| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| 1.1 引言 | 第9-10页 |
| 1.2 雷帕霉素及其衍生物 | 第10-15页 |
| 1.2.1 雷帕霉素理化性质 | 第10页 |
| 1.2.2 雷帕霉素作用机理和药理学 | 第10-12页 |
| 1.2.3 雷帕霉素衍生物 | 第12页 |
| 1.2.4 雷帕霉素生物合成 | 第12-14页 |
| 1.2.5 雷帕霉素菌种选育 | 第14-15页 |
| 1.3 基于质谱分析的代谢组学研究 | 第15-19页 |
| 1.4 本论文研究目标和内容 | 第19-21页 |
| 第二章 雷帕霉素高产菌株选育与发酵优化 | 第21-46页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第21-23页 |
| 2.1.1 菌种 | 第21页 |
| 2.1.2 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.2.1 实验药品 | 第21-22页 |
| 2.1.2.2 仪器设备 | 第22-23页 |
| 2.1.3 培养基 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 雷帕霉素提取方法 | 第23-25页 |
| 2.2.2 雷帕霉素检测方法 | 第25-27页 |
| 2.2.2.1 雷帕霉素 HPLC 检测 | 第25-27页 |
| 2.2.2.2 雷帕霉素生物活性检测 | 第27页 |
| 2.2.3 菌体生物量测定 | 第27页 |
| 2.2.4 单孢子悬液制备 | 第27-28页 |
| 2.2.5 紫外诱变方法 | 第28页 |
| 2.2.6 高产菌株筛选方法 | 第28-29页 |
| 2.2.6.1 诱变菌株初筛 | 第28-29页 |
| 2.2.6.2 诱变菌株复筛 | 第29页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第29-45页 |
| 2.3.1 出发菌株培养条件优化 | 第29-32页 |
| 2.3.1.1 种子培养基优化 | 第29-30页 |
| 2.3.1.2 发酵培养基优化 | 第30-32页 |
| 2.3.2 紫外诱变结果 | 第32-33页 |
| 2.3.3 高产菌株发酵优化 | 第33-45页 |
| 2.3.3.1 发酵培养基优化 | 第33-41页 |
| 2.3.3.2 发酵培养基初始 pH 值优化 | 第41页 |
| 2.3.3.3 种龄优化 | 第41-43页 |
| 2.3.3.4 接种量优化 | 第43-44页 |
| 2.3.3.5 发酵周期的选择 | 第44-45页 |
| 2.4 小结 | 第45-46页 |
| 第三章 代谢轮廓分析指导发酵培养基优化 | 第46-74页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第47-50页 |
| 3.1.1 菌种 | 第47页 |
| 3.1.2 实验药品 | 第47-49页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第49-50页 |
| 3.1.4 培养基和培养方法 | 第50页 |
| 3.2 实验操作与方法 | 第50-54页 |
| 3.2.1 雷帕霉素检测 | 第50-51页 |
| 3.2.2 菌体生物量测定 | 第51页 |
| 3.2.3 发酵液总糖测定 | 第51页 |
| 3.2.4 发酵液中葡萄糖测定 | 第51-52页 |
| 3.2.5 GC-MS 基础的胞内代谢物分析 | 第52-53页 |
| 3.2.6 胞内辅酶 A 化合物分析 | 第53-54页 |
| 3.2.7 数据分析 | 第54页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第54-72页 |
| 3.3.1 不同培养基培养条件下的发酵特性 | 第54-56页 |
| 3.3.2 比较代谢轮廓分析 | 第56-62页 |
| 3.3.3 TCA 循环代谢物和辅酶 A 化合物比较分析 | 第62-64页 |
| 3.3.4 脂肪酸代谢物比较分析 | 第64-65页 |
| 3.3.5 莽草酸代谢物比较分析 | 第65-66页 |
| 3.3.6 赖氨酸分解代谢物比较分析 | 第66-67页 |
| 3.3.7 外源添加策略 | 第67-72页 |
| 3.4 小结 | 第72-74页 |
| 第四章 赖氨酸前体耐受菌株筛选 | 第74-83页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第75页 |
| 4.1.1 菌种 | 第75页 |
| 4.1.2 实验材料 | 第75页 |
| 4.1.2.1 实验药品 | 第75页 |
| 4.1.2.2 实验仪器 | 第75页 |
| 4.1.3 培养基 | 第75页 |
| 4.2 实验操作与方法 | 第75-78页 |
| 4.2.1 赖氨酸耐受菌株筛选步骤 | 第75-77页 |
| 4.2.2 赖氨酸添加优化 | 第77-78页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第78-81页 |
| 4.3.1 菌株对赖氨酸敏感度的测定 | 第78-79页 |
| 4.3.2 赖氨酸耐受菌株筛选 | 第79页 |
| 4.3.3 赖氨酸添加优化 | 第79-81页 |
| 4.3.3.1 赖氨酸添加量优化 | 第79-81页 |
| 4.3.3.2 赖氨酸添加时间优化 | 第81页 |
| 4.4 小结 | 第81-83页 |
| 第五章 结论与展望 | 第83-85页 |
| 5.1 本文结论 | 第83-84页 |
| 5.2 展望 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-94页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |