| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-24页 |
| ·脂肪酶研究进展及其应用 | 第10-17页 |
| ·脂肪酶简介及其特性 | 第10-11页 |
| ·脂肪酶产生菌及高产菌株的选育 | 第11-14页 |
| ·脂肪酶的应用领域及研究进展 | 第14-15页 |
| ·疏棉状啫热丝孢菌耐热脂肪酶应用及研究进展 | 第15-17页 |
| ·丝状真菌表达系统概述 | 第17-22页 |
| ·丝状真菌表达系统研究进展 | 第17-19页 |
| ·丝状真菌的 DNA 转化和 RNA 干扰 | 第19-21页 |
| ·丝状真菌筛选标记 | 第21-22页 |
| ·本课题来源、研究内容和意义 | 第22-24页 |
| ·课题来源 | 第22页 |
| ·研究内容 | 第22-23页 |
| ·研究意义 | 第23-24页 |
| 第二章 无孢黑曲霉的转化及疏棉状啫热丝孢菌耐热脂肪酶在其中表达的研究 | 第24-65页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·实验材料与仪器 | 第24-29页 |
| ·主要实验试剂 | 第24-25页 |
| ·主要培养基 | 第25-26页 |
| ·主要溶液及配方 | 第26-27页 |
| ·主要实验仪器 | 第27页 |
| ·实验使用质粒、菌株 | 第27-28页 |
| ·实验用引物序列 | 第28-29页 |
| ·研究内容 | 第29-48页 |
| ·农杆菌介导转化的耐热脂肪酶基因表达载体构建 | 第29-38页 |
| ·农杆菌介导耐热脂肪酶表达载体转化无孢黑曲霉 SH-2 研究 | 第38-41页 |
| ·原生质体介导转化的耐热脂肪酶基因表达载体构建 | 第41-46页 |
| ·原生质体介导耐热脂肪酶表达载体转化无孢黑曲霉 SH-2 研究 | 第46-47页 |
| ·重组耐热脂肪酶的发酵表达及生物学特性研究 | 第47-48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-63页 |
| ·农杆菌介导转化的耐热脂肪酶基因表达载体构建 | 第48-52页 |
| ·农杆菌耐热脂肪酶转化子的筛选与鉴定 | 第52-56页 |
| ·原生质体介导转化的耐热脂肪酶基因表达载体构建 | 第56-58页 |
| ·原生质体耐热脂肪酶转化子的筛选与鉴定 | 第58-60页 |
| ·重组耐热脂肪酶的发酵表达及其生物学特性研究 | 第60-62页 |
| ·两种转化方案的比较分析 | 第62-63页 |
| ·本章小结 | 第63-65页 |
| 第三章 RNAi 技术对抑制无孢黑曲霉蛋白背景的研究 | 第65-84页 |
| ·引言 | 第65页 |
| ·研究材料与仪器 | 第65-67页 |
| ·主要实验试剂 | 第65页 |
| ·主要培养基 | 第65页 |
| ·主要溶液及配方 | 第65-66页 |
| ·主要实验仪器 | 第66页 |
| ·实验使用质粒、菌株 | 第66页 |
| ·实验用引物序列 | 第66-67页 |
| ·研究内容 | 第67-73页 |
| ·RNAi 元件构建 | 第67-73页 |
| ·原生质体介导 RNAi 元件转化研究 | 第73页 |
| ·RNA 干扰后重组耐热脂肪酶的发酵表达 | 第73页 |
| ·结果与讨论 | 第73-83页 |
| ·RNAi 载体(PamyB-hygB-RNAi)构建 | 第73-76页 |
| ·片段共转化中两片段的构建 | 第76-78页 |
| ·原生质体介导 RNAi 元件的转化 | 第78-82页 |
| ·RNA 干扰后重组耐热脂肪酶的发酵表达 | 第82-83页 |
| ·本章小结 | 第83-84页 |
| 第四章 耐热脂肪酶 amdS-RNAi 转化子发酵小试 | 第84-91页 |
| ·引言 | 第84页 |
| ·研究材料与仪器 | 第84-85页 |
| ·主要实验试剂 | 第84页 |
| ·主要培养基及溶液 | 第84页 |
| ·主要实验仪器 | 第84-85页 |
| ·研究内容 | 第85-86页 |
| ·菌种活化及种子培养 | 第85页 |
| ·2L 发酵罐发酵 | 第85页 |
| ·参数测定 | 第85-86页 |
| ·结果与讨论 | 第86-90页 |
| ·发酵过程监控 | 第86-87页 |
| ·发酵各参数监控 | 第87-88页 |
| ·发酵过程菌体形态监测 | 第88-90页 |
| ·本章小结 | 第90-91页 |
| 结论与展望 | 第91-93页 |
| 本文创新之处 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-101页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 附件 | 第103页 |
