摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第9-15页 |
Contents | 第15-21页 |
第一章 绪论 | 第21-32页 |
1.1 国内外土壤活性放线菌研究进展 | 第21-25页 |
1.1.1 土壤中活性放线菌的分布和多样性 | 第21-22页 |
1.1.2 土壤活性放线菌分离 | 第22-23页 |
1.1.2.1 培养基成分 | 第22页 |
1.1.2.2 土壤样品的前处理方法 | 第22页 |
1.1.2.3 杂菌抑制剂选择 | 第22-23页 |
1.1.3 土壤活性放线菌的筛选 | 第23-24页 |
1.1.3.1 十字交叉法 | 第23页 |
1.1.3.2 琼脂块法 | 第23页 |
1.1.3.3 牛津杯法 | 第23-24页 |
1.1.4 具抑菌活性放线菌发酵条件的优化 | 第24页 |
1.1.5 具抑菌活性放线菌代谢产物的分子结构鉴定 | 第24-25页 |
1.2 食品防腐剂的研究进展 | 第25-29页 |
1.2.1 食品防腐剂的发展 | 第25-26页 |
1.2.2 常见食品防腐剂的种类 | 第26-29页 |
1.2.2.1 化学合成防腐剂 | 第27页 |
1.2.2.2 天然防腐剂 | 第27页 |
1.2.2.3 微生物源防腐剂 | 第27-29页 |
1.3 本研究的目的意义及研究内容 | 第29-32页 |
1.3.1 本研究的目的意义 | 第29页 |
1.3.2 本研究的主要内容 | 第29-30页 |
1.3.3 本研究的技术路线 | 第30-32页 |
第二章 土壤中具抑菌活性放线菌的分离及筛选 | 第32-50页 |
2.1 实验材料 | 第32-34页 |
2.1.1 土壤样品 | 第32页 |
2.1.2 培养基 | 第32-33页 |
2.1.2.1 分离培养基 | 第32-33页 |
2.1.2.2 指示菌培养基 | 第33页 |
2.1.2.3 种子培养基及发酵培养基 | 第33页 |
2.1.3 供试指示菌 | 第33页 |
2.1.3.1 细菌 | 第33页 |
2.1.3.2 真菌 | 第33页 |
2.1.4 主要试剂及溶液 | 第33-34页 |
2.1.4.1 化学试剂 | 第33-34页 |
2.1.4.2 主要溶液 | 第34页 |
2.1.5 实验仪器 | 第34页 |
2.1.6 实验用具 | 第34页 |
2.2 实验方法 | 第34-37页 |
2.2.1 土壤的采集及前处理方法 | 第34-35页 |
2.2.2 土壤的稀释方法 | 第35页 |
2.2.3 放线菌的分离 | 第35页 |
2.2.4 放线菌纯化与保种 | 第35-36页 |
2.2.4.1 纯化 | 第35页 |
2.2.4.2 保藏 | 第35-36页 |
2.2.5 活性菌株初筛 | 第36页 |
2.2.6 发酵液的制备 | 第36页 |
2.2.7 活性菌株复筛 | 第36-37页 |
2.3 结果与讨论 | 第37-49页 |
2.3.1 土壤稀释液浓度的确定 | 第37页 |
2.3.2 土壤放线菌的分离 | 第37-38页 |
2.3.3 具抑菌活性土壤放线菌的初筛 | 第38-44页 |
2.3.4 优良放线菌菌株的活性筛选 | 第44-49页 |
2.3.4.1 优良菌株的初筛 | 第44-46页 |
2.3.4.2 优良菌株的复筛 | 第46-49页 |
2.4 本章小结 | 第49-50页 |
第三章 土壤中具抑菌活性放线菌的鉴定 | 第50-58页 |
3.1 实验材料 | 第50-51页 |
3.1.1 培养基 | 第50页 |
3.1.2 主要试剂 | 第50页 |
3.1.3 溶液配制 | 第50-51页 |
3.1.4 实验仪器 | 第51页 |
3.2 实验方法 | 第51-53页 |
3.2.1 形态特征 | 第51页 |
3.2.2 培养特征 | 第51页 |
3.2.3 生理生化反应测定 | 第51-52页 |
3.2.4 16S rDNA序列测定和系统发育树的构建 | 第52-53页 |
3.2.4.1 菌株16S rDNA序列测定 | 第52页 |
3.2.4.2 系统发育树的构建方法 | 第52-53页 |
3.3 结果与讨论 | 第53-56页 |
3.3.1 16S rDNA序列相似性和系统发育分析 | 第53页 |
3.3.2 优良菌株的形态特征 | 第53-55页 |
3.3.3 优良菌株的培养特征 | 第55-56页 |
3.3.4 优良菌株的生理生化特征 | 第56页 |
3.4 本章小结 | 第56-58页 |
第四章 优良抑菌活性放线菌发酵条件优化 | 第58-67页 |
4.1 实验材料 | 第58-59页 |
4.1.1 供试菌株 | 第58页 |
4.1.2 培养基 | 第58-59页 |
4.2 实验方法 | 第59-60页 |
4.2.1 种子液的制备 | 第59页 |
4.2.2 发酵液的预处理 | 第59页 |
4.2.3 抑菌活性的测定 | 第59页 |
4.2.4 单因素试验初步优化放线菌PY-C-21菌株的发酵培养基和发酵条件 | 第59-60页 |
4.3 结果与讨论 | 第60-66页 |
4.3.1 发酵时间的确定 | 第60-61页 |
4.3.2 发酵培养基碳源的确定 | 第61-62页 |
4.3.3 发酵培养基氮源的确定 | 第62页 |
4.3.4 发酵pH的确定 | 第62-63页 |
4.3.5 接种量对菌株PY-C-21发酵产物抑菌活性的影响 | 第63-64页 |
4.3.6 发酵培养基装液量对菌株PY-C-21发酵产物抑菌活性的影响 | 第64-65页 |
4.3.7 摇床转速对菌株PY-C-21发酵产物抑菌活性的影响 | 第65页 |
4.3.8 温度对菌株PY-C-21发酵产物抑菌活性的影响 | 第65-66页 |
4.4 本章小结 | 第66-67页 |
第五章 放线菌发酵产物中活性产物的提取纯化及结构鉴定 | 第67-78页 |
5.1 实验材料 | 第67-68页 |
5.1.1 培养基 | 第67-68页 |
5.1.1.1 活化培养基 | 第67页 |
5.1.1.2 发酵培养基 | 第67-68页 |
5.1.2 化学试剂 | 第68页 |
5.1.3 实验仪器 | 第68页 |
5.2 实验方法 | 第68-71页 |
5.2.1 放线菌PY-C-21活性产物的发酵 | 第68页 |
5.2.2 发酵产物的提取与分离 | 第68-69页 |
5.2.2.1 发酵液的预处理 | 第68-69页 |
5.2.2.2 活性产物的粗分离 | 第69页 |
5.2.3 粗分离产物的纯化 | 第69-70页 |
5.2.3.1 硅胶柱层析纯化粗提取产物 | 第69页 |
5.2.3.2 制备色谱法进一步纯化产物 | 第69-70页 |
5.2.4 菌株PY-C-21活性单体物质的活性测试 | 第70-71页 |
5.2.5 菌株PY-C-21活性单体物质的鉴定 | 第71页 |
5.3 结果与讨论 | 第71-77页 |
5.3.1 硅胶过柱得到的分离产物 | 第71页 |
5.3.2 分离产物的活性检测 | 第71-72页 |
5.3.3 制备色谱分离纯化活性产物 | 第72-73页 |
5.3.4 活性产物结构的初步鉴定 | 第73-77页 |
5.3.4.1 制备分离产物的活性测定 | 第73-74页 |
5.3.4.2 GC-MS和高分辨质谱初步鉴定活性产物的结构 | 第74-77页 |
5.4 本章小结 | 第77-78页 |
结论和展望 | 第78-81页 |
发表论文情况 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-87页 |
致谢 | 第87页 |