| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 引言 | 第15-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-24页 |
| 1.1 水产品中主要致病菌弧菌概述 | 第16-17页 |
| 1.2 金纳米材料在DNA检测中的应用 | 第17-23页 |
| 1.2.1 金纳米材料简介 | 第17-18页 |
| 1.2.2 纳米金与DNA之间的相互作用 | 第18-19页 |
| 1.2.3 等温核酸扩增技术概述 | 第19-22页 |
| 1.2.4 金纳米材料在等温核酸扩增中的应用 | 第22-23页 |
| 1.3 主要研究目的、意义及创新点 | 第23-24页 |
| 第二章 基于重组酶聚合酶等温核酸扩增技术的水产品中霍乱弧菌快速检测方法的建立 | 第24-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 菌株来源 | 第24-25页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第25页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-27页 |
| 2.2.1 质粒标准品制备 | 第26页 |
| 2.2.2 实时RPA实验 | 第26页 |
| 2.2.3 实时荧光定量PCR实验 | 第26-27页 |
| 2.2.4 RPA方法的灵敏度、特异性和重复性验证 | 第27页 |
| 2.2.5 虾样样品的检测 | 第27页 |
| 2.2.6 数据分析 | 第27页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第27-37页 |
| 2.3.1 qPCR实验 | 第27页 |
| 2.3.2 RPA探针和引物的设计优化 | 第27-28页 |
| 2.3.3 特异性验证试验 | 第28-30页 |
| 2.3.4 RPA方法的灵敏度、特异性和重复性验证 | 第30-32页 |
| 2.3.5 虾样样品检测测试 | 第32-35页 |
| 2.3.6 讨论 | 第35-37页 |
| 2.4 本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 金纳米颗粒参与的RPA比色法检测的条件优化 | 第38-46页 |
| 3.1 实验材料 | 第38页 |
| 3.1.1 菌株来源 | 第38页 |
| 3.1.2 主要试剂、仪器与设备 | 第38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-40页 |
| 3.2.1 金纳米颗粒的合成及表征 | 第39页 |
| 3.2.2 AuNPs-RPA条件 | 第39页 |
| 3.2.3 AuNPs-RPA组分对显色结果的影响 | 第39页 |
| 3.2.4 AuNPs-RPA的特异性、灵敏度和比色特性 | 第39页 |
| 3.2.5 AuNPs-RPA在水产品中霍乱弧菌的检测上的应用 | 第39-40页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第40-45页 |
| 3.3.1 金纳米颗粒的形态特征描述 | 第40页 |
| 3.3.2 AuNPs-RPA原理 | 第40-44页 |
| 3.3.3 AuNPs-RPA特异性、灵敏度和比色特性 | 第44-45页 |
| 3.3.4 AuNPs-RPA在模拟霍乱弧菌污染水产品中的检测上的应用 | 第45页 |
| 3.4 本章小结 | 第45-46页 |
| 第四章 基于SH修饰引物和未修饰金纳米颗粒参与的LAMP可视化检测的条件优化 | 第46-57页 |
| 4.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 4.1.1 菌株来源 | 第46页 |
| 4.1.2 主要试剂、仪器与设备 | 第46-47页 |
| 4.2 实验方法 | 第47-49页 |
| 4.2.1 金纳米颗粒的合成及表征 | 第47页 |
| 4.2.2 弧菌LAMP扩增 | 第47页 |
| 4.2.3 AuNPs-LAMP条件优化 | 第47-49页 |
| 4.2.4 AuNPs-LAMP特异性、灵敏度、比色特性 | 第49页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第49-56页 |
| 4.3.1 基于未修饰AuNPs的LAMP检测方法的机理探讨 | 第49页 |
| 4.3.2 金纳米颗粒的形态特征描述 | 第49-50页 |
| 4.3.3 AuNPs-LAMP的条件优化 | 第50-52页 |
| 4.3.4 基于SH修饰引物的AuNPs-LAMP的特异性、灵敏度和比色特性 | 第52-56页 |
| 4.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第五章 空间位阻介导未修饰金纳米颗粒参与的LAMP比色法检测的条件优化 | 第57-67页 |
| 5.1 实验材料 | 第57页 |
| 5.1.1 菌株来源 | 第57页 |
| 5.1.2 主要试剂、仪器与设备 | 第57页 |
| 5.2 实验方法 | 第57-59页 |
| 5.2.1 金纳米颗粒的合成及表征 | 第57页 |
| 5.2.2 弧菌LAMP扩增条件优化 | 第57-59页 |
| 5.2.3 AuNPs-LAMP条件优化 | 第59页 |
| 5.2.4 AuNPs-LAMP特异性、灵敏度、比色特性 | 第59页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第59-66页 |
| 5.3.1 基于未修饰AuNPs的LAMP检测方法的机理探讨 | 第59-60页 |
| 5.3.2 金纳米颗粒的形态特征描述 | 第60-61页 |
| 5.3.3 基于PEG的AuNPs-LAMP反应 | 第61-66页 |
| 5.4 本章小结 | 第66-67页 |
| 第六章 AuNPs-LAMP在水产品中弧菌检测上的应用及AuNPs-等温核酸扩增方法的比较 | 第67-77页 |
| 6.1 实验材料 | 第67页 |
| 6.1.1 水产品样品 | 第67页 |
| 6.1.2 菌株来源 | 第67页 |
| 6.1.3 实验仪器 | 第67页 |
| 6.1.4 实验试剂 | 第67页 |
| 6.2 实验方法 | 第67-69页 |
| 6.2.1 水产品中弧菌模拟样品 | 第67-68页 |
| 6.2.2 DNA提取与PCR鉴定 | 第68-69页 |
| 6.2.3 SH-primers AuNPs -LAMP在水产品中弧菌的检测上的应用 | 第69页 |
| 6.2.4 PEG AuNPs -LAMP在水产品中弧菌的检测上的应用 | 第69页 |
| 6.3 实验结果与讨论 | 第69-75页 |
| 6.3.1 水产样品体征的描述 | 第69-71页 |
| 6.3.2 水产品副溶血性弧菌DNA模拟样品的DNA提取和PCR扩增 | 第71页 |
| 6.3.3 SH-primers AuNPs -LAMP在模拟污染的副溶血性弧菌水产品检测上的应用 | 第71-72页 |
| 6.3.4 PEG AuNPs -LAMP在模拟污染的弧菌水产品检测上的应用 | 第72-73页 |
| 6.3.5 AuNPs -LAMP在水产品中弧菌的检测上的应用 | 第73-75页 |
| 6.3.6 讨论 | 第75页 |
| 6.4 本章小结 | 第75-77页 |
| 第七章 结论与展望 | 第77-80页 |
| 7.1 基于AuNPs的RPA可视化检测 | 第77-78页 |
| 7.2 基于AuNPs的LAMP可视化检测 | 第78-79页 |
| 7.3 不足与展望 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-96页 |
| 附录 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 攻读博士期间发表的相关论文与工作成果 | 第98页 |
