| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 1. 前言 | 第9-19页 |
| 1.1 野油菜黄单胞菌概述 | 第9-10页 |
| 1.2 黄单胞菌Ⅲ型分泌系统 | 第10-12页 |
| 1.3 黄单胞菌Ⅲ型效应蛋白研究进展 | 第12-17页 |
| 1.3.1 黄单胞菌Ⅲ型效应物的分类和功能 | 第12-15页 |
| 1.3.2 Ⅲ型效应物的筛选和鉴定 | 第15-17页 |
| 1.4 植物先天免疫 | 第17-18页 |
| 1.4.1 PAMPs引发的免疫反应 | 第17-18页 |
| 1.4.2 效应蛋白诱导的免疫反应 | 第18页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-33页 |
| 2.1 材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第19-20页 |
| 2.1.2 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.3 药品和试剂 | 第20-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-33页 |
| 2.2.1 载体构建 | 第23-24页 |
| 2.2.2 碱裂解法小量提取质粒 | 第24页 |
| 2.2.3 氯化铯密度梯度离心大量提取质粒 | 第24-25页 |
| 2.2.4 Xcc基因组DNA快速提取 | 第25页 |
| 2.2.5 三亲接合法敲除基因 | 第25-26页 |
| 2.2.6 拟南芥原生质体提取与转化 | 第26-27页 |
| 2.2.7 细菌致病性及生长曲线分析 | 第27页 |
| 2.2.8 植物培养与转化 | 第27-28页 |
| 2.2.9 荧光素酶双报告系统分析 | 第28页 |
| 2.2.10 MAPK激酶活性分析 | 第28-29页 |
| 2.2.11 活性氧测定 | 第29页 |
| 2.2.12 胼胝体染色 | 第29页 |
| 2.2.13 拟南芥叶片蛋白提取 | 第29页 |
| 2.2.14 Western blot分析 | 第29-30页 |
| 2.2.15 细菌RNA的提取 | 第30页 |
| 2.2.16 RNA样品中DNA的消除 | 第30页 |
| 2.2.17 RT-PCR | 第30-31页 |
| 2.2.18 REAL-TIME PCR | 第31页 |
| 2.2.19 蛋白分泌检测 | 第31页 |
| 2.2.20 GFP定位 | 第31-32页 |
| 2.2.21 His融合蛋白原核表达与纯化 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-50页 |
| 3.1 在Xcc8004中XopR(XC0268)的特点分析 | 第33-34页 |
| 3.2 XopR蛋白分泌依赖于hrcV | 第34页 |
| 3.3 XopR基因在hrpG/hrpX突变体中表达情况检测 | 第34-38页 |
| 3.3.1 内参基因的筛选 | 第34-37页 |
| 3.3.2 XopR基因的表达受HrpG和HrpX调控 | 第37-38页 |
| 3.4 XopR基因缺失突变体的构建 | 第38-39页 |
| 3.5 突变体△XopR补菌株的构建 | 第39页 |
| 3.6 XopR对十字花科植物致病性的影响 | 第39-43页 |
| 3.6.1 △XopR在甘蓝及大白菜致病性检测 | 第39-41页 |
| 3.6.2 △XopR在萝卜中致病性检测 | 第41-42页 |
| 3.6.3 拟南芥致病性检测 | 第42-43页 |
| 3.7 效应蛋白XopR在拟南芥原生质体中抑制flg22诱导的基因表达 | 第43-44页 |
| 3.8 效应蛋白XopR不抑制flg22诱导的MAPK激酶活性 | 第44-45页 |
| 3.9 XopR定位于植物细胞膜 | 第45页 |
| 3.10 XopR拟南芥转基因植株的获得和鉴定 | 第45-46页 |
| 3.11 诱导表达XopR导致转基因拟南芥黄化 | 第46-47页 |
| 3.12 XopR在拟南芥Col-0上行使毒性的功能 | 第47页 |
| 3.13 XopR抑制flg22诱导的ROS的产生和胼胝体的沉积 | 第47-49页 |
| 3.15 XopR在植物细胞中被修饰 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 缩略语表 | 第60-61页 |
| 附录一 实验所用载体图 | 第61-63页 |
| 附录二 实验所用引物 | 第63-64页 |
| 附录三 实验所用仪器与设备 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
