液 | 第94页 |
·主要试剂及仪器 | 第94-95页 |
·培养基 | 第95页 |
·实验方法 | 第95-97页 |
·β-甘露聚糖酶酶活测定(DNS法) | 第95页 |
·魔芋精粉粘度的测定 | 第95-96页 |
·魔芋精粉水解产物还原糖浓度的测定 | 第96页 |
·影响还原糖转化率的单因素分析 | 第96-97页 |
·β-甘露聚糖酶酶解产物的薄层层析 | 第97页 |
·结果与分析 | 第97-103页 |
·β-甘露聚糖酶酶活力测定 | 第97页 |
·β-甘露聚糖酶对魔芋精粉粘度的影响 | 第97-98页 |
·影响酶解效率的单因素分析 | 第98-102页 |
·硅胶薄层层析检测酶解产物 | 第102-103页 |
·本章小结 | 第103-104页 |
参考文献 | 第104-105页 |
第7章 研究结果总结及展望 | 第105-111页 |
·研究的主要成果 | 第105-108页 |
·β-甘露聚糖酶产生菌的分离筛选及菌株的初步鉴定 | 第105页 |
·β-甘露聚糖酶产生菌CD-3、CD-6发酵条件的优化 | 第105-106页 |
·六株芽孢杆菌属来源的β-甘露聚糖酶的基因克隆及氨基酸序列分析 | 第106-107页 |
·酶学特性及动力学研究 | 第107-108页 |
·魔芋甘露低聚糖的酶法制备工艺研究 | 第108页 |
·创新 | 第108-109页 |
·后续的研究展望 | 第109-111页 |
附录 | 第111-131页 |
附录1 实验中所使用的常用试剂的配制 | 第111-113页 |
附录2 16S rDNA序列测序结果 | 第113-118页 |
附录3 芽孢杆菌属菌株β-甘露聚糖酶基因序列 | 第118-122页 |
附录4 不同来源的六条β-甘露聚糖酶基因序列同源性比对结果 | 第122-123页 |
附录5 芽孢杆菌属菌株β-甘露聚糖酶氨基酸序列 | 第123-125页 |
附录6 芽孢杆菌属菌株β-甘露聚糖酶氨基酸序列在Genbank中同源性比较结果(BLASTP) | 第125-131页 |
攻读学位期间发表的学术论文和研究成果 | 第131-132页 |
致谢 | 第132页 |