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高产耐高温酸性木聚糖酶工程菌的构建

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
1 前言第9-21页
   ·木聚糖酶简介第9-10页
   ·木聚糖酶的研究现状第10-15页
     ·木聚糖酶活性测定的方法研究第10页
     ·木聚糖酶在自然界中的分布第10-11页
     ·木聚糖酶的性质第11-12页
     ·木聚糖酶的分子结构第12-14页
     ·木聚糖酶的催化机制研究第14-15页
     ·木聚糖酶的发酵生产研究第15页
   ·木聚糖酶的应用现状第15-19页
     ·木聚糖酶在造纸工业中的应用第15-17页
     ·木聚糖酶在饲料行业中的应用第17-18页
     ·木聚糖酶在食品工业中的应用第18页
     ·木聚糖酶在医药工业中的应用第18页
     ·木聚糖酶在可再生能源及其他行业中的应用第18-19页
   ·本研究的目的及意义第19-20页
   ·研究内容与技术路线第20-21页
2 材料与方法第21-38页
   ·实验材料第21-22页
     ·菌种第21页
     ·质粒第21页
     ·引物第21-22页
   ·仪器与试剂第22-25页
     ·仪器第22页
     ·试剂第22-24页
     ·主要溶液第24页
     ·培养基第24-25页
   ·试验方法第25-31页
     ·木聚糖酶的酶活测定第25-26页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测第26-27页
     ·重组木聚糖酶的分离纯化第27页
     ·蛋白浓度的测定第27-29页
     ·重组木聚糖酶的酶学性质研究第29-30页
     ·木聚糖酶的序列分析及蛋白结构的预测第30-31页
   ·产木聚糖酶菌株的筛选、鉴定及产酶发酵条件的研究第31-34页
     ·产木聚糖酶菌株的分离筛选第31页
     ·菌株形态学鉴定第31-32页
     ·菌株16S rDNA的扩增和序列分析第32-34页
   ·响应面法优化产酶菌株的产酶发酵条件第34页
     ·菌株NF1发酵产酶的Plackett-Burman实验第34页
     ·响应面设计第34页
   ·产酶菌株木聚糖酶编码基因的克隆表达第34-35页
     ·产酶菌株木聚糖酶编码基因的获得第34页
     ·目的基因在E.coli中的克隆表达第34-35页
     ·重组木聚糖酶基因的诱导表达第35页
   ·高产木聚糖酶毕赤酵母工程菌的构建第35-36页
     ·毕赤酵母重组载体的构建第35页
     ·毕赤酵母重组载体的转化第35-36页
     ·高产木聚糖酶毕赤酵母工程菌的诱导产酶研究第36页
   ·毕赤酵母工程菌产酶的高密度发酵研究第36-37页
   ·重组木聚糖酶在玉米芯原料低聚木糖生产中的应用第37-38页
     ·重组木聚糖酶XynGH10水解桦木木聚糖底物第37页
     ·重组木聚糖酶XynGH10水解玉米芯生产低聚木糖第37-38页
3 结果与讨论第38-57页
   ·产木聚糖酶菌株的筛选、鉴定及及产酶发酵条件的优化研究第38-46页
     ·产木聚糖酶菌株的分离筛选第38页
     ·产木聚糖酶菌种的鉴定第38-40页
     ·响应面法优化木聚糖酶的发酵条件研究第40-46页
   ·菌株木聚糖酶编码基因的克隆表达第46-48页
     ·木聚糖酶编码基因的PCR扩增第46页
     ·目的基因及其编码蛋白的序列分析与结构预测第46-48页
     ·重组木聚糖酶基因的诱导表达第48页
   ·木聚糖酶的酶学性质研究第48-50页
     ·温度对木聚糖酶XynGH10的酶活的影响第48-49页
     ·pH对木聚糖酶XynGH10的酶活的影响第49-50页
   ·高产木聚糖酶毕赤酵母工程菌的构建第50-53页
     ·毕赤酵母重组载体的构建第50-51页
     ·毕赤酵母重组载体的转化第51-52页
     ·高产木聚糖酶毕赤酵母工程菌的诱导产酶研究第52-53页
   ·毕赤酵母工程菌产酶的高密度发酵研究第53-54页
     ·毕赤酵母工程菌高密度发酵第53页
     ·重组木聚糖酶的基本酶学性质第53-54页
   ·重组木聚糖酶在玉米芯原料低聚木糖生产中的应用第54-57页
     ·重组木聚糖酶XynGH10对桦木木聚糖的降解第55页
     ·重组木聚糖酶XynGH10降解玉米芯生产低聚木糖第55-57页
4 结论第57-58页
5 展望第58-59页
6 参考文献第59-67页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第67-68页
8 致谢第68-69页
附录第69-70页

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