| 中文摘要 | 第12-14页 |
| ABSTRACT | 第14-16页 |
| 符号说明 | 第17-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-34页 |
| 1.1 生物防腐剂 | 第18-20页 |
| 1.2 乳链菌肽概述 | 第20-29页 |
| 1.2.1 乳链菌肽的结构 | 第21-22页 |
| 1.2.2 乳链菌肽的理化特性 | 第22页 |
| 1.2.3 乳链菌肽的生物学活性 | 第22-24页 |
| 1.2.4 乳链菌肽的生物合成研究 | 第24-27页 |
| 1.2.5 乳链菌肽的作用机制 | 第27-28页 |
| 1.2.6 乳链菌肽的检测方法 | 第28-29页 |
| 1.3 高产乳链菌肽发酵菌株的选育研究 | 第29-31页 |
| 1.4 乳链菌肽的工业化研究 | 第31页 |
| 1.5 本课题的研究目的与主要内容 | 第31-34页 |
| 第二章 高产乳链菌肽基因工程菌株的构建 | 第34-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-38页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第34-35页 |
| 2.1.2 主要仪器与设备 | 第35页 |
| 2.1.3 相关试剂 | 第35-36页 |
| 2.1.4 培养基及溶液的配制 | 第36-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-46页 |
| 2.2.1 实验流程图 | 第38页 |
| 2.2.2 细菌培养 | 第38-39页 |
| 2.2.3 乳酸乳球菌生长曲线的制定 | 第39页 |
| 2.2.4 菌种保藏 | 第39页 |
| 2.2.5 分子生物学操作 | 第39-46页 |
| 2.2.6 阳性转化子的筛选与鉴定 | 第46页 |
| 2.2.7 重组乳酸乳球菌的筛选与鉴定 | 第46页 |
| 2.3 结果与分析 | 第46-54页 |
| 2.3.1 乳酸乳球菌LS01生长曲线的制定 | 第46-47页 |
| 2.3.2 乳酸乳球菌ATCC11454基因组DNA的提取 | 第47-48页 |
| 2.3.3 目的基因的PCR扩增 | 第48-49页 |
| 2.3.4 重组载体的构建与验证 | 第49-52页 |
| 2.3.5 乳酸乳球菌基因工程菌株的构建与验证 | 第52-54页 |
| 2.4 本章小结 | 第54-56页 |
| 第三章 基因工程菌株的发酵研究 | 第56-70页 |
| 3.1 实验材料 | 第56-57页 |
| 3.1.1 菌种 | 第56页 |
| 3.1.2 主要仪器与设备 | 第56页 |
| 3.1.3 相关试剂 | 第56-57页 |
| 3.1.4 培养基及溶液的配制 | 第57页 |
| 3.2 实验方法 | 第57-63页 |
| 3.2.1 细菌培养 | 第57-58页 |
| 3.2.2 乳链菌肽生产菌株的摇瓶发酵研究 | 第58页 |
| 3.2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第58-59页 |
| 3.2.4 乳链菌肽生物活性检测 | 第59-60页 |
| 3.2.5 乳酸乳球菌的发酵罐发酵研究 | 第60页 |
| 3.2.6 目的基因表达水平检测 | 第60-62页 |
| 3.2.7 基因工程菌株的遗传稳定性实验 | 第62-63页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第63-69页 |
| 3.3.1 基因工程菌株的乳链菌肽发酵能力检测 | 第63-64页 |
| 3.3.2 基因工程菌株的摇瓶发酵动力学研究 | 第64-66页 |
| 3.3.3 乳酸乳球菌的发酵罐发酵研究 | 第66-67页 |
| 3.3.4 目的基因表达水平检测 | 第67-68页 |
| 3.3.5 基因工程菌株的遗传稳定性研究 | 第68-69页 |
| 3.4 本章小结 | 第69-70页 |
| 第四章 基因工程菌株发酵培养基的优化 | 第70-88页 |
| 4.1 实验材料 | 第70-71页 |
| 4.1.1 菌种 | 第70页 |
| 4.1.2 仪器与设备 | 第70-71页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第71页 |
| 4.1.4 培养基 | 第71页 |
| 4.2 实验方法 | 第71-75页 |
| 4.2.1 培养条件 | 第71页 |
| 4.2.2 发酵液残糖(蔗糖)的测定 | 第71-72页 |
| 4.2.3 乳链菌肽效价的检测 | 第72页 |
| 4.2.4 碳源的筛选 | 第72页 |
| 4.2.5 氮源的筛选 | 第72-73页 |
| 4.2.6 Plackett-Burman设计实验 | 第73-74页 |
| 4.2.7 最陡爬坡实验 | 第74页 |
| 4.2.8 Box-Behnken实验设计与响应面模型分析 | 第74-75页 |
| 4.2.9 摇瓶发酵验证 | 第75页 |
| 4.2.10 发酵罐分批补料发酵实验 | 第75页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第75-86页 |
| 4.3.1 不同碳源对乳链菌肽发酵效价的影响 | 第75-76页 |
| 4.3.2 不同氮源对乳链菌肽发酵的影响 | 第76-77页 |
| 4.3.3 影响乳链菌肽效价的显著性因素筛选 | 第77-79页 |
| 4.3.4 最陡爬坡实验结果 | 第79页 |
| 4.3.5 乳链菌肽发酵培养基优化模型的建立 | 第79-82页 |
| 4.3.6 响应面法分析与优化 | 第82-84页 |
| 4.3.7 发酵验证实验 | 第84-85页 |
| 4.3.8 乳链菌肽的发酵罐分批补料发酵实验 | 第85-86页 |
| 4.4 本章小结 | 第86-88页 |
| 总结与展望 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第101-102页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第102页 |
