| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| ·磷脂及磷脂酶 | 第8-9页 |
| ·磷脂 | 第8-9页 |
| ·磷脂酶 | 第9页 |
| ·PLA1 的分类 | 第9-11页 |
| ·动物 PLA1 | 第10-11页 |
| ·植物 PLA1 | 第11页 |
| ·细菌 PLA1 | 第11页 |
| ·微生物 PLA1 研究现状 | 第11-13页 |
| ·国内微生物 PLA1 研究现状 | 第11-12页 |
| ·国外微生物 PLA1 研究现状 | 第12-13页 |
| ·PLA1 的应用 | 第13-14页 |
| ·油脂脱胶 | 第13-14页 |
| ·磷脂改性 | 第14页 |
| ·生产溶血磷脂 | 第14页 |
| ·PLA1 酶活测定方法 | 第14-15页 |
| ·立题意义及研究内容 | 第15-17页 |
| ·立题意义 | 第15-16页 |
| ·研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-26页 |
| ·实验材料 | 第17-19页 |
| ·菌株和质粒 | 第17页 |
| ·工具酶和主要试剂 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17页 |
| ·所用溶液的配制 | 第17-18页 |
| ·主要实验仪器 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-26页 |
| ·细菌基因组的提取 | 第19页 |
| ·酵母基因组的提取（玻璃珠法） | 第19-20页 |
| ·引物设计 | 第20页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第20页 |
| ·酵母感受态制备及转化 | 第20-21页 |
| ·枯草芽孢杆菌感受态的制备及转化 | 第21页 |
| ·PLA1 酶活力测定方法 | 第21-23页 |
| ·重组大肠杆菌的构建 | 第23页 |
| ·重组大肠杆菌生长曲线的测定 | 第23页 |
| ·重组大肠杆菌发酵条件的初步优化 | 第23-24页 |
| ·大肠杆菌 PLA1 重组蛋白的分离纯化 | 第24页 |
| ·SDS-PAGE 及蛋白浓度测定 | 第24页 |
| ·重组毕赤酵母的诱导表达 | 第24页 |
| ·重组枯草芽孢杆菌的表达 | 第24-25页 |
| ·重组毕赤酵母发酵条件的优化 | 第25-26页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第26-44页 |
| ·PLA1 酶活测定方法的确定 | 第26-29页 |
| ·硼砂卵黄平板法 | 第26页 |
| ·碱滴定法 | 第26-27页 |
| ·铜皂分光光度法 | 第27-28页 |
| ·三种酶活力测定方法的比较 | 第28-29页 |
| ·PLA1 基因在大肠杆菌中的克隆表达 | 第29-37页 |
| ·杨氏柠檬酸杆菌 PLA1 基因的克隆 | 第29-30页 |
| ·重组表达质粒 pET28a(+)-pla1 的构建 | 第30-31页 |
| ·重组大肠杆菌 PLA1 基因的诱导表达及酶活力验证 | 第31-32页 |
| ·重组大肠杆菌发酵条件优化 | 第32-34页 |
| ·PLA1 重组蛋白的纯化 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白酶学性质研究 | 第35-37页 |
| ·毕赤酵母和枯草芽孢杆菌重组菌的构建及表达 | 第37-44页 |
| ·毕赤酵母重组菌的构建 | 第37-38页 |
| ·枯草芽孢杆菌重组菌的构建 | 第38-39页 |
| ·毕赤酵母和枯草芽孢杆菌重组菌酶活力比较 | 第39-40页 |
| ·毕赤酵母重组菌发酵条件的优化 | 第40-44页 |
| 主要结论和展望 | 第44-45页 |
| 主要结论 | 第44页 |
| 展望 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第50页 |