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基因组重排技术选育果糖基转移酶生产菌株的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 绪论第11-26页
   ·立题背景第11-13页
     ·果糖基转移酶的来源及研究现状第11-12页
     ·果糖基转移酶的酶学性质第12-13页
   ·工业微生物育种途径第13-22页
     ·工业微生物育种的方法概述第13-15页
     ·基于基因组重排的原生质体融合育种第15-19页
     ·基因组重排技术的原理及其在菌种选育方面的应用第19-22页
   ·实时荧光定量 PCR 的研究进展第22-24页
     ·荧光定量技术的原理第22页
     ·荧光定量技术的类型第22-23页
     ·实时荧光定量 PCR 的应用第23-24页
   ·本课题研究的意义及内容第24-26页
     ·本课题的研究意义及可行性第24-25页
     ·本课题的主要研究内容第25-26页
第二章 米曲霉原生质体的制备和再生第26-33页
   ·前言第26页
   ·实验材料第26-28页
     ·试验菌株第26页
     ·主要仪器第26-27页
     ·培养基与主要试剂第27页
     ·培养基与溶液的配制第27-28页
   ·实验方法第28-29页
     ·米曲霉菌种的活化第28页
     ·米曲霉生长曲线的测定第28页
     ·原生质体的制备与再生第28-29页
   ·实验结果与讨论第29-32页
     ·米曲霉的生长曲线第29页
     ·原生质体的制备与再生第29-32页
   ·本章小结第32-33页
第三章 基因组重排技术选育米曲霉菌株第33-47页
   ·前言第33页
   ·材料与方法第33-34页
     ·试验菌株第33页
     ·主要仪器第33-34页
     ·培养基与主要试剂第34页
     ·培养基与溶液的配制第34页
   ·实验方法第34-36页
     ·米曲霉分生孢子紫外-氯化锂复合诱变第34-35页
     ·诱变菌株的选择(突变文库的构建)第35页
     ·原生质体的非对称灭活第35页
     ·原生质体融合第35-36页
     ·融合菌株的选择第36页
     ·果糖基转移酶酶活的测定第36页
   ·实验结果与讨论第36-46页
     ·米曲霉分生孢子紫外-氯化锂诱变致死曲线第36-37页
     ·原生质体的非对称灭活第37-38页
     ·原生质体的融合第38-41页
     ·融合菌株与亲本菌株的形态差异性第41页
     ·融合菌株筛选结果第41-43页
     ·液相色谱测定结果第43-45页
     ·融合菌株的遗传稳定性测定第45-46页
   ·本章小结第46-47页
第四章 实时荧光定量 PCR 检测果糖基转移酶基因的表达第47-55页
   ·引言第47页
   ·材料与方法第47-48页
     ·试验菌株第47页
     ·主要仪器第47-48页
     ·培养基与主要试剂第48页
     ·培养基与溶液的配制第48页
   ·实验方法第48-51页
     ·米曲霉 RNA 的提取第48-49页
     ·以 RNA 为模板反转录合成 cDNA第49-50页
     ·实时荧光定量 PCR 反应第50-51页
   ·实验结果与讨论第51-54页
     ·米曲霉 RNA 样品质量检测第51-52页
     ·实时荧光定量 PCR 结果第52-54页
   ·本章小结第54-55页
结论与展望第55-58页
参考文献第58-63页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第63-64页
致谢第64-65页
答辩委员会对论文的评定意见第65页

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