| 目录 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-22页 |
| ·甲壳素及壳聚糖概述 | 第12-13页 |
| ·甲壳素简介 | 第12页 |
| ·壳聚糖简介 | 第12-13页 |
| ·壳聚糖衍生物概述 | 第13-16页 |
| ·壳寡糖简介 | 第13-15页 |
| ·羧甲基壳聚糖简介 | 第15页 |
| ·氨基葡萄糖简介 | 第15-16页 |
| ·壳聚糖酶及外切氨基葡萄苷酶概述 | 第16-18页 |
| ·壳聚糖酶的酶学性质 | 第16页 |
| ·壳聚糖酶的纯化方法 | 第16-17页 |
| ·外切氨基葡萄糖酶简介 | 第17-18页 |
| ·本研究目的及意义 | 第18-19页 |
| ·主要技术路线 | 第19-22页 |
| 第2章 产壳聚糖酶菌株的筛选、鉴定 | 第22-34页 |
| ·前言 | 第22页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·试剂 | 第22-23页 |
| ·试剂配置 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·仪器和设备 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-27页 |
| ·初筛 | 第24页 |
| ·复筛 | 第24页 |
| ·壳聚糖酶活力测定 | 第24-25页 |
| ·氨基葡萄糖盐酸盐标准曲线的制作 | 第25页 |
| ·菌株形态学鉴定 | 第25页 |
| ·16S rDNA 鉴定 | 第25-27页 |
| ·系统发育树构建 | 第27页 |
| ·结果 | 第27-32页 |
| ·产壳聚糖酶菌株的筛选 | 第27-28页 |
| ·产壳聚糖酶目的菌株的鉴定 | 第28-29页 |
| ·16S rDNA 序列聚类分析 | 第29-32页 |
| ·本章小结 | 第32-34页 |
| 第3章 产壳聚糖酶菌株发酵条件的优化 | 第34-42页 |
| ·前言 | 第34页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·仪器和设备 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-36页 |
| ·菌株培养方法 | 第35页 |
| ·DNS 法测定酶活力 | 第35页 |
| ·单因子试验对菌株发酵产壳聚糖酶的影响 | 第35-36页 |
| ·正交试验对菌株发酵产壳聚糖酶的影响 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-40页 |
| ·单因子试验对菌株 A502 发酵产酶的影响结果 | 第36-39页 |
| ·正交试验对菌株 A502 发酵产酶的影响结果 | 第39-40页 |
| ·本章小结 | 第40-42页 |
| 第4章 壳聚糖酶的分离纯化及酶学性质研究 | 第42-56页 |
| ·前言 | 第42页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·仪器和设备 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-46页 |
| ·壳聚糖酶的初级纯化 | 第43-44页 |
| ·壳聚糖酶活力的检测 | 第44页 |
| ·壳聚糖酶部分酶学性质的探究 | 第44-45页 |
| ·壳聚糖酶酶解条件的探究 | 第45-46页 |
| ·薄层层析法对酶解产物的分析 | 第46页 |
| ·结果 | 第46-53页 |
| ·壳聚糖酶的初级纯化 | 第46-47页 |
| ·壳聚糖酶的部分酶学性质研究 | 第47-50页 |
| ·壳聚糖酶酶解条件的研究 | 第50-52页 |
| ·薄层层析法分析酶解产物 | 第52-53页 |
| ·本章小结 | 第53-56页 |
| 第5章 嗜热古细菌 Pyrococcus furiosus 外切氨基葡萄糖苷酶的克隆、表达及纯化 | 第56-68页 |
| ·前言 | 第56页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·菌株、质粒、酶 | 第56页 |
| ·试剂 | 第56-57页 |
| ·培养基 | 第57页 |
| ·仪器和设备 | 第57-58页 |
| ·方法 | 第58-62页 |
| ·Pyrococcus furiosus 外切氨基葡萄糖苷酶基因的克隆 | 第58-59页 |
| ·大肠杆菌 DH5α、BL21-CodonPlus (DE3)-RIL 感受细胞制备 | 第59页 |
| ·重组质粒 pET15b-PF0363 转化到 DH5α | 第59页 |
| ·重组质粒 pET15b-PF0363 的提取及鉴定 | 第59-60页 |
| ·Pyrococcus furiosus 外切氨基葡萄糖苷酶的表达与纯化 | 第60-61页 |
| ·蛋白质纯度鉴定 | 第61页 |
| ·外切氨基葡萄糖苷酶 PF0363 的酶活测定 | 第61-62页 |
| ·结果 | 第62-66页 |
| ·Pyrococcus furiosus 外切氨基葡萄糖苷酶的基因序列和蛋白序列 | 第62-63页 |
| ·重组质粒 Pet15b-PF0363 的提取及鉴定结果 | 第63-64页 |
| ·外切氨基葡萄糖苷酶 PF0363 表达与纯化结果 | 第64-65页 |
| ·外切氨基葡萄糖苷酶 PF0363 的酶活测定结果 | 第65-66页 |
| ·本章小结 | 第66-68页 |
| 第6章 总结与展望 | 第68-72页 |
| ·总结 | 第68-70页 |
| ·展望 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 在校期间主要科研成果 | 第78页 |
