双酮还原酶的基因挖掘、表征与重组菌发酵优化研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| ·手性二醇的概述 | 第8-12页 |
| ·手性二醇的作用 | 第8-9页 |
| ·手性二醇合成方法简介 | 第9-10页 |
| ·双羰基还原酶简介 | 第10-12页 |
| ·手性 2,3-丁二醇合成概述 | 第12-15页 |
| ·微生物发酵产 2,3-丁二醇 | 第12-14页 |
| ·手性 2,3-丁二醇的作用及生物合成 | 第14-15页 |
| ·本课题的研究意义及主要研究内容 | 第15-17页 |
| ·本课题的来源 | 第15页 |
| ·本课题的研究意义 | 第15-16页 |
| ·本课题的主要内容 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-24页 |
| ·实验材料 | 第17-19页 |
| ·菌株、基因组与载体 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17页 |
| ·主要试剂及来源 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·实验中所用引物 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-24页 |
| ·酶活测定方法 | 第19-20页 |
| ·羰基还原酶的克隆表达 | 第20页 |
| ·BlBDH的纯化与酶学性质分析 | 第20-22页 |
| ·重组大肠杆菌产BlBDH的发酵条件优化 | 第22-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-43页 |
| ·羰基还原酶的挖掘、克隆表达及蛋白质序列分析 | 第24-28页 |
| ·探针的确定与基因挖掘 | 第24-25页 |
| ·克隆表达与酶活测定 | 第25-27页 |
| ·蛋白质序列分析 | 第27-28页 |
| ·BlBDH的纯化与酶学性质分析 | 第28-35页 |
| ·蛋白纯化 | 第28-29页 |
| ·立体选择性分析 | 第29页 |
| ·蛋白质分子量的确定 | 第29-30页 |
| ·底物谱分析 | 第30-31页 |
| ·最适反应pH | 第31-32页 |
| ·最适反应温度 | 第32-33页 |
| ·动力学参数 | 第33-34页 |
| ·50℃下的温度稳定性 | 第34页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第34-35页 |
| ·重组大肠杆菌产BlBDH的发酵条件优化 | 第35-43页 |
| ·发酵培养基的优化 | 第35-40页 |
| ·诱导条件的优化 | 第40-41页 |
| ·重组大肠杆菌在 3-L发酵罐中的发酵培养 | 第41-43页 |
| 主要结论与展望 | 第43-45页 |
| 主要结论 | 第43页 |
| 展望 | 第43-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52页 |
