| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-21页 |
| ·蛋白酶的简介 | 第12-14页 |
| ·蛋白酶的分布 | 第12页 |
| ·蛋白酶的分类 | 第12-13页 |
| ·丝氨酸蛋白酶的底物专一性 | 第13页 |
| ·微生物蛋白酶的分离纯化 | 第13页 |
| ·丝氨酸蛋白酶的催化机理 | 第13-14页 |
| ·微生物蛋白酶基因工程 | 第14页 |
| ·蛋白质工程 | 第14页 |
| ·微生物丝氨酸蛋白酶的生产 | 第14-15页 |
| ·生产丝氨酸蛋白酶的微生物 | 第14页 |
| ·微生物蛋白酶的生产原料 | 第14-15页 |
| ·微生物蛋白酶的产酶调控 | 第15页 |
| ·蛋白酶生产菌株基因工程选育 | 第15页 |
| ·蛋白酶的应用 | 第15-18页 |
| ·蛋白酶用于洗涤业 | 第15-16页 |
| ·蛋白酶用于饲料行业 | 第16页 |
| ·蛋白酶用于制革与脱毛工业 | 第16页 |
| ·蛋白酶用于丝绸工业 | 第16页 |
| ·蛋白酶用于食品行业 | 第16-17页 |
| ·蛋白酶用于临床医药治疗 | 第17页 |
| ·蛋白酶用于活性肽的生产 | 第17-18页 |
| ·有机溶剂稳定性蛋白酶 | 第18-19页 |
| ·有机溶剂稳定性蛋白酶简介 | 第18页 |
| ·有机溶剂稳定性蛋白酶的酶学性质 | 第18页 |
| ·有机溶剂稳定性蛋白酶的分子特征 | 第18-19页 |
| ·论文的立题依据与研究内容 | 第19-21页 |
| ·立题依据 | 第19页 |
| ·研究内容 | 第19-21页 |
| 第二章 Serratia sp. SYBC H 发酵浮萍生产蛋白酶的研究 | 第21-40页 |
| ·引言 | 第21页 |
| ·材料与方法 | 第21-25页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·实验仪器 | 第22页 |
| ·培养方法 | 第22页 |
| ·蛋白酶活测定方法 | 第22页 |
| ·浮萍成分的元素测定 | 第22页 |
| ·单因素实验 | 第22-23页 |
| ·正交试验 | 第23-24页 |
| ·响应面分析 | 第24页 |
| ·5 L 发酵罐放大研究 | 第24页 |
| ·胞内外酶活研究 | 第24页 |
| ·吐温80 发酵机理研究 | 第24-25页 |
| ·结果 | 第25-37页 |
| ·浮萍成分的元素分析 | 第25页 |
| ·单因素试验 | 第25-29页 |
| ·正交试验 | 第29-31页 |
| ·响应面分析 | 第31-35页 |
| ·5 L 发酵罐放大发酵 | 第35-36页 |
| ·胞内/外酶活研究 | 第36-37页 |
| ·吐温80 发酵机理研究 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-40页 |
| 第三章 Serratia sp. SYBC H 发酵蓝藻产蛋白酶的摇瓶研究 | 第40-52页 |
| ·前言 | 第40页 |
| ·材料与方法 | 第40-42页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·培养基 | 第41页 |
| ·主要实验仪器与试剂 | 第41页 |
| ·蛋白酶活测定 | 第41页 |
| ·种子液与发酵液的培养方法 | 第41页 |
| ·单因素实验 | 第41-42页 |
| ·正交试验 | 第42页 |
| ·响应面分析 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-50页 |
| ·单因素实验 | 第42-46页 |
| ·正交试验 | 第46-47页 |
| ·响应面分析 | 第47-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 Serratia sp. SYBC H 蛋白酶的分离纯化与酶学性质 | 第52-64页 |
| ·引言 | 第52页 |
| ·材料与方法 | 第52-54页 |
| ·菌株 | 第52页 |
| ·实验仪器 | 第52页 |
| ·化学试剂 | 第52页 |
| ·培养基 | 第52页 |
| ·种子培养液的制备 | 第52页 |
| ·酶的制备 | 第52-53页 |
| ·蛋白酶活力测定 | 第53页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第53页 |
| ·蛋白酶的提取及分离纯化过程 | 第53页 |
| ·硫酸铵盐析 | 第53页 |
| ·DEAE-cellulose 离子交换层析 | 第53页 |
| ·Sephadex G-100 分子筛层析 | 第53页 |
| ·蛋白酶电泳 | 第53-54页 |
| ·pH 对蛋白酶的影响 | 第54页 |
| ·温度对蛋白酶的影响 | 第54页 |
| ·MnC1_2 和 CaC1_2 在高温下对蛋白酶热稳定性的影响 | 第54页 |
| ·金属离子对蛋白酶的影响 | 第54页 |
| ·有机溶剂对蛋白酶的影响 | 第54页 |
| ·表面活性剂及抑制剂对蛋白酶的影响 | 第54页 |
| ·蛋白酶动力学研究 | 第54页 |
| ·结果 | 第54-61页 |
| ·硫酸铵盐析饱和度的确定 | 第54-55页 |
| ·DEAE-cellulose 离子交换 | 第55页 |
| ·Sephadex G-100 凝胶过滤 | 第55页 |
| ·纯化结果 | 第55-56页 |
| ·蛋白酶电泳 | 第56-57页 |
| ·pH 对蛋白酶的影响 | 第57-58页 |
| ·温度对蛋白酶的影响 | 第58-59页 |
| ·MnC1_2 和 CaC1_2 对蛋白酶热稳定性的影响 | 第59页 |
| ·金属离子对蛋白酶的影响 | 第59-60页 |
| ·有机溶剂对蛋白酶的影响 | 第60页 |
| ·表面活性剂与抑制剂对蛋白酶的影响 | 第60-61页 |
| ·蛋白酶动力学研究 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| 第五章 Serratia sp. SYBC H 蛋白酶催化水解与合成应用 | 第64-81页 |
| ·前言 | 第64-65页 |
| ·材料与方法 | 第65-67页 |
| ·菌种与材料 | 第65页 |
| ·培养基 | 第65页 |
| ·实验试剂 | 第65页 |
| ·实验仪器 | 第65页 |
| ·培养方法 | 第65页 |
| ·去除血污 | 第65-66页 |
| ·水解羽毛粉 | 第66页 |
| ·作用于头发 | 第66页 |
| ·作用于羊毛 | 第66页 |
| ·以乙酸酐为酰基供体的酯化反应 | 第66页 |
| ·以乙酸乙烯酯为酰基供体的酯化反应 | 第66页 |
| ·蔗糖的标准曲线 | 第66页 |
| ·溶剂体系的选择 | 第66-67页 |
| ·酶量的选择 | 第67页 |
| ·酰基供体与底物之比 | 第67页 |
| ·反应时间的确定 | 第67页 |
| ·产物的纯化 | 第67页 |
| ·产物的结构确定 | 第67页 |
| ·结果 | 第67-79页 |
| ·蛋白酶去除血污 | 第67-68页 |
| ·蛋白酶降解羽毛粉 | 第68-69页 |
| ·蛋白酶作用于头发 | 第69页 |
| ·蛋白酶作用于羊毛 | 第69-70页 |
| ·以乙酸酐为酰基供体的酯化反应 | 第70-71页 |
| ·以乙酸乙烯酯为酰基供体的酯化反应 | 第71-73页 |
| ·溶剂体系的选择 | 第73-74页 |
| ·酶量的选择 | 第74-75页 |
| ·酰基供体与底物之比 | 第75-76页 |
| ·反应时间的确定 | 第76页 |
| ·产物的纯化 | 第76-77页 |
| ·产物的结构确定 | 第77-79页 |
| ·讨论 | 第79-81页 |
| 第六章 Serratia sp. SYBC H 丝氨酸蛋白酶的克隆与分析 | 第81-89页 |
| ·前言 | 第81页 |
| ·材料与方法 | 第81-83页 |
| ·菌株与质粒 | 第81页 |
| ·酶及化学试剂 | 第81页 |
| ·实验仪器 | 第81页 |
| ·培养基 | 第81页 |
| ·Serratia sp. SYBC H 基因组DNA 的提取 | 第81-82页 |
| ·Serratia sp. SYBC H 蛋白酶引物的设计与合成 | 第82页 |
| ·PCR 扩增与PCR 产物测序 | 第82页 |
| ·目的基因片段的回收 | 第82页 |
| ·载体质粒提取 | 第82页 |
| ·酶切 | 第82-83页 |
| ·质粒重组与转化 | 第83页 |
| ·蛋白酶基因序列的测定及分析 | 第83页 |
| ·结果 | 第83-88页 |
| ·Serratia sp. SYBC H 基因组DNA 提取 | 第83页 |
| ·蛋白酶基因的克隆 | 第83-86页 |
| ·蛋白酶基因的分析与比对 | 第86页 |
| ·蛋白酶氨基酸序列分析与比对 | 第86-87页 |
| ·蛋白酶的三级结构预测 | 第87-88页 |
| ·讨论 | 第88-89页 |
| 主要结论与展望 | 第89-92页 |
| 主要结论 | 第89-90页 |
| 展望 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-110页 |
| 论文创新点 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 读博期间发表的论文 | 第112页 |
