| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第10-12页 |
| 1. 前言 | 第12-21页 |
| ·单核细胞增生李斯特菌的概况 | 第12-15页 |
| ·LM生物学特性及血清分型 | 第12页 |
| ·LM的感染过程 | 第12-13页 |
| ·LM的毒力因子 | 第13-15页 |
| ·单核细胞增生李斯特菌的流行病学 | 第15-16页 |
| ·单核细胞增生李斯特菌检测方法的研究进展 | 第16-18页 |
| ·传统的分离鉴定 | 第16页 |
| ·免疫学检测方法 | 第16-17页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第17页 |
| ·免疫胶体金技术 | 第17-18页 |
| ·免疫磁性分离技术 | 第18-19页 |
| ·免疫磁珠的结构 | 第19页 |
| ·免疫磁性分离技术的原理 | 第19页 |
| ·免疫磁性分离技术在LM检测中的应用 | 第19页 |
| ·研究目的与意义 | 第19-21页 |
| 2. 材料与方法 | 第21-36页 |
| ·材料 | 第21-25页 |
| ·载体及菌株 | 第21页 |
| ·实验动物和细胞株 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要器材 | 第22-23页 |
| ·主要溶液配制 | 第23-25页 |
| ·方法 | 第25-36页 |
| ·inlA基因的克隆及蛋白表达 | 第25-29页 |
| ·抗InlA蛋白单克隆抗体的制备 | 第29-31页 |
| ·单核细胞增生李斯特菌多克隆抗体的制备 | 第31-32页 |
| ·单核细胞增生李斯特菌胶体金试纸条的研制 | 第32-34页 |
| ·免疫磁珠的制备 | 第34-36页 |
| 3. 结果与分析 | 第36-50页 |
| ·inlA基因的克隆及蛋白表达 | 第36-39页 |
| ·全长的inlA基因的克隆 | 第36页 |
| ·DNAStar软件对全长inlA基因免疫原性的预测 | 第36-37页 |
| ·目的inlA基因的克隆 | 第37页 |
| ·重组质粒pET-32a-InlA的酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组InlA蛋白的诱导表达 | 第38页 |
| ·用镍柱亲和层析法对包涵体蛋白进行纯化 | 第38-39页 |
| ·纯化蛋白的Western blot检测 | 第39页 |
| ·抗InlA蛋白单克隆抗体的制备 | 第39-41页 |
| ·免疫小鼠血清效价测定 | 第39-40页 |
| ·阳性克隆孔的筛选及杂交瘤细胞株的建立 | 第40页 |
| ·腹水的制备及其效价的测定 | 第40页 |
| ·单克隆抗体亚类的鉴定 | 第40页 |
| ·杂交瘤细胞染色体分析 | 第40-41页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第41页 |
| ·单克隆抗体特异性的鉴定 | 第41页 |
| ·单核细胞增生李斯特菌多克隆抗体的制备 | 第41-43页 |
| ·兔血清效价的测定 | 第41-42页 |
| ·多克隆抗体的纯化 | 第42-43页 |
| ·单核细胞增生李斯特菌胶体金试纸条的研制 | 第43-48页 |
| ·胶体金的制备 | 第43页 |
| ·胶体金标记484单克隆抗体的标记条件 | 第43-44页 |
| ·试纸条的组装及结果判定 | 第44-45页 |
| ·胶体金试纸条的评价 | 第45-48页 |
| ·免疫磁珠的制备 | 第48-50页 |
| ·裸磁珠的制备 | 第48页 |
| ·免疫磁珠的制备 | 第48页 |
| ·用PCR对免疫磁珠进行评价 | 第48-50页 |
| 4. 讨论 | 第50-52页 |
| ·目的基因inlA的选择 | 第50页 |
| ·单抗制备过程中的细胞筛选及克隆 | 第50页 |
| ·影响胶体金制备的因素 | 第50-51页 |
| ·胶体金试纸条的特异性试验 | 第51页 |
| ·单核细胞增生李斯特菌胶体金检测方法 | 第51页 |
| ·免疫磁珠的制备 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58页 |