| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 绪论 | 第12-25页 |
| 1.1 红曲的文献记载 | 第12-13页 |
| 1.2 红曲菌的生物学地位及分类的研究 | 第13-14页 |
| 1.3 红曲的主要次级代谢产物的研究 | 第14-18页 |
| 1.3.1 色素 | 第14-16页 |
| 1.3.2 莫纳可林K | 第16-17页 |
| 1.3.3 红曲中有害物质—桔霉素 | 第17-18页 |
| 1.4 对红曲的改造研究 | 第18-23页 |
| 1.4.1 诱变技术在红曲菌种改良中的应用 | 第19页 |
| 1.4.2 基因工程技术在红曲菌种改造的应用 | 第19-20页 |
| 1.4.3 原生质体技术在红曲菌种改良中的应用 | 第20-22页 |
| 1.4.4 原生质体形成条件的研究现状 | 第22-23页 |
| 1.5 本研究的目的意义和研究内容 | 第23-25页 |
| 1.5.1 本研究的目的意义 | 第23页 |
| 1.5.2 本研究的内容 | 第23-25页 |
| 2 高产色素红曲菌的分离与筛选 | 第25-33页 |
| 2.1 实验材料及仪器 | 第25页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第25页 |
| 2.1.1.1 红曲分离材料 | 第25页 |
| 2.1.1.2 培养基 | 第25页 |
| 2.1.1.3 实验试剂 | 第25页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-28页 |
| 2.2.1 定向培养分离红曲菌 | 第25-26页 |
| 2.2.1.1 活化分离法 | 第26页 |
| 2.2.1.2 直接分离法 | 第26页 |
| 2.2.1.3 液体扩大培养分离法 | 第26页 |
| 2.2.2 菌种的保存(甘油保存法) | 第26-27页 |
| 2.2.3 高产色素红曲菌的筛选 | 第27页 |
| 2.2.3.1 液体发酵红曲产色素初筛 | 第27页 |
| 2.2.3.2 固态发酵得红曲米产色素复筛 | 第27页 |
| 2.2.4 工厂生产红曲米中试 | 第27-28页 |
| 2.3 实验结果 | 第28-31页 |
| 2.3.1 红曲菌种的分离 | 第28-29页 |
| 2.3.2 菌种的初次筛选 | 第29页 |
| 2.3.3 菌种的复筛 | 第29-30页 |
| 2.3.4 红曲菌中试 | 第30-31页 |
| 2.4 结论与讨论 | 第31-33页 |
| 3 红曲菌的鉴定 | 第33-43页 |
| 3.1 实验材料及仪器 | 第33-34页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第33-34页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-38页 |
| 3.2.1 红曲菌M-3的形态学观察 | 第34页 |
| 3.2.2 光学显微镜盖片观察菌体及孢子形态 | 第34页 |
| 3.2.3 红曲菌M-3的ITS鉴定 | 第34-38页 |
| 3.2.3.1 菌株的培养 | 第35页 |
| 3.2.3.2 总DNA的提取 | 第35页 |
| 3.2.3.3 设计PCR扩增程序 | 第35-36页 |
| 3.2.3.4 从琼脂糖凝胶上回收DNA片段 | 第36-37页 |
| 3.2.3.5 连接反应 | 第37页 |
| 3.2.3.6 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第37页 |
| 3.2.3.7 化学转化 | 第37页 |
| 3.2.3.8 菌落PCR验证 | 第37-38页 |
| 3.2.3.9 核酸序列测定与序列比对分析 | 第38页 |
| 3.3 实验结果 | 第38-42页 |
| 3.3.1 菌落形态 | 第38-39页 |
| 3.3.2 红曲菌的显微镜观察 | 第39-40页 |
| 3.3.3 菌株鉴定 | 第40-42页 |
| 3.3.4 发育进化树 | 第42页 |
| 3.4 结论与讨论 | 第42-43页 |
| 4 红曲菌的原生质体的制备 | 第43-54页 |
| 4.1 实验材料 | 第43-45页 |
| 4.1.1 菌种 | 第43页 |
| 4.1.2 培养基 | 第43页 |
| 4.1.3 酶试剂 | 第43-44页 |
| 4.1.4 主要的药品试剂及配制 | 第44页 |
| 4.1.4.1 主要的药品 | 第44页 |
| 4.1.4.2 主要的试剂的配制 | 第44页 |
| 4.1.5 仪器设备 | 第44-45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-46页 |
| 4.2.1 原生质体制备 | 第45页 |
| 4.2.2 原生质体的再生 | 第45页 |
| 4.2.3 原生质体释放过程的观察 | 第45页 |
| 4.2.4 观察原生质体再生的菌落形态 | 第45页 |
| 4.2.5 单因素对原生质体的形成及再生的影响 | 第45-46页 |
| 4.2.5.1 酶解pH值对原生质体的形成及其再生的影响 | 第45页 |
| 4.2.5.2 酶解时间对原生质体的形成及其再生的影响 | 第45页 |
| 4.2.5.3 酶解温度对原生质体的形成及其再生的影响 | 第45-46页 |
| 4.2.6 原生质体形成及再生的正交试验 | 第46页 |
| 4.2.6.1 原生质体形成正交试验 | 第46页 |
| 4.2.6.2 原生质体再生正交试验 | 第46页 |
| 4.3 结果与分析 | 第46-52页 |
| 4.3.1 原生质体释放的形态观察 | 第46-47页 |
| 4.3.2 红曲菌原生质体的菌落形态 | 第47页 |
| 4.3.3 单因素对原生质体的形成及再生的影响 | 第47-49页 |
| 4.3.3.1 酶解pH值对原生质体的形成及其再生的影响 | 第47-48页 |
| 4.3.3.2 酶解时间对原生质体的形成及其再生的影响 | 第48-49页 |
| 4.3.3.3 酶解温度对原生质体的形成及其再生的影响 | 第49页 |
| 4.3.4 原生质体形成及再生的正交试验 | 第49-52页 |
| 4.3.4.1 原生质体形成正交实验结果 | 第50-51页 |
| 4.3.4.2 原生质体再生正交实验结果 | 第51-52页 |
| 4.4 结论与讨论 | 第52-54页 |
| 5 红曲菌原生质体诱变 | 第54-61页 |
| 5.1 实验材料及仪器 | 第54页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第54页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第54页 |
| 5.2 实验方法 | 第54-55页 |
| 5.2.1 紫外线诱变 | 第54页 |
| 5.2.2 氯化锂诱变 | 第54页 |
| 5.2.3 紫外线和氯化锂联合诱变 | 第54页 |
| 5.2.4 诱变结果的筛选 | 第54-55页 |
| 5.2.5 突变菌的稳定性试验 | 第55页 |
| 5.2.6 工厂生产红曲米中试(见2.2.4) | 第55页 |
| 5.3 实验结果 | 第55-60页 |
| 5.3.1 紫外线诱变 | 第55-56页 |
| 5.3.2 氯化锂诱变 | 第56-57页 |
| 5.3.3 诱变结果的筛选 | 第57-59页 |
| 5.3.3.1 液体发酵初筛 | 第57-58页 |
| 5.3.3.2 固态发酵复筛 | 第58-59页 |
| 5.3.4 突变菌的稳定性试验 | 第59页 |
| 5.3.5 工厂生产红曲米中试 | 第59-60页 |
| 5.4 结论与讨论 | 第60-61页 |
| 6 全文总结与展望 | 第61-63页 |
| 6.1 全文总结 | 第61-62页 |
| 6.2 本文存在的问题及深入的方向 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 附录 | 第69页 |
