| 致谢 | 第5-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩写简表 | 第12-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-46页 |
| 1.1 辅酶Q_(10)的简介及理化性质 | 第16-17页 |
| 1.1.1 辅酶Q_(10)的简介 | 第16页 |
| 1.1.2 辅酶Q_(10)的理化性质 | 第16-17页 |
| 1.2 辅酶Q_(10)的生理功能 | 第17-18页 |
| 1.2.1 细胞抗氧化功能 | 第17页 |
| 1.2.2 细胞电子传递链的必要组成部分 | 第17-18页 |
| 1.2.3 参与胞内蛋白质二硫键的形成 | 第18页 |
| 1.2.4 控制基因表达 | 第18页 |
| 1.3 辅酶Q_(10)的应用领域 | 第18-19页 |
| 1.3.1 食品及保健品领域 | 第18页 |
| 1.3.2 医药领域 | 第18-19页 |
| 1.3.3 化妆品领域 | 第19页 |
| 1.4 辅酶Q_(10)的生产方法 | 第19-20页 |
| 1.4.1 动植物组织提取法 | 第19页 |
| 1.4.2 化学合成法 | 第19-20页 |
| 1.4.3 生物发酵法 | 第20页 |
| 1.5 构建辅酶Q_(10)高产菌种的研究现状 | 第20-31页 |
| 1.5.1 辅酶Q_(10)的生物合成途径 | 第21-23页 |
| 1.5.2 诱变筛选辅酶Q_(10)高产菌种 | 第23-25页 |
| 1.5.3 利用代谢工程构建辅酶Q_(10)高产菌株 | 第25-31页 |
| 1.6 优化发酵工艺提高辅酶Q_(10)产量 | 第31-35页 |
| 1.6.1 优化培养基和补料工艺提高辅酶Q_(10)产量 | 第31-32页 |
| 1.6.2 优化供氧条件提高辅酶Q_(10)的产量 | 第32-35页 |
| 1.7 类球红细菌生产辅酶Q_(10)的特点 | 第35-38页 |
| 1.7.1 类球红细菌是辅酶Q_(10)的天然生产菌 | 第35-36页 |
| 1.7.2 用于类球红细菌代谢改造的质粒 | 第36页 |
| 1.7.3 辅酶Q_(10)合成和类胡萝卜素合成途径的关系 | 第36-37页 |
| 1.7.4 类球红细菌中色素的光氧调控机制 | 第37-38页 |
| 1.8 代谢工程和合成生物学 | 第38-45页 |
| 1.8.1 代谢工程的简介 | 第38页 |
| 1.8.2 代谢工程的发展及实例 | 第38-41页 |
| 1.8.3 合成生物学的简介 | 第41-45页 |
| 1.9 本课题的研究意义 | 第45-46页 |
| 第二章 通过抑制类胡萝卜素合成提高辅酶Q_(10)产量 | 第46-68页 |
| 2.1 材料 | 第47-51页 |
| 2.1.1 菌种与质粒 | 第47-48页 |
| 2.1.2 引物与试剂 | 第48-50页 |
| 2.1.3 所用仪器 | 第50-51页 |
| 2.2 实验方法 | 第51-61页 |
| 2.2.1 质粒的提取方法 | 第51-52页 |
| 2.2.2 类球红细菌基因组的提取方法 | 第52页 |
| 2.2.3 大肠杆菌感受态的制备 | 第52-53页 |
| 2.2.4 基因的克隆 | 第53-56页 |
| 2.2.5 重组子的鉴定 | 第56-57页 |
| 2.2.6 双亲接合转移 | 第57页 |
| 2.2.7 荧光定量PCR | 第57-59页 |
| 2.2.8 类球红细菌的摇瓶发酵及参数检测 | 第59-61页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第61-67页 |
| 2.3.1 辅酶Q_(10)标准曲线的建立 | 第61-62页 |
| 2.3.2 表达载体的构建及基因的克隆 | 第62-64页 |
| 2.3.3 ppsR的组成型表达 | 第64-66页 |
| 2.3.4 在RspPpsR中过表达crtE对辅酶Q_(10)合成的影响 | 第66-67页 |
| 2.4 本章小结 | 第67-68页 |
| 第三章 协同调控氧化还原电势和摄氧强度提高辅酶Q_(10)的产量 | 第68-90页 |
| 3.1 实验材料 | 第69-72页 |
| 3.1.1 菌种与质粒 | 第69页 |
| 3.1.2 引物与试剂 | 第69-71页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第71-72页 |
| 3.2 实验方法 | 第72-78页 |
| 3.2.1 基因的克隆 | 第72-74页 |
| 3.2.2 重组子的鉴定 | 第74-75页 |
| 3.2.3 荧光定量PCR | 第75-77页 |
| 3.2.4 CO差别光谱分析 | 第77页 |
| 3.2.5 NADH/NAD~+的提取和测定 | 第77-78页 |
| 3.2.6 其它的实验方法 | 第78页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第78-87页 |
| 3.3.1 表达载体的构建和基因克隆 | 第78-80页 |
| 3.3.2 NADH及NAD~+标准曲线的建立 | 第80-81页 |
| 3.3.3 在类球红细菌中过表达gapA-1基因提高辅酶Q_(10)产量 | 第81-83页 |
| 3.3.4 在类球红细菌中过表达vgb基因提高生物量 | 第83页 |
| 3.3.5 通过共表达gapA-1和vgb进一步提高辅酶Q_(10)的产量 | 第83-86页 |
| 3.3.6 考察过表达gapB2和gapB3对辅酶Q_(10)合成的影响 | 第86-87页 |
| 3.4 本章小结 | 第87-90页 |
| 第四章 综合调控氧化还原电势、类胡萝卜素合成和辅酶Q_(10)合成途径 | 第90-102页 |
| 4.1 实验材料 | 第91-93页 |
| 4.1.1 菌种与质粒 | 第91页 |
| 4.1.2 引物与试剂 | 第91-92页 |
| 4.1.3 主要仪器和设备 | 第92-93页 |
| 4.2 实验方法 | 第93-95页 |
| 4.2.1 基因的克隆 | 第93-95页 |
| 4.2.2 重组子的鉴定 | 第95页 |
| 4.2.3 其他实验方法 | 第95页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第95-100页 |
| 4.3.1 综合调控类胡萝卜素合成途径及还原力水平 | 第95-97页 |
| 4.3.2 综合调控类胡萝卜素合成及辅酶Q_(10)合成途径 | 第97-98页 |
| 4.3.3 综合调控氧化还原力及辅酶Q_(10)合成途径 | 第98-100页 |
| 4.4 本章小结 | 第100-102页 |
| 第五章 高密度发酵进一步提高辅酶Q_(10)的产量 | 第102-114页 |
| 5.1 实验材料 | 第104页 |
| 5.1.1 菌种 | 第104页 |
| 5.1.2 试剂及相关材料 | 第104页 |
| 5.1.3 主要仪器和设备 | 第104页 |
| 5.2 实验方法 | 第104-105页 |
| 5.2.1 葡萄糖浓度的检测 | 第104-105页 |
| 5.2.2 高密度发酵实验 | 第105页 |
| 5.2.3 其他试验方法 | 第105页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第105-112页 |
| 5.3.1 供氧对细菌生长及辅酶Q_(10)合成的影响 | 第105-110页 |
| 5.3.2 类球红细菌高密度发酵辅酶Q_(10)合成情况 | 第110-111页 |
| 5.3.3 高密度发酵过程中供氧和细胞生长的分析 | 第111-112页 |
| 5.4 本章小结 | 第112-114页 |
| 第六章 结论与展望 | 第114-118页 |
| 6.1 结论 | 第114-115页 |
| 6.2 展望 | 第115-118页 |
| 参考文献 | 第118-128页 |
| 作者简历 | 第128页 |
