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甲基杆菌Methylobacterium sp. XJLW高密度发酵生产PHB和CoQ10及关键酶基因的研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
第一章 文献综述第10-25页
    1.1 引言第10-11页
    1.2 PHB的结构与理化性质第11页
    1.3 PHB的生理功能以及在生产生活中的应用第11-13页
        1.3.1 PHB的生理功能第11-12页
        1.3.2 PHB在生产生活中的应用第12-13页
            1.3.2.1 PHB在环境保护材料领域的应用第12页
            1.3.2.2 PHB在农业领域的应用第12页
            1.3.2.3 PHB在医学领域的应用第12-13页
            1.3.2.4 PHB在食品包装材料领域的应用第13页
            1.3.2.5 PHB在压电制品中的应用第13页
    1.4 PHB的生产方法第13-17页
        1.4.1 微生物产PHB第13-16页
            1.4.1.1 合成PHB的微生物第13-14页
            1.4.1.2 甲醇在甲基杆菌体内的代谢循环图及PHB的合成机制第14-16页
        1.4.2 转基因植物产PHB第16-17页
        1.4.3 活性污泥产PHB第17页
        1.4.4 化学法产PHB第17页
    1.5 PHB的提取方法第17-19页
        1.5.1 有机溶剂法第18页
        1.5.2 次氯酸钠法第18页
        1.5.3 氯仿-次氯酸钠法第18页
        1.5.4 酶法第18页
        1.5.5 机械法第18-19页
    1.6 PHB研究进展第19页
    1.7 研究内容与目的第19-20页
        1.7.1 研究内容第19页
        1.7.2 研究目的第19-20页
    1.8 创新点第20页
    参考文献第20-25页
第二章 Methylobacterium sp. XJLW菌株产PHB摇瓶发酵条件优化第25-44页
    2.1 引言第25页
    2.2 材料第25-29页
        2.2.1 菌株第25页
        2.2.2 培养基第25-26页
        2.2.3 药品与试剂第26-28页
        2.2.4 仪器第28-29页
    2.3 方法第29-32页
        2.3.1 Methylobacterium sp. XJLW生物量的测定第29页
        2.3.2 Methylobacterium sp. XJLW胞内PHB的提取第29-30页
        2.3.3 不同培养基组分及浓度对生物量和PHB产量的影响第30-32页
            2.3.3.1 不同培养基对生物量和PHB产量的影响第30页
            2.3.3.2 不同氮源对生物量和PHB产量的影响第30页
            2.3.3.3 不同硫酸铵浓度对生物量和PHB产量的影响第30页
            2.3.3.4 不同微量元素浓度对生物量和PHB产量的影响第30-31页
            2.3.3.5 添加葡萄糖、叶酸和碳酸钙对生物量和PHB产量的影响第31页
            2.3.3.6 不同醋酸钠浓度对生物量和PHB产量的影响第31页
            2.3.3.7 起始甲醇浓度对生物量和PHB产量的影响第31页
            2.3.3.8 不同接种量对生物量和PHB产量的影响第31-32页
        2.3.4 不同培养条件对生物量和PHB产量的影响第32页
            2.3.4.1 培养温度对生物量和PHB产量的影响第32页
            2.3.4.2 培养基起始pH对生物量和PHB产量的影响第32页
    2.4 结果与讨论第32-42页
        2.4.1 菌体生物量标准曲线第32-33页
        2.4.2 不同培养基对生物量和PHB产量的影响第33-34页
        2.4.3 不同氮源对菌体生物量和PHB产量的影响第34-35页
        2.4.4 不同硫酸铵浓度对菌体生物量和PHB产量的影响第35-36页
        2.4.5 不同微量元素浓度对菌体生物量和PHB产量的影响第36-37页
        2.4.6 添加葡萄糖、叶酸和碳酸钙对菌体生物量和PHB产量的影响第37-38页
        2.4.7 不同醋酸钠浓度对菌体生物量和PHB产量的影响第38-39页
        2.4.8 不同起始甲醇浓度对菌体生物量和PHB产量的影响第39页
        2.4.9 不同接种量对菌体生物量和PHB产量的影响第39-40页
        2.4.10 不同温度对菌体生物量和PHB产量的影响第40-41页
        2.4.11 不同pH对菌体生物量和PHB产量的影响第41-42页
    2.5 本章小结第42页
    参考文献第42-44页
第三章 Methylobacterium sp. XJLW发酵产PHB和CoQ10的补料流加工艺研究第44-58页
    3.1 引言第44页
    3.2 材料与方法第44-48页
        3.2.1 实验材料第44-47页
            3.2.1.1 菌种第44-45页
            3.2.1.2 药品与试剂第45页
            3.2.1.3 仪器第45-46页
            3.2.1.4 培养基第46-47页
        3.2.2 实验方法第47-48页
            3.2.2.1 菌种培养第47页
            3.2.2.2 甲醇浓度的测定第47页
            3.2.2.3 Methylobacterium sp. XJLW生物量的测定第47-48页
            3.2.2.4 产物PHB和CoQ10的分步提取法第48页
    3.3 结果与讨论第48-54页
        3.3.1 甲醇和CoQ10的标准曲线第48-50页
            3.3.1.1 甲醇的标准曲线第48-49页
            3.3.1.2 CoQ10的标准曲线第49-50页
        3.3.2 批次发酵实验第50-51页
        3.3.3 溶氧反馈补料实验第51-54页
    3.4 PHB的鉴定第54-56页
    3.5 本章小结第56-57页
    参考文献第57-58页
第四章 菌体甲基营养代谢关键酶基因克隆第58-68页
    4.1 引言第58页
    4.2 实验材料第58-61页
        4.2.1 菌种第58页
        4.2.2 主要药品第58-59页
        4.2.3 主要仪器第59-60页
        4.2.4 主要试剂和培养基第60页
        4.2.5 生物化学试剂及工具酶第60-61页
    4.3 实验方法第61-63页
        4.3.1 菌株XJLW基因组DNA的提取第61-62页
        4.3.2 Methylobacterium sp.XJLW关键酶基因SHMT引物设计第62页
        4.3.3 Methylobacterium sp.XJLW关键酶基因SHMT的PCR扩增第62页
        4.3.4 电泳检测PCR产物第62-63页
    4.4 实验结果与讨论第63-66页
        4.4.1 基因组DNA的提取及PCR扩增第63-64页
        4.4.2 测序结果第64-66页
    4.5 小结第66页
    参考文献第66-68页
第五章 总结与展望第68-70页
致谢第70-71页
攻读学位期间发表的学术论文目录第71页

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