| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第10-15页 |
| 1.1 真菌毒素简介 | 第10页 |
| 1.2 常见真菌毒素 | 第10页 |
| 1.3 真菌毒素检测方法 | 第10-11页 |
| 1.4 玉米赤霉烯酮 | 第11-12页 |
| 1.4.1 玉米赤霉烯酮的基本理化性质 | 第11页 |
| 1.4.2 玉米赤霉烯酮的危害性 | 第11-12页 |
| 1.4.3 玉米赤霉烯酮的脱毒处理 | 第12页 |
| 1.5 本课题的研究现状 | 第12-14页 |
| 1.5.1 玉米赤霉烯酮的研究现状 | 第12-13页 |
| 1.5.2 禾谷镰刀菌的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.6 本论文研究的意义和内容 | 第14-15页 |
| 2 发霉玉米中ZEN的提取 | 第15-31页 |
| 2.1 引言 | 第15-16页 |
| 2.2 材料与设备 | 第16-17页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第17页 |
| 2.3 实验方法 | 第17-20页 |
| 2.3.1 间接竞争酶联免疫方法最适反应条件的选择 | 第17-18页 |
| 2.3.1.1 抗原包被稀释液的选择 | 第17-18页 |
| 2.3.1.2 抗原包被浓度的选择 | 第18页 |
| 2.3.1.3 抗体稀释度的选择 | 第18页 |
| 2.3.1.4 酶标二抗稀释度的选择 | 第18页 |
| 2.3.1.5 正交实验 | 第18页 |
| 2.3.2 ZEN检测间接竞争ELISA方法 | 第18-19页 |
| 2.3.3 超高效液相色谱‐质谱法 | 第19页 |
| 2.3.4 粉碎样品 | 第19页 |
| 2.3.5 粉碎样品颗粒分布的测定 | 第19页 |
| 2.3.6 ZEN的提取 | 第19-20页 |
| 2.3.7 回收率实验 | 第20页 |
| 2.4 结果与分析 | 第20-30页 |
| 2.4.1 单因素实验 | 第20-23页 |
| 2.4.1.1 抗原包被稀释液的选择 | 第20-21页 |
| 2.4.1.2 抗原包被浓度的选择 | 第21页 |
| 2.4.1.3 抗体稀释度的选择 | 第21-23页 |
| 2.4.2 正交实验 | 第23-24页 |
| 2.4.3 颗粒分布与粉碎时间 | 第24-26页 |
| 2.4.4 粉碎时间及提取溶剂对ELISA测定的影响 | 第26-28页 |
| 2.4.5 扫描电镜再次验证 | 第28页 |
| 2.4.6 UPLC-MS | 第28-29页 |
| 2.4.7 添加回收实验 | 第29-30页 |
| 2.5 小结 | 第30-31页 |
| 3 ZEN毒素的产毒菌‐禾谷镰刀菌的研究 | 第31-48页 |
| 3.1 引言 | 第31-32页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第32-33页 |
| 3.2.1 实验材料及试剂 | 第32-33页 |
| 3.2.2 仪器设备 | 第33页 |
| 3.3 实验方法 | 第33-35页 |
| 3.3.1 ZEN的添加回收率及酶联免疫方法的检出限 | 第33页 |
| 3.3.2 菌株活化及液体培养 | 第33-34页 |
| 3.3.3 液体培养基配方筛选 | 第34页 |
| 3.3.3.1 液体培养基配方的单因素试验 | 第34页 |
| 3.3.3.2 液体培养基配方的正交试验 | 第34页 |
| 3.3.4 培养条件的确立 | 第34-35页 |
| 3.3.4.1 产ZEN培养条件的单因素试验 | 第34-35页 |
| 3.3.4.2 响应面法优化生产ZEN的培养条件 | 第35页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第35-47页 |
| 3.4.1 液体培养基中ZEN的添加回收率及酶联免疫方法的检出限 | 第35-36页 |
| 3.4.2 产ZEN培养基配方的单因素试验 | 第36-38页 |
| 3.4.3 产ZEN最佳培养基配方的正交试验及结果 | 第38-40页 |
| 3.4.4 产ZEN培养条件的单因素试验 | 第40-42页 |
| 3.4.5 响应面法优化生产ZEN的培养条件 | 第42-47页 |
| 3.4.5.1 Box-Behnken设计试验 | 第42-43页 |
| 3.4.5.2 模型建立与方差分析 | 第43-45页 |
| 3.4.5.3 响应面分析与条件优化 | 第45-47页 |
| 3.4.6 验证实验 | 第47页 |
| 3.5 本章小结 | 第47-48页 |
| 4 禾谷镰刀菌发酵液中ZEN的提取及纯化研究 | 第48-56页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第48-49页 |
| 4.1.1 实验材料及试剂 | 第48-49页 |
| 4.1.2 仪器设备 | 第49页 |
| 4.2 实验方法 | 第49-51页 |
| 4.2.1 发酵液的培养 | 第49页 |
| 4.2.2 ZEN毒素的提取 | 第49-50页 |
| 4.2.3 ZEN毒素的纯化 | 第50-51页 |
| 4.2.3.1 柱层层析硅胶柱的制备及毒素的纯化 | 第50页 |
| 4.2.3.2 Daisogel反相填料的活化及毒素的纯化 | 第50页 |
| 4.2.3.3 Hopes C18-SPE小柱的活化及毒素的纯化 | 第50-51页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第51-55页 |
| 4.3.1 萃取剂的选择 | 第51页 |
| 4.3.2 柱层层析硅胶柱纯化毒素效果的研究 | 第51-52页 |
| 4.3.3 Daisogel反相层析柱纯化毒素效果的研究 | 第52-53页 |
| 4.3.4 Hopes C18-SPE纯化毒素效果的研究 | 第53页 |
| 4.3.5 三种纯化效果的比较 | 第53-55页 |
| 4.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
