| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| 1.1 转录因子研究现状 | 第8-12页 |
| 1.1.1 转录因子分类、功能及作用机制 | 第8-9页 |
| 1.1.2 转录因子的调控作用 | 第9-12页 |
| 1.2 转录因子Crz1p与环境胁迫的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.2.1 转录因子Crz1p简介 | 第12-13页 |
| 1.2.2 转录因子Crz1p与环境胁迫的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.2.3 光滑球拟酵母转录因子Crz1p研究现状 | 第14-15页 |
| 1.3 本论文的立题依据和意义 | 第15页 |
| 1.4 本论文的主要研究内容 | 第15-17页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第17-26页 |
| 2.1 材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 培养基和培养条件 | 第17-18页 |
| 2.1.3 试剂和酶 | 第18页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 基因操作 | 第19-23页 |
| 2.2.1 待敲除基因的扩增 | 第19-21页 |
| 2.2.2 敲除框的构建 | 第21页 |
| 2.2.3 敲除菌株的构建与验证 | 第21-22页 |
| 2.2.4 表达载体的构建 | 第22页 |
| 2.2.5 回补菌株的构建与验证 | 第22-23页 |
| 2.3 分析方法 | 第23-25页 |
| 2.3.1 平板生长实验 | 第23页 |
| 2.3.2 生长曲线和细胞活性的测定 | 第23页 |
| 2.3.3 细胞壁多糖的提取和测定 | 第23页 |
| 2.3.4 细胞膜脂肪酸的提取和测定 | 第23-24页 |
| 2.3.5 细胞膜甾醇的提取和测定 | 第24页 |
| 2.3.6 细胞膜磷脂的提取和测定 | 第24页 |
| 2.3.7 质子泵H+-ATPase活性的测定 | 第24页 |
| 2.3.8 细胞膜完整性的测定 | 第24页 |
| 2.3.9 细胞膜流动性的测定 | 第24-25页 |
| 2.4 转录水平分析方法 | 第25-26页 |
| 2.4.1 RNAseq对全基因组转录水平的分析 | 第25页 |
| 2.4.2 q RT-PCR对基因转录水平的分析 | 第25-26页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第26-48页 |
| 3.1 转录因子Crz1p对光滑球拟酵母酸耐受性的影响 | 第26-31页 |
| 3.1.1 转录因子突变菌株的构建与验证 | 第26-28页 |
| 3.1.2 转录因子Crz1p、Rlm1p、Hal6p、Usv1p、Rds2p、Cst6p和Rtg1p对光滑球拟酵母环境耐受性的影响 | 第28-29页 |
| 3.1.3 转录因子Cg Crz1p影响了酸胁迫下的生长能力 | 第29-30页 |
| 3.1.4 小结 | 第30-31页 |
| 3.2 转录因子Crz1p对光滑球拟酵母酸胁迫转录机制的影响 | 第31-38页 |
| 3.2.1 转录组分析酸胁迫对wt与Cgcrz1Δ 菌株的基因表达差异 | 第31-33页 |
| 3.2.2 转录组解析膜脂质合成与代谢途径抑制是Cgcrz1Δ 菌株酸胁迫下生长缓慢的原因 | 第33-36页 |
| 3.2.3 转录组数据准确性的验证 | 第36-37页 |
| 3.2.4 小结 | 第37-38页 |
| 3.3 转录因子Crz1p对光滑球拟酵母酸胁迫生理机制的影响 | 第38-48页 |
| 3.3.1 缺失Cg CRZ1基因改变细胞壁多糖组分 | 第38-39页 |
| 3.3.2 缺失Cg CRZ1基因影响细胞膜脂肪酸组分 | 第39-40页 |
| 3.3.3 缺失Cg CRZ1基因影响细胞膜甾醇组分 | 第40-41页 |
| 3.3.4 缺失Cg CRZ1基因影响细胞膜磷脂组分 | 第41-44页 |
| 3.3.5 缺失Cg CRZ1基因降低酸胁迫下细胞膜质子泵H+-ATPase活性 | 第44-45页 |
| 3.3.6 缺失Cg CRZ1基因降低酸胁迫下细胞膜完整性 | 第45-46页 |
| 3.3.7 缺失Cg CRZ1基因降低酸胁迫下细胞膜流动性 | 第46-47页 |
| 3.3.8 小结 | 第47-48页 |
| 结论与展望 | 第48页 |
| 主要结论 | 第48-49页 |
| 展望 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第57页 |
