摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 绪论 | 第13-28页 |
·艰难梭菌 | 第13-17页 |
·艰难梭菌及艰难梭菌毒素 | 第13-14页 |
·艰难梭菌毒素 | 第14-15页 |
·艰难梭菌毒素的作用机理 | 第15-17页 |
·艰难梭菌毒素的促凋亡特性 | 第17页 |
·细胞凋亡概论 | 第17-21页 |
·细胞凋亡研究简史 | 第18-19页 |
·细胞凋亡的研究进展 | 第19-21页 |
·活性氧ROS | 第21-25页 |
·活性氧是细胞内氧化还原系统重要的部分 | 第21-22页 |
·ROS的生理作用 | 第22-23页 |
·ROS与细胞凋亡 | 第23-25页 |
·研究意义 | 第25页 |
·研究创新点 | 第25-26页 |
·本课题研究内容 | 第26-27页 |
·本课题技术路线图 | 第27-28页 |
第二章 艰难梭菌毒素B诱导HCT-8细胞产生ROS | 第28-38页 |
·引言 | 第28页 |
·实验材料 | 第28-30页 |
·细胞和毒素 | 第28页 |
·主要药品与试剂 | 第28-29页 |
·实验设备与耗材 | 第29-30页 |
·实验方法 | 第30-34页 |
·溶液的配制 | 第30-31页 |
·实验用具的无菌处理 | 第31页 |
·细胞复苏 | 第31-32页 |
·细胞传代 | 第32页 |
·细胞冻存 | 第32页 |
·毒素的表达 | 第32-33页 |
·毒素的纯化 | 第33页 |
·毒素处理细胞 | 第33-34页 |
·细胞内ROS的检测 | 第34页 |
·实验结果与讨论 | 第34-37页 |
·TcdB亲和层析纯化结果 | 第34-36页 |
·细胞内ROS的产生 | 第36-37页 |
·小结 | 第37-38页 |
第三章 艰难梭菌毒素B诱导HCT-8细胞发生凋亡 | 第38-50页 |
·引言 | 第38页 |
·实验材料 | 第38-40页 |
·细胞和毒素 | 第38页 |
·主要药品与试剂 | 第38-39页 |
·实验设备与耗材 | 第39-40页 |
·实验方法 | 第40-43页 |
·溶液的配制 | 第40-41页 |
·实验用具的无菌处理 | 第41页 |
·细胞复苏 | 第41页 |
·细胞传代 | 第41页 |
·细胞冻存 | 第41页 |
·毒素的表达 | 第41页 |
·毒素的纯化 | 第41页 |
·毒素处理细胞 | 第41页 |
·TcdB的细胞毒性 | 第41-42页 |
·细胞DNA含量检测(SubGl细胞群分析) | 第42页 |
·细胞凋亡的检测 | 第42-43页 |
·实验结果与讨论 | 第43-48页 |
·TcdB引起细胞形态的改变 | 第43-44页 |
·TcdB抑制细胞的増殖 | 第44-45页 |
·TcdB诱导细胞发生凋亡 | 第45-48页 |
·小结 | 第48-50页 |
第四章 ROS与艰难梭菌毒素B诱导的HCT-8细胞凋亡的相关性 | 第50-64页 |
·引言 | 第50页 |
·实验材料 | 第50-52页 |
·细胞和毒素 | 第50页 |
·主要药品与试剂 | 第50-51页 |
·实验设备与耗材 | 第51-52页 |
·实验方法 | 第52-56页 |
·溶液的配制 | 第52-53页 |
·实验用具的无菌处理 | 第53页 |
·细胞复苏 | 第53页 |
·细胞传代 | 第53页 |
·细胞冻存 | 第53页 |
·毒素的表达 | 第53页 |
·毒素的纯化 | 第53-54页 |
·毒素处理细胞 | 第54页 |
·NAC对由TcdB诱导细胞产生的ROS的抑制作用 | 第54页 |
·NAC对由TcdB产生的细胞毒性作用的影响 | 第54页 |
·NAC对由TcdB诱导产生的细胞周期阻滞的影响 | 第54-55页 |
·NAC对由TcdB诱导产生的细胞凋亡的影响 | 第55-56页 |
·实验结果与讨论 | 第56-62页 |
·NAC对由TcdB诱导细胞产生的ROS的作用 | 第56-58页 |
·NAC对由TcdB引起的细胞形态改变的影响 | 第58-59页 |
·NAC对由TcdB引起的细胞增殖抑制的影响 | 第59-60页 |
·NAC对由TcdB引起的细胞凋亡的影响 | 第60-62页 |
·小结 | 第62-64页 |
结论和展望 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-73页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第73-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
附件 | 第75页 |