| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第9-16页 |
| 1.1 假单胞菌的应用 | 第9-10页 |
| 1.2 精氨酸脱亚胺酶的性质及来源 | 第10-12页 |
| 1.3 精氨酸脱亚胺酶的抗肿瘤作用及其应用 | 第12-14页 |
| 1.4 本课题的立题意义及研究内容 | 第14-16页 |
| 2 产精氨酸脱亚胺酶假单胞菌的筛选 | 第16-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第16页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第16页 |
| 2.1.2 试剂 | 第16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-19页 |
| 2.2.1 精氨酸脱亚胺酶产生菌的分离 | 第16-17页 |
| 2.2.2 精氨酸脱亚胺酶产生菌的鉴定 | 第17-19页 |
| 2.3 实验结果 | 第19-23页 |
| 2.3.1 精氨酸脱亚胺酶产生菌的定性 | 第19-20页 |
| 2.3.2 分离菌的形态、生理生化特征及DNA基因序列分析 | 第20-23页 |
| 2.4 讨论 | 第23-24页 |
| 2.5 小结 | 第24-25页 |
| 3 精氨酸脱亚胺酶发酵条件的优化 | 第25-37页 |
| 3.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 3.1.1 主要仪器 | 第25页 |
| 3.1.2 试剂 | 第25页 |
| 3.1.3 试剂的配制 | 第25-26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-28页 |
| 3.2.1 瓜氨酸含量测定 | 第26页 |
| 3.2.2 精氨酸脱亚胺酶的活性检测 | 第26页 |
| 3.2.3 确定初始碳源、氮源及其浓度 | 第26-27页 |
| 3.2.4 诱导物精氨酸浓度的确定 | 第27页 |
| 3.2.5 确定接种量与装液量 | 第27页 |
| 3.2.6 发酵温度温度与起始pH的确定 | 第27页 |
| 3.2.7 确定发酵时间与摇床转速 | 第27-28页 |
| 3.2.8 数据处理与分析 | 第28页 |
| 3.3 实验结果 | 第28-35页 |
| 3.3.1 瓜氨酸标准曲线的绘制 | 第28-29页 |
| 3.3.2 营养条件对精氨酸脱亚胺酶发酵的影响 | 第29-30页 |
| 3.3.3 诱导物浓度对ADI发酵的影响 | 第30页 |
| 3.3.4 环境条件对精氨酸脱亚胺酶发酵的影响 | 第30-33页 |
| 3.3.5 产ADI的最佳发酵条件 | 第33-35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-36页 |
| 3.5 小结 | 第36-37页 |
| 4 精氨酸脱亚胺酶的纯化 | 第37-48页 |
| 4.1 实验材料 | 第37页 |
| 4.1.1 主要仪器 | 第37页 |
| 4.1.2 试剂 | 第37页 |
| 4.2 实验方法 | 第37-40页 |
| 4.2.1 牛血清白蛋白含量测定 | 第37页 |
| 4.2.2 精氨酸脱亚胺酶的分离 | 第37-39页 |
| 4.2.3 精氨酸脱亚胺酶的酶学性质 | 第39-40页 |
| 4.2.4 数据处理与分析 | 第40页 |
| 4.3 实验结果 | 第40-45页 |
| 4.3.1 牛血清白蛋白标准曲线的绘制 | 第40-41页 |
| 4.3.2 精氨酸脱亚胺酶粗酶液的活性 | 第41页 |
| 4.3.3 分级沉淀中硫酸铵浓度对酶活的影响 | 第41-42页 |
| 4.3.4 柱层析分离对酶活性的影响 | 第42-43页 |
| 4.3.5 SDS-PAGE电泳鉴定 | 第43页 |
| 4.3.6 精氨酸脱亚胺酶的分子量 | 第43-44页 |
| 4.3.7 温度与pH对精氨酸脱亚胺酶活性的影响 | 第44-45页 |
| 4.3.8 精氨酸脱亚胺酶的Km值 | 第45页 |
| 4.4 讨论 | 第45-47页 |
| 4.5 小结 | 第47-48页 |
| 5 结论与展望 | 第48-49页 |
| 5.1 结论 | 第48页 |
| 5.2 展望 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 硕士期间发表论文 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 附录一 正交试验中各组的条件 | 第57-58页 |