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五重PCR检测转基因大豆及其食用油脂的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
1 引言第8-17页
   ·立题的背景和意义第8-9页
   ·转基因食品现状第9-11页
     ·转基因农作物的种植面积第9-10页
     ·转基因农作物的种类及分布第10页
     ·转基因作物的性状分布第10-11页
   ·转基因食品的安全性和转基因标签制度第11-12页
     ·转基因食品的安全性第11-12页
     ·转基因食品标签制度第12页
   ·转基因作物检测技术现状第12-15页
     ·以外源核酸为基础的检测方法第13-15页
     ·以外源蛋白为基础的检测方法第15页
   ·研究内容第15-17页
2 材料与方法第17-23页
   ·试验材料第17页
   ·主要溶液第17-18页
     ·10mol/L氢氧化钠溶液第17页
     ·1mo/L Tris-HCl第17页
     ·500mmol/L乙二铵四乙酸二钠(EDTA)溶液第17页
     ·抽提液第17-18页
     ·裂解液第18页
     ·10mg/mL RNase A第18页
     ·3 M乙酸钠(pH5.6)第18页
     ·TE缓冲液(pH8.0)第18页
     ·50×TAE缓冲液第18页
   ·仪器与设备第18-19页
   ·试剂第19页
   ·试验方法第19-23页
     ·五重PCR反应体系的建立第19页
     ·大豆DNA提取方法第19-20页
     ·食用油脂中DNA提取方法第20页
     ·引物特异性的检测第20-21页
     ·五重PCR反应灵敏度的检测第21页
     ·PCR检测第21-22页
     ·PCR反应产物鉴定第22-23页
3 结果与分析第23-37页
   ·大豆DNA的提取第23-24页
   ·PCR引物的特异性第24-29页
     ·CaMV 35S启动子引物的特异性检测第24-25页
     ·NOS终止子引物的特异性检测第25-26页
     ·CP4-EPSPS基因引物的特异性检测第26-27页
     ·Lectin(大豆凝集素)基因引物的特异性检测第27-28页
     ·NPTⅡ(卡那霉素抗性基因)引物的特异性检测第28-29页
   ·五重PCR体系的建立第29-30页
   ·五重PCR检测已知转基因大豆第30-31页
   ·五重PCR检测体系实际检测市售大豆第31-32页
   ·五重PCR检测市售转基因食用油脂第32-33页
   ·五重PCR的检出限第33-34页
   ·PCR产物测序第34-37页
     ·CaMV 35S启动子第34页
     ·CP4-EPSPS基因第34-35页
     ·Lectin(大豆凝集素)基因第35页
     ·NOS终止子基因第35-36页
     ·NPTⅡ(卡纳霉素抗性)基因第36-37页
4 讨论第37-41页
   ·转基因食品的安全性及其检测技术第37页
   ·多重PCR反应体系引物的设计第37-38页
   ·多重PCR反应体系中引物的浓度确定第38页
   ·大豆中DNA的提取第38页
   ·食用油脂中DNA的提取第38-39页
   ·模板的制备对五重PCR反应体系的影响第39页
   ·多重PCR技术第39页
   ·五重PCR反应体系的确定第39-41页
5 结论第41-42页
参考文献第42-47页
附录第47-52页
在读期间发表的学术论文第52-54页
作者简历第54-55页
致谢第55页

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