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拟除虫菊酯类噬菌体抗体库的构建和筛选

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
1 前言第8-17页
   ·拟除虫菊酯类农药(pyrethroid)残留检测第8-10页
     ·拟除虫菊酯类农药第8-9页
     ·拟除虫菊酯类农药残留的检测方法第9-10页
   ·基因工程抗体第10-12页
     ·天然抗体的分子结构第10页
     ·抗体的发展第10-11页
     ·基因工程抗体第11页
     ·基因工程抗体的分类第11-12页
   ·噬菌体展示技术第12页
   ·噬菌体抗体库第12-15页
     ·噬菌体抗体库的构建与筛选第13-14页
     ·噬菌体抗体库技术应用现状第14-15页
   ·本研究的目的和意义第15-16页
   ·研究内容第16-17页
2 材料与方法第17-33页
   ·实验材料第17-23页
     ·动物材料第17页
     ·单克隆抗体细胞与菌种第17页
     ·生物试剂第17-19页
     ·实验仪器第19-20页
     ·PCR扩增所用的引物第20-22页
     ·主要试剂的配置方法第22-23页
   ·实验方法第23-33页
     ·RNA提取第23-24页
     ·cDNA第一链的合成第24页
     ·单链抗体基因片段扩增第24-26页
     ·重叠延伸PCR第26-27页
     ·抗体库构建第27-28页
     ·抗体库淘选第28-29页
     ·淘选后噬菌体克隆测序第29-33页
3 实验结果与分析第33-39页
   ·拟除虫菊酯单克隆抗体细胞总RNA的提取第33页
   ·拟除虫菊酯轻链V_L基因和重链V_H基因片段的克隆第33-34页
   ·拟除虫菊酯单抗细胞scFv片段的扩增第34-35页
   ·拟除虫菊酯单抗细胞scFv的双酶切第35页
   ·拟除虫菊酯噬菌体单链抗体库的构建第35-36页
   ·抗体库质量检测第36页
   ·拟除虫菊酯特异性重组抗体的淘选第36-37页
   ·噬菌体抗体库随机获得重组scFv基因PCR验证第37页
   ·单链抗体基因序列获得第37-39页
4 结论第39-40页
5 展望第40-41页
6 参考文献第41-47页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第47-48页
8 致谢第48页

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