致谢 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-13页 |
第一章 引言 | 第13-46页 |
·对虾养殖现状 | 第13-15页 |
·中国明对虾 | 第13-14页 |
·世界对虾养殖概况 | 第14-15页 |
·对虾的主要病害 | 第15-19页 |
·对虾白斑病毒(White spot syndrome virus,WSSV) | 第16-18页 |
·弧菌(Vibrio) | 第18-19页 |
·对虾的免疫系统 | 第19-28页 |
·器官免疫 | 第20-22页 |
·细胞免疫 | 第22-24页 |
·体液免疫 | 第24-28页 |
·对虾的物理免疫屏障—对虾围食膜的研究进展 | 第28-34页 |
·昆虫围食膜 | 第29-32页 |
·对虾围食膜 | 第32-33页 |
·围食膜研究对于防治对虾WSSV病的展望 | 第33-34页 |
·对虾细胞膜蛋白—四跨膜蛋白Tetraspanin研究进展 | 第34-45页 |
·Tetraspanin的结构 | 第35-37页 |
·高等脊椎动物Tetraspanin在免疫系统中的作用 | 第37-43页 |
·无脊椎动物Tetraspanins | 第43-44页 |
·对虾Tetraspanin的研究对于防治WSSV的展望 | 第44-45页 |
·本研究的目的和意义 | 第45-46页 |
第二章 中国明对虾四跨膜蛋白的体外表达和功能分析 | 第46-83页 |
·前言 | 第46页 |
·材料 | 第46-48页 |
·实验动物、菌株和质粒 | 第46-48页 |
·主要试剂和仪器 | 第48页 |
·方法 | 第48-64页 |
·中国明对虾FcTetraspanin-3中LEL基因的克隆 | 第48-53页 |
·pGEX-LEL原核表达载体的建立 | 第53-54页 |
·中国明对虾FcTetraspanin-3中LEL基因在E.coli BL21中的诱导表达 | 第54页 |
·GST-LEL重组蛋白的纯化 | 第54-55页 |
·多克隆抗体的制备 | 第55页 |
·Western blot | 第55-56页 |
·免疫组化 | 第56-57页 |
·抗体封闭试验 | 第57-59页 |
·RNA干扰试验 | 第59-62页 |
·半定量和绝对定量Real-time PCR | 第62-64页 |
·结果 | 第64-79页 |
·中国明对虾肝胰腺RNA提取 | 第64-65页 |
·FcTetraspanin-3中LEL片段的克隆 | 第65-66页 |
·FcTetraspanin-3中LEL片段表达载体的构建 | 第66页 |
·目的蛋白的表达和抗体检测 | 第66-71页 |
·中国明对虾FcTetraspanin-3的组织分布 | 第71-72页 |
·中国明对虾FcTetraspanin-3在肠和肝胰腺中的细胞定位 | 第72-73页 |
·抗体封闭FcTetraspanin-3蛋白阻断WSSV感染 | 第73-75页 |
·沉默FcTetraspanin-3基因抑制WSSV感染 | 第75-79页 |
·讨论 | 第79-83页 |
第三章 中国明对虾抗菌肽FcCar的表达和抗菌活性分析 | 第83-103页 |
·前言 | 第83页 |
·材料 | 第83-84页 |
·实验动物、病毒、菌株和质粒 | 第83页 |
·主要试剂和仪器设备 | 第83-84页 |
·方法 | 第84-90页 |
·全长cDNA的克隆 | 第84-86页 |
·序列分析 | 第86页 |
·感染实验 | 第86页 |
·半定量Real-time PCR检测FcCar的组织分布和受病原刺激后的表达量变化 | 第86-87页 |
·重组表达载体的构建 | 第87-89页 |
·中国明对虾FcCar基因在E.coli BL21中的诱导表达 | 第89页 |
·His-FcCar重组蛋白的纯化 | 第89页 |
·His-FcCar重组蛋白抗菌活性的测定 | 第89-90页 |
·结果 | 第90-100页 |
·FcCar基因克隆和序列特征 | 第90-94页 |
·FcCar基因的组织分布 | 第94-95页 |
·FcCar基因在中国明对虾不同发育时期的表达变化 | 第95-96页 |
·弧菌或WSSV感染对虾后FcCar转录水平表达量的变化 | 第96-97页 |
·重组蛋白His-FcCar的表达和纯化 | 第97-99页 |
·FcCar蛋白的抑菌活性检测 | 第99-100页 |
·讨论 | 第100-103页 |
结论 | 第103-104页 |
参考文献 | 第104-126页 |
简历 | 第126-128页 |
博士期间完成和已发表的文章 | 第128页 |