摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
第一章 前言 | 第13-51页 |
1.1 立题背景及意义 | 第13-14页 |
1.2 生物传感器及DNA生物传感器概述 | 第14-15页 |
1.3 电化学DNA生物传感器 | 第15-17页 |
1.3.1 标记型电化学DNA传感器 | 第15-16页 |
1.3.2 非标记型电化学DNA传感器 | 第16-17页 |
1.4 DNA的固定方法 | 第17-20页 |
1.4.1 探针DNA种类及结构设计 | 第17-18页 |
1.4.2 探针DNA固定方法 | 第18-20页 |
1.5 DNA识别性能调控 | 第20-24页 |
1.5.1 杂交识别调控方式 | 第20-23页 |
1.5.2 纳米修饰传感界面 | 第23-24页 |
1.6 DNA扩增技术 | 第24-28页 |
1.6.1 PCR扩增技术 | 第25页 |
1.6.2 等温扩增技术 | 第25-28页 |
1.7 核酸适体生物传感器 | 第28-34页 |
1.7.1 核酸适体简介及其特点 | 第28-30页 |
1.7.2 电化学核酸适体传感研究策略 | 第30-34页 |
1.8 基于核酸传感研究平台的信号放大策略 | 第34-46页 |
1.8.1 靶标循环策略 | 第34-41页 |
1.8.2 靶标识别信息的后续信号放大策略 | 第41-46页 |
1.9 均相电化学生物传感研究概况 | 第46-49页 |
1.10 课题意义及主要内容 | 第49-51页 |
第二章 基于树枝状纳米金球修饰电极的电化学DNA传感器构筑研究 | 第51-65页 |
2.1 前言 | 第51-52页 |
2.2 实验部分 | 第52-54页 |
2.2.1 试剂 | 第52页 |
2.2.2 仪器 | 第52-53页 |
2.2.3 树枝状纳米金球制备 | 第53页 |
2.2.4 电极表面上己二硫醇固定及纳米金球组装 | 第53页 |
2.2.5 探针DNA固定及杂交 | 第53-54页 |
2.2.6 DNA杂交的电化学检测 | 第54页 |
2.2.7 DNA传感器再生 | 第54页 |
2.2.8 “三明治式”DNA传感电化学检测 | 第54页 |
2.3 结果与讨论 | 第54-64页 |
2.3.1 树枝状纳米金球制备 | 第54-57页 |
2.3.2 基于纳米金球修饰电极构筑DNA生物传感器 | 第57-60页 |
2.3.3 树枝状纳米金球放大效应 | 第60-61页 |
2.3.4 电化学DNA生物传感器检测性能 | 第61页 |
2.3.5 传感器稳定性及再生性能研究 | 第61-63页 |
2.3.6 碱性磷酸酶催化信号放大检测靶标DNA | 第63-64页 |
2.4 小结 | 第64-65页 |
第三章 基于杂交链式反应和DNA金属化放大技术的高灵敏电化学DNA检测研究 | 第65-77页 |
3.1 前言 | 第65页 |
3.2 实验部分 | 第65-67页 |
3.2.1 试剂及仪器 | 第65-66页 |
3.2.2 试验步骤 | 第66-67页 |
3.3 结果与讨论 | 第67-76页 |
3.3.1 实验原理 | 第68-69页 |
3.3.2 传感界面组装过程及实验可行性验证 | 第69-71页 |
3.3.3 实验条件的优化 | 第71-73页 |
3.3.4 杂交链式反应(HCR)信号放大表征 | 第73-74页 |
3.3.5 靶标DNA检测灵敏度 | 第74-75页 |
3.3.6 DNA检测的选择性 | 第75-76页 |
3.4 本章小结 | 第76-77页 |
第四章 基于树枝状DNA杂交体信号放大技术的高灵敏电化学核酸适体生物传感平台用于三磷酸腺苷(ATP)检测研究 | 第77-93页 |
4.1 前沿 | 第77-78页 |
4.2 实验步骤 | 第78-80页 |
4.2.1. 试剂与材料 | 第78页 |
4.2.2 电极表面核酸适体片段1(CP1)固定 | 第78-79页 |
4.2.3 ATP识别和树枝状DNA杂交体组装 | 第79页 |
4.2.4 电化学测试 | 第79页 |
4.2.5 石英晶体微天平测试 | 第79-80页 |
4.3 结果与讨论 | 第80-92页 |
4.3.1 核酸适体传感平台的设计原则 | 第80-81页 |
4.3.2 ATP适体传感器的电化学表征 | 第81-85页 |
4.3.3 树枝状DNA杂交体组装性能优化 | 第85-86页 |
4.3.4 电化学核酸适体传感器的检测灵敏度 | 第86-89页 |
4.3.5 所构筑适体生物传感器的选择性和稳定性研究 | 第89-91页 |
4.3.6 树枝状DNA杂交体信号放大体系的展望与再设计 | 第91-92页 |
4.4 本章小结 | 第92-93页 |
第五章 基于外切酶Ⅲ辅助自催化靶标循环策略的高灵敏电化学凝血酶检测研究 | 第93-105页 |
5.1 前言 | 第93-94页 |
5.2 实验部分 | 第94-95页 |
5.2.1 试剂 | 第94页 |
5.2.2 凝血酶识别 | 第94-95页 |
5.2.3 电化学表征 | 第95页 |
5.2.4 荧光表征 | 第95页 |
5.3 结果与讨论 | 第95-104页 |
5.3.1 凝血酶检测原理 | 第95-97页 |
5.3.2 外切酶Ⅲ辅助自催化凝血酶传感平台 | 第97-99页 |
5.3.3 实验条件优化 | 第99-101页 |
5.3.4 所构筑传感器的检测性能 | 第101-103页 |
5.3.5 凝血酶检测的选择性 | 第103-104页 |
5.4 小结 | 第104-105页 |
第六章 基于聚合酶、切口酶和外切酶级联放大策略的高灵敏电化学DNA3’-磷酸化酶检测研究 | 第105-117页 |
6.1 前言 | 第105-106页 |
6.2 实验部分 | 第106-107页 |
6.2.1 仪器与试剂 | 第106页 |
6.2.2 实验方法 | 第106-107页 |
6.3 结果与讨论 | 第107-116页 |
6.3.1 传感器的设计原理 | 第107-108页 |
6.3.2 DNA 3’端去磷酸化反应监测及可行性验证 | 第108-111页 |
6.3.3 实验条件优化 | 第111-113页 |
6.3.4 lambda外切酶的信号放大性能 | 第113-115页 |
6.3.5 所构筑传感器的检测性能 | 第115-116页 |
6.3.6 构筑传感器的选择性 | 第116页 |
6.4 小结 | 第116-117页 |
结论与展望 | 第117-120页 |
参考文献 | 第120-131页 |
致谢 | 第131-132页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第132-133页 |